Форумы ANCHEM.RU: пределы определения 5-ГМФ ВЭЖХ

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

пределы определения 5-ГМФ ВЭЖХ >>>

Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: пределы определения 5-ГМФ ВЭЖХ

kump
Пользователь
Ранг: 3190

20.03.2012 // 16:00:27

Редактировано 3 раз(а)

Добрый день.
У меня вот какой вопрос.
Определение 5-гидроксиметилфурфурола в мёде и соках регламентируется двумя гостами. ГОСТ Р 52834-2007(мёд) и ГОСТ Р 53694-2009(соки).
Нижний предел измерения 5-ГМФ в обоих гостах одинаков – 1мг/кг. (УФ-детектор 284нм)
При анализе соков проблем не возникает, потому, что они анализируются без разбавления. Самое большое разбавление 1:5 для соков с мякотью и пюре. Такие концентрации определяются без проблем.

Мёд разбавляется в 50 раз (1г мёда на 50 мл воды).
Таким образом, если мы имеем мёд с концентрацией 5-ГМФ 1 мг/кг то, произведя пробоподготовку, мы получаем раствор с концентрацией 5-ГМФ 0,00002мг/мл или 0,02мг/л.
Учитывая, что для анализа берется, предположим, 10мкл, то мы вносим в колонку 0,0000002мг 5-ГМФ или 0,2нг

Вопрос такой. Возможно ли вообще, спектрофотометрически уловить такое количество вещества??
Или я чего-то недопонимаю, или разработчики госта погорячились, поставив такой нижний предел.
Поделитесь своими соображениями.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Волгин
VIP Member
Ранг: 1327

20.03.2012 // 16:20:36

Первое соображение - то, что Вы не приняли в расчет объем кюветы хроматографа - в лучшем случае 10 мкл и размывание зоны вещества при движении по колонке - по крайней мере раз в 5. Так что в кювете будет еще меньше.

В остальном я не копенгаген.

kump
Пользователь
Ранг: 3190

20.03.2012 // 19:37:09

Редактировано 1 раз(а)

Волгин пишет:
Первое соображение - то, что Вы не приняли в расчет объем кюветы хроматографа - в лучшем случае 10 мкл и размывание зоны вещества при движении по колонке - по крайней мере раз в 5. Так что в кювете будет еще меньше.
В остальном я не копенгаген.

Да, действительно. Таким образом, определение такой концентрации делается ещё менее вероятным. Во всяком случае спектрофотометр с кюветой 1см её не берёт, не говоря уже о кювете хроматографа.

Kalambet
Пользователь
Ранг: 484

21.03.2012 // 11:26:25

Определение пикограммов вещества в хроматографии - вещь не такая уж невозможная. все зависит от чувствительности детектора к веществу. Возьмите коэффициент экстинкции Вашего вещества на указанной длине волны и, зная пределы детектора, подсчитайте, какая минимальная концентрация может быть детектирована. Задача примерно 2-го курса. Не исключен вариант, что переход на более короткие длины волн улучшит ситуацию раз в 10 - сильно зависит от УФ-спектра вещества.

ЮН
Пользователь
Ранг: 495

21.03.2012 // 15:02:18

А почему бы вам не развеять ваши сомнения экспериментально ? Приготовьте разведения 5-ГМФ и прогоните через хроматограф. Все равно же будете градуировать прибор. За одно и оцените минимально детектируемую концентрацию 5-ГМФ.

kump
Пользователь
Ранг: 3190

21.03.2012 // 19:24:49

ЮН пишет:
А почему бы вам не развеять ваши сомнения экспериментально ? Приготовьте разведения 5-ГМФ и прогоните через хроматограф. Все равно же будете градуировать прибор. За одно и оцените минимально детектируемую концентрацию 5-ГМФ.

В том-то и дело, что реально нижний предел обнаружения у меня 5мг/кг. (или при пересчёте соответственно 1нг) Что конечно намного ниже нормы (в мёде допускается до 25 мг/кг)и практического значения не имеет, но
я засомневался в возможностях спектрофотометрического определения таких количеств вещества, поскольку, повторяю, такие концентрации не берёт даже спектрофотометр с его сантиметровой кюветой.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Центр коллективного пользования "Состав вещества" ИВТЭ УрО РАН
Центр выполняет по договорам аналитические исследования по элементному и вещественному анализу методами плазменно-эмиссионной спектроскопии, рентгенодифрактометрии, сканирующей электронной микроскопии, рентгеноспектральному и Рамановскому микроанализу на современном оборудовании

kump
Пользователь
Ранг: 3190

21.03.2012 // 19:33:29

Kalambet пишет:
Определение пикограммов вещества в хроматографии - вещь не такая уж невозможная. все зависит от чувствительности детектора к веществу. Возьмите коэффициент экстинкции Вашего вещества на указанной длине волны и, зная пределы детектора, подсчитайте, какая минимальная концентрация может быть детектирована. Задача примерно 2-го курса. Не исключен вариант, что переход на более короткие длины волн улучшит ситуацию раз в 10 - сильно зависит от УФ-спектра вещества.

Вообще-то перед началом снимается спектр вещества и определение производится на максимуме поглощения. Вы хотите сказать, что переход на более короткие волны повысит чувствительность независимо от того будет ли на новой длине волны максимум поглощения или нет? Сомневаюсь.
За первый совет спасибо, как-то не додумался...

Kalambet
Пользователь
Ранг: 484

22.03.2012 // 11:21:45

Редактировано 2 раз(а)

Кроме максимумов поглощения у многих УФ-спектров имеется крутой взлет на коротких (230нм и меньше) длинах волн. Этот взлет вполне может оказаться в те самые 10 раз выше максимума. Главное - не залезть в область нелинейности, где света мало. Следует иметь в виду, что в зависимости от используемого ацетонитрила и буферов эта область может изменяться. Почти наверняка ниже 210 опускаться не стоит, в большинстве случаев там спектры неустойчивы. Можно попробовать 220 - как в розетке


Ответов в этой теме: 7	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты