| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Не могу разобраться с количественным определением в ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Не могу разобраться с количественным определением в ВЭЖХ |
|
MissBliss Пользователь Ранг: 2 |
 11.01.2014 // 19:20:37
Здравствуйте, срочно нужна помощь понимающих в ВЭЖХ людей. Вопрос может будет немного не корректен, не судите строго. Мне нужно найти формулу для количественного определения парацетамола. Я нашла методику в интернете и там они определяют количество парацетамола в таблетке в граммах. Мне нужна формула для определения концентрации парацетамола в водном растворе. Подскажите как преобразовать формулу, если это возможно! Вот методика. Количественное определение содержания парацетамола, методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Оборудование и реактивы. Установка для вакуумной фильтрации и дегазации подвижной фазы; Фильтры мембранные тефлоновые с размером пор 0,4-0,5 мкм, диаметром 47 мм; Мембранный вакуумный насос, создающий вакуум от 240 мм.рт.ст. и ниже; Ультразвуковая баня; Микрошприц для ВЭЖХ, объёмом 10 мм3: 2 штуки; Колба мерная, объёмом 1000 мл: 2 штуки; Колба мерная, объёмом 100 мл; Колба мерная, объёмом 50 мл; Колба мерная, объёмом 25 мл: 2 штуки; Цилиндр мерный, объёмом 500 мл; Пипетка градуированная, объёмом 2 мл; Пипетка градуированная, объёмом 5 мл; Воронка для фильтрования; Фильтровальная бумага; Стакан, объёмом 50 мл; Вода дистиллированная по ГОСТ 6709: 1,5 л (на всю группу студентов); Кислота орто-фосфорная, ХЧ или ЧДА, 3 мл; Ацетонитрил ХЧ: 900 мл (на всю группу студентов); Парацетамол, субстанция: 0,05 г; Основные параметры настройки хроматографа. Высокоэффективный жидкостной хроматограф с градиентным насосом на два растворителя, спектрофотометрическим детектором с переменной длиной волны или детектором диодной матрицы, оснащённый системой обработки хроматографических данных на базе персонального компьютера. Колонка аналитическая, размером 250×4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом С18 с диаметром частиц 5 мкм. Подвижная фаза А: 10 % ацетонитрила – 90 % 0,12 % раствора орто-фосфорной кислоты в воде; подвижная фаза Б: 50 % ацетонитрила – 50 % 0,12 % раствора орто-фосфорной кислоты в воде, линейный градиент от 100 % раствора А до 100 % раствора Б за 20 минут, скорость потока: 0,9 – 1,0 мл/мин; детектирование выполняют по поглощению в УФ-области спектра при длине волны 280 нм. Инжектируемый объём образца – 10 мм3. Порядок выполнения работы. 1. Приготовление подвижной фазы. Приготовление раствора А. В мерную колбу объёмом 1000 мл наливают около 900 мл воды дистиллированной. С помощью градуированной пипетки на 2 мл добавляют 1,5 мл кислоты орто-фосфорной. Далее в мерный цилиндр объёмом 500 мл наливают 100 мл ацетонитрила и добавляют к раствору в мерной колбе. Объём доводят до метки дистиллированной водой, раствор перемешивают и отфильтровывают на установке для фильтрации и дегазации подвижной фазы через тефлоновый мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Приготовление раствора Б. Во вторую мерную колбу объёмом 1000 мл наливают около 500 мл воды дистиллированной, мерной пипеткой добавляют 1,5 мл кислоты орто-фосфорной, раствор перемешивают и с помощью мерного цилиндра на 500 мл приливают 500 мл ацетонитрила, раствор тщательно перемешивают и отфильтровывают на установке для фильтрации и дегазации подвижной фазы. Далее готовые растворы А и Б, примерно по 500 мл каждого наливают в специальные ёмкости хроматографа, подключённые, соответственно, к каналам А и Б градиентного насоса. 2. Приготовление рабочего стандартного раствора (РСО). Приготовление раствора РСО. Около 0,05 г (точная навеска) парацетамола, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл ацетонитрила, помещают в ультразвуковую баню на 10-15 мин, доводят объём раствора подвижной фазой А из мерной колбы на 1000 мл до метки и перемешивают. 3. Подготовка исследуемого образца и выполнение хроматографического анализа. Десять таблеток взвешивают, определяют среднюю массу одной таблетки, помещают в фарфоровую ступку и растирают с помощью фарфорового пестика. На аналитических весах взвешивают около 0,55 г (точная навеска) порошка растёртых таблеток и переносят в мерную колбу объёмом 50 мл, прибавляют 40 мл ацетонитрила, колбу помещают в льтразвуковую баню на 20-25 минут, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки, помещают в ультразвуковую баню на 5 минут. Затем выдерживают суспензию 5 минут без перемешивания. С помощью градуированной пипетки на 5 мл отбирают 2,5 мл надосадочной жидкости, которую помещают в мерную колбу объёмом 25 мл, доводят объём раствора подвижной фазой А до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр в стакан объёмом 50 мл. Раствор должен быть свежеприготовленным. Включают жидкостной хроматограф, устанавливают рабочие параметры для данной методики, колонкууравновешивают подвижной фазой А до достижения стабильной базовой линии. Микрошприцем для ВЭЖХ, либо с помощью автосамлера (если он установлен на данный прибор) вводят в инжектор хроматографа 10 мм3 раствора РСО и элюируют в режиме линейного градиента от соотношения растворов А и Б 100:0 до соотношения растворов А и Б 0:100 за 20 минут. Регистрируют хроматограмму. Хроматографирование раствора РСО повторяют ещё дважды. По трём параллелям определяют среднее время удерживания, площади (высоты) хроматографических пиков парацетамола, кофеина и кислоты ацетилсалициловой. Вводят в хроматограф испытуемый раствор таблеток. Регистрируют хроматограмму. Содержание парацетамола и кислоты ацетилсалициловой в одной таблетке в граммах (Х) вычисляют по формуле: X=(5S1 a0 b)/(S0 a1 ) , где S1 – площадь хроматографического пика соответствующего компонента на хроматограмме испытуемого раствора; S0 – площадь хроматографического пика соответствующего компонента на хроматограмме раствора РСО; а1 – навеска порошка растёртых таблеток, грамм; а0 – навеска РСО соответствующего компонента, грамм; b – средняя масса таблетки, грамм. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
trace Пользователь Ранг: 69 |
12.01.2014 // 1:23:09
C(рсо)S1/S0, C(рсо)=0,5 г/дм3 (в зависимости от точной навески) |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 1 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
