Форумы ANCHEM.RU: Отклик янтарной кислоты в ВЭЖХ DAD

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Отклик янтарной кислоты в ВЭЖХ DAD >>>

Ответов в этой теме: 10

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Отклик янтарной кислоты в ВЭЖХ DAD

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

04.09.2014 // 11:11:27

Добрый день, уважаемые коллеги, как начинающие, так и корифеи. Вступление: закалываю стандарт янтарной кислоты концентрацией 100мг на литр. Объем вводимой пробы 50мкл. Получаю пик высотой 22mAU. Детектор Agilent 1260 infiniti G1316A (DAD). Вопрос: настолько плохо поглощает янтарная кислота? Увеличивать концентрацию стандартного раствора? Страшно за колонку? Или с данным типом детектора не возможно ее определить? Заранее благодарю за любую помощь.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Osokin
Пользователь
Ранг: 54

04.09.2014 // 13:38:57

В принципе ее определить с данным типом детектора возможно. Вопрос лишь в том, а что именно Вы хотите определить? От этого будет зависеть и метод разделения, который предполагается перед детектированием.

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

04.09.2014 // 14:31:00

Определить янтарную кислоту нужно в шипучей водорастворимой таблетке, в состав которой входит декстроза, сода, лимонная кислота, хлорид натрия, полиэтиленгликоль, хлорид калия. Но, к сожалению на данный момент меня смущает именно соотношение концентрация:сигнал. Это следствие того, что янтарная кислота слабо поглащает в УФ-области (макс. я наблюдала при 210 нм).

Osokin
Пользователь
Ранг: 54

04.09.2014 // 16:34:04

Galina7520 пишет:
Но, к сожалению на данный момент меня смущает именно соотношение концентрация:сигнал.

А меня смущает, что говоря о хроматаграфическом анализе, Вы не указываете условия оного. Ну и время удерживания янтарной кислоты, упомяните тоже, пожалуйста.

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

04.09.2014 // 19:00:21

ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

04.09.2014 // 21:38:30

Galina7520 пишет:
ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424

1. А КН2РО4 дает рН 2,6? Че-то сомнительно. рН метр калиброван?
2. А цитрат где выходит (время)?
3. Длина колонки? зернение?
В прямом определении чувствительность будет поганая, ежу понятно. Так что, ничего удивительного. Надо только убедиться, что это оно (4,424). Калибровку делали?
С "другим типом" детектора определить будет еще сложнее. (Если это не кондуктометр, а прибор не Dionex). Модифицировать надо, но тогда ваш анализ резко усложняется.
Страшнее всего в таких условиях- примеси, которые будут мешать определению.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Газовые хромато-масс-спектрометры Thermo Fisher Scientific серии ITQ™
Серия масс-спектрометров ионная ловушка Thermo Scientific ITQ™ включает в себя ряд модифицируемых с целью увеличения аналитических возможностей в условиях аналитической лаборатории систем, сконструированных для достижения высочайшей специфичности и качества анализа.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

04.09.2014 // 22:48:36

Serga пишет:

Galina7520 пишет:
ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424
1. А КН2РО4 дает рН 2,6? Че-то сомнительно. рН метр калиброван?
2. А цитрат где выходит (время)?
3. Длина колонки? зернение?
В прямом определении чувствительность будет поганая, ежу понятно. Так что, ничего удивительного. Надо только убедиться, что это оно (4,424). Калибровку делали?
С "другим типом" детектора определить будет еще сложнее. (Если это не кондуктометр, а прибор не Dionex). Модифицировать надо, но тогда ваш анализ резко усложняется.
Страшнее всего в таких условиях- примеси, которые будут мешать определению.

Честно говоря, я думала, что само собой разумеется, что рН доводится фосфорной кислотой ( это ГОСТ на определение органических кислот в соках). Там ПФ только этот самый буфер, без органики. Но я побоялась работать на чистом буфере. Пять процентов ацетонитрила - это уже моя самодеятельность. Таблетки не колола. Закалывала пять раз стандарт. Слишком слабый сигнал для такой концентрации. Поэтому и обратилась к специалистам. Колонка можно сказать стандартная: 250х4,6; размер зерна 5мкм. Что в стандарте может быть кроме основного вещества - не знаю. Но вообщем-то, ВЫ подтвердили мои сомнения: кислота поглощает слабо, нужно получать ее производные, которые бы сильнее поглощали в УФ-области.

Огромное Вам спасибо!

Osokin
Пользователь
Ранг: 54

05.09.2014 // 16:34:37

Попробовал янатрную кислоту в своих условиях. На 210 нм, концентрая - указанная, объём вводимой пробы 50 мкл. Получил соотношение сигнал-шум чуть больше 20. Высота пика - где-то 40 mAU. И вместо фосфата - трифторуксусная к-та.
В общем, если у Вас соотношение сигнал-шум будет тоже на уровне 20, и даже если будет казаться высота пика маленькой, то количественное определние содержания в образце вполне возможно.

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

08.09.2014 // 9:26:37

Редактировано 1 раз(а)

Osokin пишет:
Попробовал янатрную кислоту в своих условиях. На 210 нм, концентрая - указанная, объём вводимой пробы 50 мкл. Получил соотношение сигнал-шум чуть больше 20. Высота пика - где-то 40 mAU. И вместо фосфата - трифторуксусная к-та.
В общем, если у Вас соотношение сигнал-шум будет тоже на уровне 20, и даже если будет казаться высота пика маленькой, то количественное определние содержания в образце вполне возможно.

Спасибо большое, за помощь. Если можно еще вопрос. Скажите, пожалуйста, а в каком количестве Вы брали трифторуксусную кислоту?

Osokin
Пользователь
Ранг: 54

08.09.2014 // 12:18:02

0.1% раствор в воде. Но она хорошо поглощает на этих длинах волн. Лучше взять какую-нибудь другую.

Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

10.09.2014 // 9:27:59

Osokin пишет:
0.1% раствор в воде. Но она хорошо поглощает на этих длинах волн. Лучше взять какую-нибудь другую.

Еще раз большое спасибо за помощь.


Ответов в этой теме: 10	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты