| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Разделение ситостерина и холестерина методом тонкослойной хроматографии >>>
|
 |
| Автор | Тема: Разделение ситостерина и холестерина методом тонкослойной хроматографии | ||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
 24.08.2012 // 21:57:29
Здравствуйте! Подскажите пожалуйста систему растворителей и сорбент (желательно силикагель, так как только он в наличии) для разделения в-ситостерина и холестерина при совместном присутствии. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
27.08.2012 // 11:45:01
А вы уверены, что их можно разделить с помощью ТСХ? |
||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
27.08.2012 // 21:58:39
Не уверена, но надеюсь что шанс есть. Смотрела книги по хроматографии, но к сожалению там ничего пока найти не удалось. В основном выделяют фракцию стеринов, получают летучие производные и определяют методом газовой хроматографии. Я в надежде что может быть кто то занимается данной проблематикой и поможет найти решение. |
||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
28.08.2012 // 3:08:57
Редактировано 1 раз(а) Боюсь, лучшего решения, чем GC, вы не найдёте. Сомневаюсь, что тут поможет даже HPTLC. Но если очень хочется, то попробуйте хотя бы аналитическом масштабе поделить их  Нанесите в одну точку холестерин, в другую - ситостерин и разгоняйте в разных системах, а затем смотрите, есть ли достоверные различия в Rf... Стерины, если не ошибаюсь, хорошо проявлять реактивом Либермана-Бурхарда, а это значит, что работать нужно на стеклянных пластинках.
|
||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
28.08.2012 // 7:40:14
У меня неплохо получается проявлять на обыкновенных, правда в качестве проявителя использую смесь конц. уксусной, серной кислот и раствора хлорида железа (iii). Спасибо за совет вам. |
||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
28.08.2012 // 12:28:35
Редактировано 1 раз(а) Р-в Либермана-Бурхарда и есть помесь ледной уксусной с конц. серной Алюминиевая подложка после опрыскивания обычно плохо выдерживает нагрев + начинает осыпаться и пузыриться сорбент )Как вариант, если вам не нужно делать специфическую реакцию на стерины, можно красить 4% раствором фосфорномолибденовой кислоты в 50% водном этаноле(метаноле, изо-пропаноле - по вкусу) и проявлять при +120 градусах 3-5 минут. А на каких пластинах вы работаете? Или сами вообще делаете? ) |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
28.08.2012 // 13:10:06
Холестерин от ситостерина отделить ТСХ проблематично из-за весьма малых различий в структуре, но попробуйте гексан:диэтиловый эфир:уксусная кислота (35 :15 :1). А в качестве проявителя 10 % фосфорномолибденовая кислота в 96% этаноле (для опрыскивания), если для смачивания то состав постом выше. |
||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
28.08.2012 // 16:18:08
Редактировано 2 раз(а) 4% ФМК в 50% этаноле мы юзаем еще и потому, что это не приводит к размытию пятен при опрыскивании, как это случается при работе с чистыми спиртами Приведенная вами ПФ аналогична той, что указывает Моррис Кейтс в "Технике липидологии", но она годится для стеринов вообще; вряд ли в такой системе получится поделить их друг от друга. Может, есть смысл импрегнировать пластинки нитратом серебра, но это только гипотеза
|
||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
28.08.2012 // 20:48:33
Я использую пластинки Сорбифол. А вот насчет пластинок с нитратом серебра читала, что они годятся для отделения ненасыщенных стеринов от насыщенных, так как образуется пи комплекс с ненасыщенной связью. А ситостерин и холестерин насыщенные, если не считать конденсированного скелета. У ненасыщенных есть двойная связь в структуре заместителя, где как я думаю и образуется комплекс. Единственный шанс их разделить в моем понимании это использовать отличия в структуре заместителя. Ведь есть же системы растворителей для разделения например жирных кислот с развнтвленной и неразветвленной структурой. Кстати а кто нибудь пробовал применять расчеты для подбора системы растворителей из книги Гейса "Основы тонкослойной хроматографии"? Я вот пытаюсь разобраться. |
||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
28.08.2012 // 21:07:50
Да, кстати, а кто нибудь пробовал использовать силилирующие агенты типа Sil prep? Если да, то подскажите куда обратиться для покупки. |
||
|
Анна 1201 Пользователь Ранг: 10 |
28.08.2012 // 21:08:04
Редактировано 1 раз(а) Пользователь удалил свое сообщение |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
