Форумы ANCHEM.RU: Афлатоксин М1 на Agilent 1200

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Афлатоксин М1 на Agilent 1200 >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Афлатоксин М1 на Agilent 1200

lc,gc-ms
Пользователь
Ранг: 14

01.03.2013 // 9:39:47

Уважаемые коллеги!
Помогите пожалуйста.
Имею Agilent 1200 c DAD и FLD, колонка Zorbax SB-C18 4.6*150mm 5um, ГСО раствора афлатоксина М1 0,3мкг/мл (бензол:ацетонитрил 98:2)
Возникают трудности. Готовлю раствор 0,03мкг/мл в чистом ацетонитриле (с предварительным выпариванием), ставлю элюенты AcN:H2O 55:45, 1мл/мин, все вроде хорошо. Пик ровный высокий на 2 минуте.
Развожу до 0,003мкг/мл и все. На флюориметре еще видно, а вот на диодной матрице вообще ничего. Так, намек на пик. Просто мне необходимо анализировать М1 на двух детекторах одновременно.
Даже не знаю,что делать. Уже всеми параметрами детектора играл. Вместо воды 0,1% муравьинку ставил. Ни в какую.
Может Вы подскажете условия детектирования, в чем лучше растворять, и параметры DAD, если можно.
Заранее благодарю за помощь.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

01.03.2013 // 10:19:14

Редактировано 2 раз(а)

lc,gc-ms пишет:

Даже не знаю,что делать.

Забыть о DAD (3pg/ul !) или изменять диапазон градуировки, обязательно проверяя при этом линейность на FD. Плюс, конечно, в этом случае надо будет "крутить" пробоподготовку.

Пик на 2мин.? Вы уверены, что это M1, а не бензол?

lc,gc-ms
Пользователь
Ранг: 14

01.03.2013 // 10:24:15

Редактировано 1 раз(а)

virtu пишет:

Забыть о DAD (3pg/ul !) или изменять диапазон градуировки, обязательно проверяя при этом линейность на FD. Плюс, конечно, в этом случае надо будет "крутить" пробоподготовку".

Спасибо.
Получается, ему чувствительности никак не хватит для 3пг?
А если с элюентами играть? Ну допустим, 1% муравьинки, или формиат аммония сделать, или метанола добавить?

И в смысле, "крутить" пробоподготовку"?

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

01.03.2013 // 10:27:09

lc,gc-ms пишет:

Спасибо.
Получается, ему чувствительности никак не хватит для 3пг?
А если с элюентами играть? Ну допустим, 1% муравьинки, или формиат аммония сделать, или метанола добавить?
А смысл? Посмотрите теорию.

lc,gc-ms пишет:

И в смысле, "крутить" пробоподготовку"?
В прямом. Оптимизировать.

lc,gc-ms
Пользователь
Ранг: 14

01.03.2013 // 10:28:24

На 2 минуте точно М1. Проверял по 3D-спектрам на FLD.
И это точно не бензол, т.к. 100 мкл ГСО упариваю досуха и после 1 мл ацетонитрила.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

01.03.2013 // 10:44:30

Редактировано 1 раз(а)

Понятно.

В общем, выбор у Вас не велик. Вы уверены, что DAD необходим?

Почему не делать, как все на FLD?

Да и сделайте MeCN:H2O 40-45:60-55 %v, а то у Вас пик слишком "рано" выходит.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

ИСП-МС Спектрометр Varian 810-MS
Спектрометр индуктивно-связанной плазмы с масс-спектрометрическим детектированием Varian 810-MS это максимальные аналитические возможности и максимальная простота в управлении. Спектрометр 810-MS позволяет определять 75 элементов за 1 минуту в линейном диапазоне от десятых долей ppt до десятков процентов.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

lc,gc-ms
Пользователь
Ранг: 14

01.03.2013 // 10:58:53

virtu пишет:
Понятно.

В общем, выбор у Вас не велик. Вы уверены, что DAD необходим?

Почему не делать, как все на FLD?

Да и сделайте MeCN:H2O 40-45:60-55 %v, а то у Вас пик слишком "рано" выходит.

Ну DAD нужен только для подтверждения,что это М1. Ладно. Буду использовать только FLD.

А насчет метанола. Даже не знаю. Не будет ли шума, экстраколоночного эффекта?

Linza
Пользователь
Ранг: 39

01.03.2013 // 11:35:50

Редактировано 2 раз(а)

lc,gc-ms пишет:
Уважаемые коллеги!
Помогите пожалуйста.
Имею Agilent 1200 c DAD и FLD, колонка Zorbax SB-C18 4.6*150mm 5um, ГСО раствора афлатоксина М1 0,3мкг/мл (бензол:ацетонитрил 98:2)
Возникают трудности. Готовлю раствор 0,03мкг/мл в чистом ацетонитриле (с предварительным выпариванием), ставлю элюенты AcN:H2O 55:45, 1мл/мин, все вроде хорошо. Пик ровный высокий на 2 минуте.
Развожу до 0,003мкг/мл и все. На флюориметре еще видно, а вот на диодной матрице вообще ничего. Так, намек на пик. Просто мне необходимо анализировать М1 на двух детекторах одновременно.
Даже не знаю,что делать. Уже всеми параметрами детектора играл. Вместо воды 0,1% муравьинку ставил. Ни в какую.
Может Вы подскажете условия детектирования, в чем лучше растворять, и параметры DAD, если можно.
Заранее благодарю за помощь.

Концентрация действительно низкая для определения на DAD. Пробу Вы растворяете в чистом ацетонитриле, а это более сильный элюэнт, чем сама ПФ, которой Вы пользуетесь - что не есть хорошо. Рекомендуется применять растворитель пробы, который является более слабым элюентом, чем ПФ или растворять пробу в ПФ. У Вас внутренний объем колонки (исключая объем НФ) около 1,5 мл +/-15%, а пик выходит на второй минуте - т. е. вещество практически не задерживается на колонке. Попробуйте растворять пробу в ПФ, и примените градиент, предложенный уважаемым Virtu.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

01.03.2013 // 13:58:13

lc,gc-ms пишет:

А насчет метанола. Даже не знаю. Не будет ли шума, экстраколоночного эффекта?

Если есть возможность доставать регулярно MeOH (HPLC grade), то можно сделать MeCN:MeOH, 1:1, например. Но, во-первых, у Вас должна быть методика, а во-вторых, оптимизацию состава элюента имеет смысл делать только на реальных пробах. В общем, не надо ничего усложнять, начните с MeCN.

Прислушайтесь к Linza, сэмпл (и стандарты), действительно лучше растворять в элюенте (начальный состав, если используется градиент).

Выше указал, возможный состав элюента для изократики. Градиент в таком узком диапазоне делать не надо.

lc,gc-ms
Пользователь
Ранг: 14

01.03.2013 // 15:39:35

Всем спасибо за помощь!
Развел стандарт в AcN:H2O (1:1) и сделал градиент с 40 до 60 AcN. Все отлично.
Еще раз спасибо!

ola_fm
Пользователь
Ранг: 13

04.03.2013 // 16:54:00

lc,gc-ms пишет:
Всем спасибо за помощь!
Развел стандарт в AcN:H2O (1:1) и сделал градиент с 40 до 60 AcN. Все отлично.
Еще раз спасибо!

Подскажите, вы по какой методике анализируете и в чем растворяете пробы?


Ответов в этой теме: 15 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты