| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
как сделать низкую скорость потока при эксклюзионной хроматографии >>>
|
 |
|
Perchik Пользователь Ранг: 4 |
 09.03.2012 // 1:58:43
ООО, спасибо большое, что проявляете интерес!!)))) Честно ,я тут на какой-то период немного брошена со своей кандидатской, так что если у вас есть время - я могу раскрыть проблему, и буду ужасно рада критике и рекомендациям!!))))) ЭЭ, и Garrу, Вы очень чётко поняли ситуацию - в довольстве у меня только зубило и мать. В общем суть проблемы - у меня получены наночастицы CdSe/ZnS и они покрыты амфифильным полимером (состав полимера: синтезировался из Poly(maleic anhydride-alt-1-octadecene) и ПЭГ c концевой аминогруппой). ангидридная группа вз-т с аминос и образуется амидная связь. Наночастицы покрываются полимером чтобы придать гидрофильные свойства. Но почему-то удачно получаются (то есть потом растворяются в воде) - только если беру сильный избыток полимера. Поэтому мне нужно очистить частицы, покрытые полимером от избыточного полимера. В мире все это делают с помощью ультрацентрифугирования (50 000 - 80 000 rpm). Что у меня за центрифуга? - совершенно верно - советская ,с макс количеством оборотов 8000. Поэтому и приходится искать пути. Как смотреть собираюсь - отделилось или нет. Наночастицы светятся под УФ лампой красным, и их прекрасно видно, как они движутся по колонке, с полимером - сложнее, так как он голубой под УФ, но в смеси с наночастицами - он конечно же не виден (в смеси наночастиц и полимера - глазом видно свечение только наночастиц). По отдельности их в колонке под УФ фонарьком очень хорошо видно, но вот в смеси... Сегодня сделала отдельно хроматографию полимера, но потом поменяла "капельницу" у колонки, и пришлось переделывать! ну я решила взять наночастицы с полимером ! Но проблема в том - что у меня наверху колонки не фрит, а ватка(((( ну и короче я поместила образец на вату, это значит впиталось, а потом когда буфер добавила, - из этой ваты светящиеся частицы повымывались немного вверх, короче - у меня получилось одна полоса - ок, но за ней ещё тянется "хвост", светящийся красным, поэтому про полимеро опять неопределённость. В идеале я думала, что где-то к концу колонки - увижу две полосы - краснцю и голубую. В общем фейл произошёл, завтра всё опять переделывать! Если вдруг сталкивались - такая тонкость - вот эта вата (стекловата) наверху!! Как лучше образец нанести? Можно ли подождать, пока уровень буфера опустится с ватки на гель, а затем иглу вогнать в ватку и осторожненько влить?? (потому что повторюсь - частицы светятся даже в следовых количествах, всё что осталось на стенке потом при добавлении буфера становится красным!!) Ох, извините, что так много тут понаписала!!! Спасибо за помощь и - советам буду очень рада)))) (защита через полгода, очень хочется довести до конечного хорошего результата)))))))))надоел отстой)))) |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
09.03.2012 // 6:26:03
ППЦ.... теперь понятно, почему там нет ничего. Не, с наночастицами- сами разгребайте. |
|
абр Пользователь Ранг: 910 |
09.03.2012 // 11:00:09
Редактировано 1 раз(а) 1. Диализ у вас тоже недоступен? Поспрашивайте, обычно у кого-нибудь мембрана (мешок) припрятаны и забыты  .2. Поменяйте ватку на фильтровальную бумагу, если уж фильтр от PD-10 потеряли. 3. Потери при очистки, влючая размытие слоя в колонке - обычное дело. У вас же нет задачи разделить смесь количественно? |
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
11.03.2012 // 2:56:24
Если не секрет, просветите еще: размер наночастиц и мол. масса полимера? Это я к тому, что ГПХ может разделить объекты, в лучшем случае отличающиеся в 2 раза (по массе, по размеру - возможны вариации, в Вашем случае - тем более). И боюсь, что сефадекс не потянет по разрешению... |
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
12.03.2012 // 11:14:42
Уважаемая, Perchik  , Юрий скорее прав, что Сефадекс G200 может не разделить полимер и полимер+наночастицы на фракции. Ну во-первых интересно знать ММ полимера и полимерного комплекса с наночастицами, чтобы понять из каких соображений Вы избрали Сефадекс G200. Во-вторых, если ММ полимера и комплекса отличаются не в 2 раза, то прийдется выбирать более эффективные сорбенты.Теперь, что касается правил внесения образца : 1. На верх колонки желательно ватку не ложить! 2. Обычно аккуратно палочкой взмучивают верхний слой с буфером и осторожно "скапывают" буфер до верхнего слоя сорбента. Он при этом принимает горизонтальный уровень (очень желательно чтобы без бугров и вздыбленностей). Если не получилось, то опять шприцом добавьте буфер, взмутите верхний слой и осторожно осадите сливая буфер снизу колонки не допуская опускания уровня буфера ниже уровня сорбента более чем на 2- 3 мм !!!! 3. Образец помещают обычно более концентрированным и в небольшом объеме наслаивая (по стенке колонки) на слой сорбента с помощью шприца, на иглу которого надет кусочек тефлонового капилляра при закрытом оттоке буфера снизу. 4. Осторожно скапываете буфер до впитывания образца в верхний слой. 5. Перекрываете отток буфера снизу колонки и аккуратно наслаиваете слой чистого буфера сверху колонки. 6. "Приаттачиваете" верхний адаптер и открываете отток с колонки. 7. Регулируете скорость оттока и скорость притока буфера. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
