Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ: Эффективность разделения на разных фазах

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ: Эффективность разделения на разных фазах >>>

Ответов в этой теме: 9

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: ВЭЖХ: Эффективность разделения на разных фазах

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

22.07.2015 // 12:26:43

Редактировано 1 раз(а)

Практики и теоретики, имею к вам вопрос

Возникла задача с помощью препаративной ВЭЖХ разделить метиловые эфиры жирных кислот. В наличии есть два комплекта колонок: (аналитика/полупрепаратив) Zorbax C-18 150*4,5/20,2 мм, 5 мкм и намедни приедет пара SIL 250*4,6/20,2 мм, 5 мкм
В большинстве статей МЭЖК делят на С-18 250 мм (зерно 5 мкм), можно ли добиться такой же эффективности на 150 мм колонке? Или есть смысл работать с обычной SIL, используя в качестве ПФ неполярные растворители типа гексана?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

22.07.2015 // 16:29:20

Chamomillablue пишет:
намедни приедет пара SIL 250*4,6/20,2 мм, 5 мкм... растворители типа гексана?

SIL предпочтительней, но у нее есть особенности, сильно влияющие на работу.
Время удерживания сильно зависит от влажности силикагеля и процента полярного модификатора в гексане. Используя смеси гексан-изопропанол (~99/1) можно относительно беспроблемно делить. И это лучше, чем обращеная фаза.
Но надо иметь в виду, что равновесие (при изменении полярности и влажности элюента) в таких колонках наступает гораздо медленней, чем на ОФ колонке. Отрабатываете на узкой колонке.
Гомологи бензола и ПАУ делятся нормально. Будут ли нормально делиться МЭЖК- фиг знает, никогда не пробовал. Че там пишут в литературах на этот счет?

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

22.07.2015 // 18:37:13

Serga пишет:

Chamomillablue пишет:
намедни приедет пара SIL 250*4,6/20,2 мм, 5 мкм... растворители типа гексана?
SIL предпочтительней, но у нее есть особенности, сильно влияющие на работу.
Время удерживания сильно зависит от влажности силикагеля и процента полярного модификатора в гексане. Используя смеси гексан-изопропанол (~99/1) можно относительно беспроблемно делить. И это лучше, чем обращеная фаза.
Но надо иметь в виду, что равновесие (при изменении полярности и влажности элюента) в таких колонках наступает гораздо медленней, чем на ОФ колонке. Отрабатываете на узкой колонке.
Гомологи бензола и ПАУ делятся нормально. Будут ли нормально делиться МЭЖК- фиг знает, никогда не пробовал. Че там пишут в литературах на этот счет?

В литературах все на С-18 работают. но продолжаю поиски

А почему SIL предпочтительнее? Если он настолько капризен, что С.Н. Сычев в своей книге рекомендует держать на каждый анализ свою колонку...

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

22.07.2015 // 19:57:31

Редактировано 1 раз(а)

Chamomillablue пишет:
Если он настолько капризен,

Капризен- это не то слово. Непривитый ничем силикагель чрезвычайно капризен. Из-за постоянных изменений влажности силикагеля и гексана. Если "отсыревает" силикагель сравнительно быстро, то "высушивается" очень долго. И в течение всего этого "долго" будут плыть времена удерживания. Гораздо легче работать с привитыми силикагелями для нормально-фазовой ВЭЖХ (амино, циан, диол).
Но для отработанной препаративной наработки он удобнее. Работайте на смеси "гексан-i-PrOH". У нас даже рефрактометр терпит такие варианты. Правда, и силикагель- гидроксилированный (ДИОЛ). Вы же закупили галимый SIL (даже толком не промытый).
Для препаративной работы сгодится, впрочем. Он недорогой и в этом его плюс. Вдобавок, с него ничего не "течет". Еще плюс- гексан- штука недорогая и от него легче избавляться и легче регенерировать, чем MeCN. Колонки с SIL намного дешевле препаративной обращенки С18 и более живучи.
Но.

Я так понимаю, что у вас стоит одноразовая задача препаративной наработки фракций МЭЖК для ИК, ЯМР и чего сгодится еще. Думаю, это будет проще сделать на обращеной фазе.
Вот кабы вы граммами выделяли и постоянно- тут однозначно катило бы препаративная НФ.

cholesterol
Пользователь
Ранг: 109

22.07.2015 // 22:17:40

Chamomillablue пишет:
В большинстве статей МЭЖК делят на С-18 250 мм (зерно 5 мкм), можно ли добиться такой же эффективности на 150 мм колонке?

Если Вы добьетесь хорошей селективности на аналитической колонке, то да.

Chamomillablue пишет:
Или есть смысл работать с обычной SIL, используя в качестве ПФ неполярные растворители типа гексана?

Смысл есть, т.к. емкость не привитого силикагеля много выше (в 2-3 раза), чем привитого, т.е. за 1 раз можно почистить больше. До тех, пор пока образец не содержит сильнополярные или способные к диссоциации группы, препаративное разделение нужно пробовать сначала на NPC, а только затем на RPC.
Если Вы хотите делить изомеры, то как правило, они хорошо разделяются на голом силикагеле, если необходимо делить гомологи, то лучше использовать RPC
Недавно встретил такие данные – 84% аналитических разделений на зарубежный фармпредприятиях делают с помощью RPC, в то время как 85% препаративных разделений проводят с помощью NPC.

Шушечка
Пользователь
Ранг: 518

23.07.2015 // 6:21:04

Chamomillablue пишет:
Практики и теоретики, имею к вам вопрос
Возникла задача с помощью препаративной ВЭЖХ разделить метиловые эфиры жирных кислот. В наличии есть два комплекта колонок: (аналитика/полупрепаратив) Zorbax C-18 150*4,5/20,2 мм, 5 мкм и намедни приедет пара SIL 250*4,6/20,2 мм, 5 мкм
В большинстве статей МЭЖК делят на С-18 250 мм (зерно 5 мкм), можно ли добиться такой же эффективности на 150 мм колонке? Или есть смысл работать с обычной SIL, используя в качестве ПФ неполярные растворители типа гексана?

Тоже работаю с Зорбаксом, теперь прикупили и Феноменекс. Длина 250 мм или 150мм не критичная величина и даже не главная, просто время выхода сместится, это при условии что сорбент одинаков и условия хроматографирования одинаковы. Вам правильно заметили коллеги , что " хвостатые" колонки более избирательны. Привитые группы более селективно реагируют на исследуемые компоненты.
А у вас С 18 Зорбакс какая? их несколько...
ПЫСЫ: Феноменекс нравится больше , мне лично, потому что , даже обычная Луна С 18 и та идет уже эндкепированная, что гораздо облегчает работу.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Ассоциация аналитических центров «Аналитика»
Ассоциация объединяет специалистов в области прикладной аналитической химии и работает под эгидой Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (Ростехрегулирование) и Научного Совета по аналитической химии РАН (НСАХ РАН). В Ассоциацию входит более 130 членов - лабораторий отраслевых и академических институтов, ВУЗов, организаций Ростехрегулирования, предприятий различных форм собственности.

Шушечка
Пользователь
Ранг: 518

23.07.2015 // 6:22:37

простите, самое главное забыла спросить.. фаза какая?

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

23.07.2015 // 9:59:51

Шушечка пишет:
фаза какая?

В смысле- фаза? (Привитая, что ли? Он же написал- С18 или чистый силикагель).
Подвижная фаза?

Шушечка
Пользователь
Ранг: 518

23.07.2015 // 11:40:19

Serga пишет:

Шушечка пишет:
фаза какая?
В смысле- фаза? (Привитая, что ли? Он же написал- С18 или чистый силикагель).
Подвижная фаза?

подвижная естесссссно))))

КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306

21.08.2015 // 1:52:20

Редактировано 1 раз(а)

Вопрос бессмысленный... Где они лучше делятся - там и делите. Как Вам такая теорийка?

Раз ВЭЖХ вариант на силикагеле так капризен - так зачем его использовать? как насчет стеклянной колоночки со специально приготовленным (просушенным) силикагелем? или окисью алюминия?


Ответов в этой теме: 9	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты