| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно? >>>
|
 |
| Автор | Тема: Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно? | |||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
 25.04.2011 // 12:38:10
Столкнулись с проблемами при экстракции вальпроевой кислоты из плазмы крови. Она не вытягивается неполярными растворителями, типа гексана и эфира. Её концентрация в плазме крови очень большая. До 50 мкг/мл. Можно разводить без опасения за чувствительность метода. Вместо экстракции делаем следующее. Плазму крови разводим метанолом 1:10, центрифугируем 13000 rpm, осаждаем белки, супернатант колем напрямую в ГХ-МС (колонка НР-1). Хотелось бы знать, нет ли здесь опасности для колонки. Она неполярная, а в пробе содержится вода - 7-9%. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
 25.04.2011 // 13:29:14
Редактировано 1 раз(а) Ну поставьте эту, как ее , предколонку из обломка какой нибудь колонки. Вода HP-1 не страшна, за масс-спектрометр- не ручаюсь. А касательно почему не экстрагируется- дык все сильные органическкие кислоты присутсвуют в организме в виде солей, а вальпроевая вообще сидит на липопротеидах низкой плотности "свесив хвост". Вломите серняшечки или соляночки и будет Вам хорошая экстракция. |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
25.04.2011 // 13:51:28
Редактировано 1 раз(а) Подкисляли 1 М Н3РО4 - 50/50, после экстрагировали эфиром, гексаном. Очень низкий % экстракции. |
|||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
25.04.2011 // 18:21:38
а ионообменная ТФЭ? а может даже и просто ТФЭ...все таки как вы делалаете не надо лучше, дело не в воде, а в сахарах, минеральных веществах, липидах которые все тоже содержаться в пробе, оседая в лайнере и колонке и ухудшая работу всей системы в целом. может 5-10 вколов ещё ничего сделать, но если на постоянку, я бы поискал другой способ пробоподготовки. |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
26.04.2011 // 10:36:03
Спасибо, примерно о таких вещах я и хотел проконсультироваться. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
03.05.2011 // 21:48:30
Гм... странная получилась методика.. лень смотреть на формулу этой кислоты, но и так ясно, что она прекрасно связывается с белком.. в результате целевое удаляется, а грязь селективно остается 
|
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
04.05.2011 // 11:29:46
Высаливание не пробовали? А еще есть неплохой вариант смешивание крови с безводным сульфатом натрия до сыпучего состояния, а потом - извлечение спиртом изи ацетонитрилом. Подробности не помню, давно было. Так, в качестве идеи. Попробуйте поискать публиказии В.В. Зимнухова. Може о что-нить опубликовал из таких вещей. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
04.05.2011 // 12:13:06
Редактировано 1 раз(а) Только не спиртом, а ацетонитрилом для вэжх или эфиром для гх я это примерно и имел в виду, Андрей, только ждал сначала реакции) наверное, еще перед этой процедурой надо все хорошенько закислить .. я бы закислил, дальше эту "сыпучку" сделать, экстрагировать эфиром.. можно экстракт пропустить через силикагель на всякий случай.. и колоть..
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 7 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
