| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Есть ли медь в белковой молекуле? >>>
|
 |
| Автор | Тема: Есть ли медь в белковой молекуле? |
|
Alex-Pavlov Пользователь Ранг: 1 |
 25.11.2005 // 19:31:37
Подскажите пожалуйста, у меня есть белок я хочу узнать содержит ли он в своем составе ион меди, есть ли какой-нибудь качественный анализ? |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
bf109xxl Пользователь Ранг: 1727 |
28.11.2005 // 16:32:38
Есть. Качественный (т.е., без количественного определения), но приборный. Обычно используют ААС (если белок уже выделен) или (гораздо чаще, по крайней мере, в нашей "конторе") связку ГПХ-ИСП-МС, если требуется разделение. Можно и ЛА-ИСП-МС после гель-электрофоретического разделения, но там свои сложности (например, потеря - полная или частичная - меди вследствие денатурирования белка при использовании додецилсульфата). Кстати, медь предположительно как связывается - специфически или нет? Вроде бы, можно что-то похожее и ESI-MS определять... |
|
Ed VIP Member Ранг: 3345 |
28.11.2005 // 17:27:58
Остатки серого вещества упорно напоминают мне, что качественно, не разрушая белок, парамагнитный ион меди можно почувствовать ЭПРом. А как это сделать? Может среди нас есть ЭПРщики - скажут! |
|
bf109xxl Пользователь Ранг: 1727 |
28.11.2005 // 23:55:45
Можно, конечно. Только хватит ли чувствительности с учетом реально доступных количеств белка? Можно ли померять в водном растворе, а не в органическом растворителе? Я с ЭПРом дел не имел, но тоже было бы интересно выслушать мнение спецов... |
|
Al_chemist Пользователь Ранг: 70 |
29.11.2005 // 12:11:55
ЭПР метод хороший, но не для аналитических целей. Форма сигнала сильно зависит от типа координации иона, времен спин-спиновой и спин-решеточной релаксаций, от полярности растворителя и температуры. Идеальные растворители - неполярные. В спиртах удается снять спектр с большим трудом, а водные растворы иногда удается исследовать только в миллиметровых ампулах, где абсолютное количество образца мало. Следует также учесть, что отсутствие сигнала не является 100% доказательством отсутствия парамагнитных частиц. К примеру, сигнал ионов кобальта в растворах практически невозможно обнаружить из-за времен релаксации. Правда, ионы меди в большинстве случаев имеют достаточно выраженный асимметричный сигнал. Лучше регистрировать спектры при низких температурах (77К - жидкий азот, это стандартная для ЭПР методика). Определение абсолютного количества спинов в ЭПР спектроскопии делают обычно по калиброванному стандарту - погрешность около 20%. Можно поискать работы по ЭПР (ESR) исследованиям белковых комплексов меди. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 4 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
