| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ.Уменьшение времени выхода аналита. >>>
|
 |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
 27.01.2011 // 22:56:50
Да какая разница, там в конце бензойка у всех  я к тому что - как раз под 35%-ный элюент закисленный. Поколоть на вопроизводимость.
|
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
28.01.2011 // 16:22:33
Редактировано 1 раз(а) Тетрациклин? И на чистой воде с ацетонитрилом? Оригинально. Буфер надо, или хотя бы просто подкислить. Тетрациклин- при нормальном рН биполярный ион. В кислой среде- положительно заряженный. Такие штуки без буфера не делают. |
||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
28.01.2011 // 17:04:42
Да пофигу, ну тянется но не сильно кретично, а вот фазу предпочтительнее на С8 или аминке. Зорбакс SBC18 для них ничего. Классические буферы не сильно помогают. Идеально на с18 получалось с натриягептансульфоновой кислотой. А вот на воде с ацетонитрилом видел на hypersil BDS-C18 правда там тоже тянутся |
||
|
MaestrO Пользователь Ранг: 130 |
28.01.2011 // 19:14:08
Бензойку заколол 30-70 ацетонитрил - вода, вышел в мертвом времени. Воду подкислил фосфорной (сделал 0.05%, не стал делать 0.1% подумал как бы колонку не испортить) 30 - 70 ацетонитрил - водный раствор ф-ой к-ты (0.05%) , бензойная имела время выхода 6.4; 6.5;6.5;6.55;6.60. Вроде лучше воспроизводимость результатов стала, единственное тенденция насторожила и давление выросло с 100 до 133 атм. Расслабил корпус предколонки, упало до 90 атм. ( не знал что корпус в котором катридж можно пережать). Ну система вроде как стала стабильнее. Перешел к OTC. В условиях 30 - 70 ацетонитрил - водный раствор ф-ой к-ты (0.05%), OTC выходил на 2,5 минуте. Как и ожидалось, что в принципе не устраивает (фактор емкости около единицы). В условиях 30 - 70 ацетонитрил - (водный раствор ф-ой к-ты(0.05%)+ дигидрофосфат калия 0.02 М) Буфер одним словом)) OTC вышел на 2,7. Увеличив долю буфера до 85, OTC сдвинул до 6.5. Стоило ли кислоту добавлять, может только сделать солевой раствор 0.025М? |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
28.01.2011 // 21:18:30
Зачем так жестоко подкислять-то? Можно было обойтись и нейтральным буфером. Подкисляем (но не Н3РО4) для МС интерфейса. ЗЫ. Дайте кто-нибудь е-майл Islander'а. Так редко пишу, что посеял в какой-то ОС. А надо вопрос задать по LC-MS. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
29.01.2011 // 20:04:54
Редактировано 1 раз(а) Так значит все работает? а в чем была проблема? Не надо в элюент никакой соли, просто отрегулируйте долю ацетонитрила до нужного удерживания. То есть Вы и так это сделали.. теперь просто выбросьте соль.. К слову, 2.5 минуты - для 1 мл-мин и 250х4.6 удерживание равно не единице, а нулю  Кол-во кислоты - это дело вкуса каждого. 0.1% - это вполне себе по-божески. |
||
|
MaestrO Пользователь Ранг: 130 |
29.01.2011 // 23:32:54
Редактировано 1 раз(а) В чем была проблема сказать точно не могу (это и огорчает), но я склонен считать что виновата прошлая линия ацетонитрила, которая пропускает (даже при закрытом клапане на блоке смесителя) и это давало невоспроизводимые результаты. С другой стороны ну протекает она тоже "стабильно", таких совсем сюрпризов с удерживания быть не должно было бы. Без соли конечно же попробую, только думаю что в мертвом времени выйдет. Для того я ее и добавлял чтобы отодвинуть, правда это было на соотношении 70/30. На 85/15 без соли я не пробовал. Колонка у меня 150х2.1 ( я не писал про 250х4.6 ) и скорость 0.2 мл/мин. Я думаю у меня мертвое время около 1,5 мин. ну и соотв посчитал что для 2.5 минут выхода - фактор около единицы.Что касается "вкуса" про кислоту, чем вы руководствуетесь при выборе количества кислоты? |
||
|
MaestrO Пользователь Ранг: 130 |
29.01.2011 // 23:37:21
Создайте тему на форуме, раз касается LC-MS 
|
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
30.01.2011 // 6:37:01
Нет уж. Тут и так уже черт ногу сломит на этом форуме. Движок у него пора менять. Он не самый плохой, но и не самый приличный. Нет ЛС, нет профилей, нет... много чего нет. Нет быстрого ответа, пока пишешь, забудешь о чем там еще шла речь. Зато рейтинги неплохо накручиваются, потому что каждому отвечается в отдельном посте. Каждая правка засчитывается. На XuMuK.ru и то форум удобнее (но там школоты очень много. Впрочем, тут тоже хватает, только они уже отучились и даже степени нахватали  )).
|
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
30.01.2011 // 7:12:56
Для (нормального) разделения некоторых соединений (азотистых оснований, например) и прочего положительно заряженного аналита, полезно создавать хоть какую-то буферную и ионную емкость в элюенте. КонстантинС считает, вероятно, что все колонки теперь заполнены только силикагелями "супер" качества и избавляться от извечной проблемы взаимодействия с силанольными группами нет нужды. Не думаю, что у всех так нормально с колонками, и без финтов с ушами не обходится. Я не представляю, как люди собираются делать тетрациклин совсем без буфера и ионной силы в элюенте. Что вы там наопределяете в итоге? Нужно только помнить, что если в элюенте используются нелетучие буферобразующие компоненты (соли), то нужно задействовать в работу систему промывки сальников в бОшках насосов, иначе они (сальники) сотрутся очень быстро. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 23
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
