Форумы ANCHEM.RU: определение окситетрациклина гидрохлорида

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

определение окситетрациклина гидрохлорида >>>

  Ответов в этой теме: 17
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: определение окситетрациклина гидрохлорида

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

15.03.2012 // 16:36:19

Редактировано 1 раз(а)

здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

El Comandante
Пользователь
Ранг: 88

15.03.2012 // 16:44:46

Tanya L пишет:
здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.

Увеличить содержание органического компанента в подвижной фазе пробовали?
Посмотрите что получится и сообщите.

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

15.03.2012 // 16:52:06

El Comandante пишет:

Tanya L пишет:
здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.
Увеличить содержание органического компанента в подвижной фазе пробовали?
Посмотрите что получится и сообщите.

беру навеску в 20мг и растворяю в 50 мл ПФ. это конц 0,4 мг/мл. еще увеличить?

El Comandante
Пользователь
Ранг: 88

15.03.2012 // 16:56:12

Я имею в виду содержание ацетонитрила в подвижной фазе. Возьмите 50/50, посмотрите, выходит ли пик, потом, откорректируйте соотношение для получения необходимого времени удерживания.

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

15.03.2012 // 16:57:54

меняла, начала от 5%, прогнала до 20 %, буду пробовать дальше

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

03.04.2012 // 10:40:16

выходит на 50% Ацетонетрила/ 50 % Буфер на 3-4 минуте, но очень затянут хвост (аж до 6 мин),

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН
Анализы различных классов соединений (органический синтез, биотехнология, загрязнения почвы, воды, анализ энантиомерного состава) методами ВЭЖХ и ГХ.

El Comandante
Пользователь
Ранг: 88

03.04.2012 // 11:08:01

Tanya L пишет:
выходит на 50% Ацетонетрила/ 50 % Буфер на 3-4 минуте, но очень затянут хвост (аж до 6 мин),

Теперь увеличте содержание буффера до 70%. Проверьте рН элюента, возможно надо чуть подкислить чтобы не хвостило

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

03.04.2012 // 11:19:56

Редактировано 2 раз(а)

рН буфера 3. сейчас попробую до 70% поднять
еще проблема высота и площадь пика возрастают. площадь 1 укол - 0,1234, 2-0,1488, 3-0,1623

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

03.04.2012 // 13:08:06

поменяла на 70%. время выхода почти не изменилось, но показатели площади более стабильны, растут, но не сильно. также ув число теор тарелок

El Comandante
Пользователь
Ранг: 88

03.04.2012 // 13:19:26

Tanya L пишет:
поменяла на 70%. время выхода почти не изменилось, но показатели площади более стабильны, растут, но не сильно. также ув число теор тарелок

Теперь поднимите до 77% буффера и доведите рН буффера до 2,5(хуже не будет, только хвостить возможно меньше будет). Время выхода должно возрасти. Ну и побольше промывайте колонку между заколами. А вообще возьмите учебник по хроматографии и почитайте - разберитесь что к чему. Хотя может оно вам и не надо.

Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

03.04.2012 // 13:26:04

Редактировано 1 раз(а)

учебники по хроматографии читала. со старой колонкой (зорбакс)проблем не было я ее "понимала", а с этой 2 недели уже общий язык ищу. со всех препаратов (попробовала уже 10 штук) проблема только с Окситетрациклином. вот и пришлось искать помощи у более опытных


Ответов в этой теме: 17 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты