| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
октадецилсилилсиликагель С18 >>>
|
 |
| Автор | Тема: октадецилсилилсиликагель С18 | ||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
 15.12.2015 // 15:03:29
Здравствуйте, возник вопрос об использовании колонок для ВЭЖХ, с разными типами сорбентов, есть колонка С18, с октадецилсиликагелем в качестве сорбента, в методике указана колонка с сорбетом октадецилсилилсиликагелем С18, вопрос в том, можно ли использовать колонку с октадецилсиликагелем С18? |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
15.12.2015 // 19:46:53
Это одно и то же. |
||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
15.12.2015 // 22:58:51
Тестируем методику, в ЕФ прописано что пик нифуроксазида должен выходить приблизительно около 8 минуты, но выходит на 5, мобильная фаза А тетрагидрофуран:вода (5:95), мобильная фаза Б - ацетонитрил, градиентный режим, колонка 0,25х4,6, 5мкм, С18, так как в методике, но время выхода основного пика так отличается, может кто-нибудь сталкивался с этой проблемой? |
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
15.12.2015 // 23:51:30
1. Когда указываете размеры колонки, то указывайте пожалуйста в одних единицах, а то у Вас капиллярная получилась. 2. В ЕФ обычно прописывается еще тест на пригодность (колонки, системы). Кажется это называется мудреным словом "валидация". Я этим никогда не занимался, но слышал. Так вот, если колонка (система) не проходит по этому тесту, то анализ на ней проводить по ЕФ не разрешается. Что скорее всего и происходит в Вашем случае. 3. Теперь о существе явления. Сорбент сорбенту "люпус эст". "Октадецил" к поверхности силикагеля может быть привит а) с разной концентрацией б) с эндкеппингом или без в) с различными ухищрениями для смачивания поверхности сорбента водой или нет г) кроме того, сам силикагель может быть с разной площадью поверхности и диаметром пор, поры могут быть открытые только с одной стороны (пещероподобные  ) или сквозныед), е), ... наверное еще есть параметры, о которых я забыл. Всё это в конечном итоге влияет на сорбцию каждого конкретного компонента пробы, что сказывается на время его удерживания и селективность системы. Очень полезно прочесть хотя бы пару умных книжек по ВЭЖХ. Начните со Стыскина, Ициксона и Брауде, их книга есть в Сети и читается легко. |
||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
16.12.2015 // 0:11:49
Редактировано 1 раз(а) Спасибо большое, за ответ, и за книгу! |
||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
16.12.2015 // 6:46:26
Время выхода пика , это вообще не принципиальный показатель. Относительное время удерживание куда важнее и еще куда важнее ппхс. Если хроматограмма отвечает ппхс, вперед...ничего страшного в изменении времени выхода пика нет. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
16.12.2015 // 20:34:11
В монографии указано, время удерживания около 8 мин., а относительное время удерживания примесей относительно выхода основного пика, у нас пик раньше выходит, проверка пригодности хроматографической системы получается, вся загвоздка во времени, получается что нужно колонку, как в методике покупать |
||
|
kvot Пользователь Ранг: 165 |
16.12.2015 // 20:41:46
При воспроизведении методики из EP: 1) старайтесь брать колонку (торговую марку), на которой данная методика разрабатывалась (причину, см. пост Волгина). Информацию по колонке (для EP) можно найти на сайте EDQM. Для вашей субстанции информация здесь: https://extranet.edqm.eu/4DLink1/4DCGI/Web_View/mono/1999 Как вы видите, можно также посмотреть хроматограмму, которую посчитал нужным привести разработчик. У вас и так методика проблемная: градиент (при этом объем задержки градиента не указан) и идентификация примесей по относительным временам удерживания (без использования стандартов). Вероятность, что вы правильно идентифицируете примеси даже при использовании рекомендованных колонок (Kromasil KR 100-5 C18 or Betasil C18 5µm) крайне сомнительна, а на своей и подавно. По хорошему надо иметь стандарты всех примесей, тогда у вас будет больше степеней свободы. 2) вы должны руководствоваться не только самой монографией на субстанцию, но и таким разделом, как 2.2.46. CHROMATOGRAPHIC SEPARATION TECHNIQUES, где прописано в каких рамках вы можете работать. Там кстати, указано, что время удерживания при градиентном элюировании должно укладываться +/- 15 % от указанного. А температуру колонки 10 град С вы соблюдаете? |
||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
16.12.2015 // 22:07:58
Да, температура 10 град С, согласно методике |
||
|
kvot Пользователь Ранг: 165 |
16.12.2015 // 22:30:27
Можно конечно подкорректировать условия хроматографирования, чтобы основное вещество элюировалось со временем удерживания 8 мин, но идентификация примесей С и D, так и останется под большим вопросом. Самый оптимальный случай - это покупка стандартов примесей, но это только на мой взгляд. |
||
|
art709 Пользователь Ранг: 27 |
17.12.2015 // 1:39:13
Спасибо за ответ! |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
