Форумы ANCHEM.RU: Градиентный режим ВЭЖХ

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Градиентный режим ВЭЖХ >>>

Ответов в этой теме: 6

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Градиентный режим ВЭЖХ

art709
Пользователь
Ранг: 27

01.02.2016 // 12:45:16

Добрый день! У меня возник вопрос касательно градиентного режима ВЭЖХ, например в начале анализа, есть определенное процентное соотношение растворителей, в процессе анализа, процентное соотношение меняется, и в конце оно уже совсем другое чем в начале, вопрос в том, сколько времени нужно потом уравновешивать колонку до начального процентного соотношения, и можно ли сразу выходить на начальное процентное соотношение растворителей, то есть с 36% к 65%, например, или нужно с течением времени увеличивать процентное соотношение до начального?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Волгин
VIP Member
Ранг: 1327

01.02.2016 // 14:19:24

1. Я обычно слежу за нулевой линией.Как она стала горизонтальной, так колонка и уравновесилась. В случае автосамплера можно заметить это время и задать прибору, на всякий случай добавив минуту-две.
2. Лучше возвращаться к первоначальному составу за 1-2 минуты. Колонка будет жить дольше.

art709
Пользователь
Ранг: 27

02.02.2016 // 14:35:35

То есть, после каждой инжекции, например анализ идёт 30 мин, нужно выходить на начальное процентное соотношение растворителей? Я так попробовал, но в результате, пик который должен был выходить на 7 минуте, вышел на 25!!, затем установил градиентный режим без уравновешивания после , и в каждой последующей хроматограмме пик выходит позже предыдущей, посоветуйте пожалуйста, как добится чтоб пики выходили на одном времени?

Hippi
Пользователь
Ранг: 37

02.02.2016 // 16:10:03

Редактировано 1 раз(а)

Вот пример реализации градиента из одной нашей методики:

Время (мин):........Фаза (А)................Фаза (В)
.................Начало Конец.........Начало Конец
0-2.................89.........89.............11........11
2-3.................89.........78.............11........22
3-8.................78.........78.............22........22
8-9.................78.........89.............22........11
9-15................89.........89.............11........11

Один пик выходит вначале хроматограммы, второй посредине, потом фаза возвращается к начальному соотношению 89:11 и насыщается 6 минут.

Ilia.sk
Пользователь
Ранг: 3

27.02.2016 // 4:57:09

art709 пишет:
с 36% к 65%

Считается, что равновесие достигается после прохождения через колонку количества элюента, равного 25 объемам колонки. На практике стоит ориентироваться на стабильность базовой линии после возвращения исходного соотношения. Обычно рабочая часть хроматограммы (выход всех интересующих компонентов) составляет 60-70% от всего времени, остальное - возврат к прежнему составу и установление равновесия. Т.е. если необходимое для анализа время 30 мин, то на возврат и равновесие потребуется еще 15-20 минут.

Timofey
Пользователь
Ранг: 13

29.02.2016 // 18:15:23

Работаю в градиенте, возврат к начальному составу минуты 2-3, потом уравновешивание минут 10-15, несмотря на то, что в документации 5-6 минут на это выставлено. Подобрал методом проб и ошибок оптимальное время для разных анализов - где-то и 8 минут хватает, а где-то и 10-15 необходимо. А иначе, да, времена выхода плавают только так.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Высокотемпературная лабораторная электропечь SNOL 12/1300
Электропечь SNOL 12/1300 предназначена для сушки и термообработки различных материалов в воздушной среде при температуре от 50 °С до 1300 °С. Рабочая камера электропечи выполнена из керамики. Нагревательные спирали находятся в пазах, то есть частично открыты.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Vika1809
Пользователь
Ранг: 14

15.03.2016 // 20:51:03

Добрый вечер.Я еще ориентируюсь на давление.Определить давление, когда фаза дошла и уже в градиенте смотреть когда давление достигнет этого значения.


Ответов в этой теме: 6	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты