| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ-МС/МС >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ-МС/МС | ||
|
DDT Пользователь Ранг: 73 |
 01.06.2015 // 1:28:43
Редактировано 1 раз(а) Добрый вечер! У наших соседей появился ВЭЖХ-МС/МС. Мы вместе осваиваем этот прибор. Вопрос возник в рекомендациях, которые мы получили. Нам посоветовали для градуировки применять только так называемую "матричную градуировку",при которой в прибор вводят только матричные растворы ( проба + стандарт) и потом при подсчете концентраций отталкиваться только от нее. Аргументы нам приводят следующие: Матрица оказывает влияние на ионизацию и поэтому так будет надежней. Вопрос: нельзя ли применять обычный метод при построении градуировочной зависимости, используя только стандарты и потом вести количественный расчет или все-таки для работы на ВЭЖХ-МС/МС следует обязательно пользоваться матричной градуировкой. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
AN2000 Пользователь Ранг: 54 |
01.06.2015 // 14:42:52
Редактировано 1 раз(а) Вроде бы везде строят обычный градуировочный график ( аналит-отклик), а для изучения влияния матрицы привлекают Certified Reference Materials (CRMs) или standard reference material (SRM)... |
||
|
ATem Пользователь Ранг: 655 |
01.06.2015 // 17:29:54
Редактировано 1 раз(а) Кто как... Всегда строю калибровки в матрицах, поскольку матричные эффекты иногда могут сильно душить. Это все надо подбирать и оптимизировать. Так что палка о двух концах. Причем если метод количественный - всегда считаю, какой же у меня получается матричный эффект. Так что можете не сомневаться, Вас не обманывали коллеги, матричные эффекты - не сказка, а суровая реальность для людей, работающих с ВЭЖХ-МС/МС, поскольку может наблюдаться как гашение ионизации, так и её усиление. Поэтому калибровка, построенная на чистеньких веществах легко может дать некорректный результат на реальном образце... Более того, работать со сложными матрицами надо с внутренним стандартом. Если Вы загуглите "matrix effects in LC-MS/MS", увидите кучу статей, вплоть до таких ярких названий, как "Матричные эффекты - ахиллесова пята ВЭЖХ-МС/МС". |
||
|
trozen Пользователь Ранг: 216 |
01.06.2015 // 20:01:14
Редактировано 1 раз(а) а пробоподготовка у вас есть? образцы-калибраторы должны проходить все те же стадии, что и неизвестные образцы в принципе если внутренний стандарт - изотопно-меченый аналог определяемого соединения, то как бы можно обойтись чистыми растворами, но как практик скажу - так не делают матрица сильно влияет в режиме ESI, но опять-таки хороший внутренний стандарт это компенсирует |
||
|
DDT Пользователь Ранг: 73 |
01.06.2015 // 23:25:46
Редактировано 1 раз(а) Большое спасибо за ответы...Сильное влияние матричных эффектов- это бесспорное утверждение, но где можно найти документально в официальных документах, что калибровку в ВЭЖХ-МС/МС нужно строить используя только стандарт вместе с матрицей ( чистым образцом)? |
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
02.06.2015 // 12:39:40
Я стараюсь всегда делать матричную калибровку, вне зависимости от того какой у меня детектор на конце, т.к. эффект матрицы очень многогранен. Так же всегда стараюсь использовать ВС. В ВЭЖХ-МС использование правильного ВС явл. первичной необходимостью, а матричная калибровка - вторичной необходимостью, т.е. лучше подобрать правильный ВС и делать без матричной калибровки, чем наоборот. В норме, конечно, надо использовать и то и другое. Не рекомендую надеятся на матричную калибровку без ВС с использованием ESI-MS. В ряде редких случаев, может Вам и повезет и все будет ОК, но в большинстве случаев будут неприятные сюрпризы. По крайней мере, в тех ситуациях, когда я решался, в силу необходимости, делать методику без ВС, но с матричной калибровкой, результат меня всегда разочаровывал. Насчет официальных документов - посмотрите гайды FDA, ICH, Eurachem. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
02.06.2015 // 20:20:39
Либо добавлять внутренний стандарт (дейтерированный аналог- лучше, либо близкое по свойствам вещество, отсутствующее в определяемом объекте), либо калибровать растворами на матрице, это не просто желательно, а необходимо. Иначе ни о каком количественном анализе не будет и речи. Влияние матрицы колоссально, а если речь идет еще и о биологических объектах... 
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 6 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
