| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Ряд вопросов по ТСХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Ряд вопросов по ТСХ | |||||
|
Андрейка Пользователь Ранг: 2 |
 19.10.2003 // 22:08:02
Уважаемые "зубры" аналитики! Я работаю с пластинами Merck Kieselgel 60. При элюции с сорбента "поднимается" какая-то желтая грязь, предположительно полимер. Я слышал, что при производстве в кизельгель добавляют небольшой процент неподвижной жидкой фазы. Так ли это? Проводил ли кто нибудь реакции дериватизации аминокислот и пептидов на пластинке? Возможно ли провести секвенирование короткого пептида на пластине? Возможно ли провести ЛОХ на таком сорбенте для отделения аминокислот от пептидов и как правильно приготовить пластинку для этого? Можете ли подсказать литературу по афинной тонкослойке? Заранее благодарен. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Дима Пользователь Ранг: 192 |
20.10.2003 // 3:15:48
Это когда старая очень пластинка, она желтеет по краям. Насколько я знаю это органика деградировавшая. В слое есть крахмал и флуорофор. Надо перед анализами прогнать пластинку в системе, которая будет использоваться и высушить в сушильном шкафу час при 105 град. если подложка алюминиевая, если пластмасса - прогоняем и сушим в эксикаторе на ночь с ваккумным насосом. Желтизна смывается.. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
20.10.2003 // 9:22:01
Редактировано 1 раз(а) Дима прав. Желтый фронт - это органика, сорбированая из воздуха, с пластиковой упаковки и, если пластины выпущены до 91 г., то и продукты разложения крахмала. Сейчас в качестве вяжущего крахмал не используют, а применяют кизельзоль или его предшественник - аэросил. Процедуру кондиционирования пластинок Дима также в общих чертах описал. Есть, правда, один момент, если нет уверенности, что пластинка не щелочная (за счет примесей окиси магния, этим грешат некоторые пластины "Сорбфил" 2-го сорта), есть смысл наряду с кондиционированием провести буферирование сорбента. Для этого достаточно прогнать систему ацетонитрил : 0,0001М раствор фосфорной кислоты 80 : 20 и высушить пластину в вакууме. Далее, дериватизацию аминокислот и пептидов после разделения - пожалуйста, тем же флуорескамином. До разделения, т.е. на старте - не знаю, не пробовал. Думаю, будут проблемы. Впрочем, на пластинке можно разделить и недериватизированные аминокислоты и пептиды без ЛОХ, правда, если смесь не очень сложная. НЖФ в силикагель для ТСХ производители пластинок обычно не добавляют, разве что это какое-то новое веяние. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
20.10.2003 // 15:55:46
Для ЛОХ нужны специальные ТСХ пластины, у меня вроде есть немного - но без понятия- они все еще кем-то выпускаются или нет. |
|||||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
21.10.2003 // 23:22:24
Редактировано 1 раз(а)
Если ты имеешь ввиду то что я думаю, то: есть опыт жесткого секса с фенилизотиоцианатом и аминокислотами... могу рассказать подробнее, если надо. Дело в том что для циклизации - отщепления пластинка не лучшее место на мой взгляд - как никак мои условия (проверенно) 80С / 25% трифторуксусной кислоты в 1м HCl * 5 мин, не очень удобно. |
|||||
|
Андрейка Пользователь Ранг: 2 |
23.10.2003 // 1:25:20
Уважамые коллеги! Большое спасибо за ваши советы. Пластины я использую молодые, им всего 17. Без люминофора. Промываю всегда. Но при проявлении хроматограммы фронт содержит вещество, флюоресцирующее при 250 и 366нм. Проба содержит вещества, поглощающие при этих длинах волн. Но, судя по всему, это не из пробы и не из растворителей. Во как! Костя, а нельзя ли по-подробнее? Как насыщали камеру? Складывали две пластинки? Реактивную смесь вводили несколько раз? |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
25.10.2003 // 23:08:23
нет я говорю про схему Эдмана для сиквенса N-терминального конца. На тсх её не сделать. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 6 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
