| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Проблемы в хроматограммах ВЭЖХ - кто сталкивался. отзовитесь! >>>
|
 |
| Автор | Тема: Проблемы в хроматограммах ВЭЖХ - кто сталкивался. отзовитесь! | |||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
 18.07.2011 // 17:39:03
Редактировано 2 раз(а) Уважаемые ВЭЖХ-хроматографисты! Посоветуйте, в чем может быть проблема. Попытаюсь, если удастся, приложить сканированные хроматограммы. Суть вопроса в следующем. Есть три параллельно работающих ВЭЖХ прибора, все три Agilent 1200. При переносе одной и той же методики (те же образцы, та же подвижная фаза и та же колонка) с прибора Agilent 1 на Agilent 2 и Agilent 3, картина существенно меняется - хроматограммы на первом - очень плохая картинка - хвост зашкаливает со всеми вытекающими проблемами , но на втором и третьем - нормальные, с нормальной асимметрией. Проблема «сидит» в приборе Agilent 1. Все три прибора: Agilent 1: срок ввода в эксплуатацию 06/04/06- блок детектора DAD, максимальное давление- 400 бар, показания можно снимать одновременно на 5 длинах волн. Agilent 2: срок ввода в эксплуатацию 31/03/07- блок детектора DAD SL, максимальное давление- 400 бар, показания можно снимать одновременно на 8 длинах волн. Instrument 1( он же, Agilent 3): срок ввода в эксплуатацию 05/12/08- блок детектора DAD SL, максимальное давление- 600 бар, показания можно снимать одновременно на 8 длинах волн. Остальные тех.показатели всех трех приборов, практически, одинаковые. Если не удастся присоединить картинки, поскажите, как это сделать, на форуме это делать еще не приходилось. Заранее благодарю всех отозвавшихся |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Дмитрий (anchem.ru) Администратор Модератор форума Ранг: 4450 |
18.07.2011 // 18:04:50
колонка одинаковая по названию или это на всех трех приборах проверялся один и тот же экземпляр колонки? |
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
18.07.2011 // 18:13:53
Уважаемый Дмитрий! Переносили одну и ту же колонку, тот же образец и ту же подвижную фазу. Готов приложить хроматограммы, но не знаю, как это сделать. |
|||||
|
Дмитрий (anchem.ru) Администратор Модератор форума Ранг: 4450 |
18.07.2011 // 18:25:56
Сделайте скриншоты - потом залейте на files.mail.ru ти выложите здесь ссылки |
|||||
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
18.07.2011 // 19:24:09
Ну вот вы сами проблему и локализовали, а конкретных причин почему одна хроматограмма кривая может быть 1000+1 Попробуйте для начала поменять детекторы между приборами и посмотрите, в детекторе ли дело. Второй (или, скорее, первый) тест попробуйте какую то пробу (типа ацетона) ввести без колонки, прямо в детектор. Посмотрите какое там экстраколоночное размывание, "кривой" ли пик. Если проблема в детекторе (а не на вводе, например) выньте кювету для начала, посмотрите она целая? Нет ли где течи? Так потихоньку проблема и локализуется. |
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
18.07.2011 // 21:01:17
Редактировано 1 раз(а) Ну вот, вроде сделал ссылки, как Вы и посоветовали. Проблемные хроматограммы видны сразу на Agilent 1 Совет по поводу детектора понял, благодарю Вас, уважаемый Spectrometrist. Вы правы, причин может быть море, поэтому с благодарностью приму любые мысли и суждения по данному вопросу. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
18.07.2011 // 22:43:59
Уважаемый Spectrometrist! Поясните, пожалуйста, более подробно о введении ацетона без колонки прямо в детектор. Насколько я понял, необходимо поставить юнион вместо колонки и сделать инжекцию ацетона, допустим, 20 мкл при длине волны (какой?) и посмотреть форму пика? |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
19.07.2011 // 0:17:14
На 2-й и 6-й по Вашему списку хроматограммах - картинка экстраколоночного размывания (поскольку вариант просевшего сорбента в колонках исключен предыдущими хроматограммами) Проверьте пожалуйста во всех соединениях от инжектора до детектора доходят ли до упора капилляры при закручивании их. Вам нужно проверить присоединения 1. петли к инжектору - с двух сторон, 2. капилляра от инжектора к колонке - с двух сторон, 3. капилляра от колонки к детектору - также с двух сторон. Если есть предфильтр или предколонка - то и в них. Процедура довольно муторная, может быть проще заменить по одному или все сразу капилляры. Только тщательно прижимая их к дну соответствующего отверстия. На 4-й хроматограмме я бы предположил кроме экстраколоночного размывания еще случайное наложение основного пика на пик чего-то от предыдущего или еще более раннего ввода. PS "Хвост зашкаливает со всеми вытекающими проблемами" - пока не увидел хроматограммы, ничего не мог понять: в каком же направлении он зашкаливает. PPS Если Agilent 1 у Вас самый ранний, то в какой момент проявился описанный Вами эффект? PPPS Отвечу за Spectrometrist'а Возьмите для начала 1 мкл 1%-ного раствора ацетона в подвижной фазе. 254 нм или около того. Если окажется мало, увеличьте концентрацию в 10 раз. Но не увеличивайте вводимый объем. |
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
19.07.2011 // 10:43:13
Уважаемый господин Волгин! Искренне благодарю за рекомендации. Обязательно все проверим. С уважением |
|||||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
 19.07.2011 // 13:50:55
интересно всегда посмотреть на такие хроматограмки, порассуждать... Про детектор, экстраколоночное размытие напрашивается сразу...но как говорят.. эксперты запросили доп. материалы) Смотрю Кетотифен и WTF соотношу данные: agilent 1 и agilent 2 Дата: 5/3/2011 11/16/2010 - для чистоты эксперимента желательно делать анализ в более приближенные сроки. Может колонка Ваша, VARIAN, я так понимаю Pursuit C8 не приказала долго жить при загрузке.... 20 мкл 100 мкл Площадь 659 280 - ????? а размер частиц (3 мкм?), пор, предколонка есть??? Eka, Nino, Khatuna, Nata - интересный контингент., 4 милых хроматографистки на 3-х машинах - r&b прямотаки. Да и по стабильности состава элюента вопросы: agilent 1 на 30-40-й секундах 2 пика agilent 2 на 50-120-й секундах совсем другая картина Ну и самый важный диагностический признак уважаемые эксперты забыли спросить - давление какое? как оно ведет себя? и еще...фаза как то разделена изначально или все сразу в 1-й бутылочке замешано? пробовали сделать в точности так, как указано в EP на октадециле? Остальные не смотрел, может не надо пока... |
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
19.07.2011 // 22:02:52
Редактировано 5 раз(а) Пользователь удалил свое сообщение |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
