Форумы ANCHEM.RU: Нет окрашивания!!!Подскажите!!!

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 4. Химический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Нет окрашивания!!!Подскажите!!! >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Нет окрашивания!!!Подскажите!!!

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

29.05.2015 // 14:10:00

Добрый день. Работаю над активностью пероксидазы в растительных тканях. Столкнулась с тем, что в смородине и землянике не происходит окрашивания по гваяколу.
Описываю методику. Гомогенизирую ткань в фосфатном буфере рН 6,7. Оставляю для экстракции на 15 мин. Затем фильтрую. В кювету спектрофотометра наливаю вытяжку, раствор гваякола, буфер и добавляю перекись водорода и ничего не происходит сколько бы мы не ждали.....В чем дело? На картофеле все прекрасно окрашивается.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

kump
Пользователь
Ранг: 3190

29.05.2015 // 14:24:26

А об активности вы судите по скорости увеличения оптической плотности?

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

29.05.2015 // 15:07:32

kump пишет:
А об активности вы судите по скорости увеличения оптической плотности?

Да, именно так.

kump
Пользователь
Ранг: 3190

29.05.2015 // 16:33:59

А чистая перекись без вытяжки у вас окисляет гваякол?

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

29.05.2015 // 16:39:27

kump пишет:
А чистая перекись без вытяжки у вас окисляет гваякол?

Нет, пероксидаза же и является ферментом в реакции, а она только в вытяжке может быть.

kump
Пользователь
Ранг: 3190

29.05.2015 // 17:02:33

Версий две.

1)Пероксидаза может присутствовать в виде многих изоферментов, существенно различающихся по оптимуму рН (чтой-то от 2 до 14)

2) Отравление геминового активного центра какими-то компонентеми, содержащимися в гомогенате.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

АналитПро, ООО
Комплексное оснащение химико-аналитических и испытательных лабораторий. Консалтинг, информационное и научно-техническое сопровождение поставок лабораторного и аналитического оборудования. Комплектация лабораторий, подбор методик и оборудования.

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

29.05.2015 // 17:25:28

kump пишет:
Версий две.

1)Пероксидаза может присутствовать в виде многих изоферментов, существенно различающихся по оптимуму рН (чтой-то от 2 до 14)

2) Отравление геминового активного центра какими-то компонентеми, содержащимися в гомогенате.

Пробовала буфер с рН 3, тоже самое.

А чем можно помочь во втором случае?

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

29.05.2015 // 17:59:44

елена 2012 пишет:

kump пишет:
Версий две.

1)Пероксидаза может присутствовать в виде многих изоферментов, существенно различающихся по оптимуму рН (чтой-то от 2 до 14)

2) Отравление геминового активного центра какими-то компонентеми, содержащимися в гомогенате.
Пробовала буфер с рН 3, тоже самое.

А чем можно помочь во втором случае?

Может ли это быть салициловая кислота? И как от нее тогда избавиться?

kump
Пользователь
Ранг: 3190

29.05.2015 // 18:46:39

Попробуйте измерить в щелочной среде. Отравление может происходить за счёт хелатирования железа органическими кислотами, коих в смородине полно.
А так пока трудно сказать.

елена 2012
Пользователь
Ранг: 18

30.05.2015 // 8:59:00

kump пишет:
Попробуйте измерить в щелочной среде. Отравление может происходить за счёт хелатирования железа органическими кислотами, коих в смородине полно.
А так пока трудно сказать.

Спасибо за совет.Побежала делать!!!

kump
Пользователь
Ранг: 3190

01.06.2015 // 12:27:10

Ну и?


Ответов в этой теме: 15 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты