Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
Электрофорез белков в полиакриламидном геле >>>
|
lyovinakate Пользователь Ранг: 4 |
29.03.2016 // 14:10:15
Сначала фиксируем в фиксирующем растворе(40% метанола, 10% уксусной кислоты), затем ополаскиваем гель дистиллированной водой, наливаем в ванну с гелем раствор красителя (27 % этанола, 10 % уксусной кислоты, 0,1 % Кумасси бриллиантового синего, 0,5 % сульфата меди СuSO4), помещают на качалку на минут 40-60. Ну а затем отмываем отмывкой (20 % метанола, 10 % уксусной кислоты) и дистиллированной водой. |
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
29.03.2016 // 16:10:38
Метанол-этанол-метанол? может тут проблема? Попробуйте все на изопропиловом спирте. Отлично красит. |
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
29.03.2016 // 19:25:51
А зачем такие "ТАКИЕ ТАНЦЫ С БУБНОМ" ? Используйте обычный проявитель без предварительной фиксации. Для приготовления одного литра проявителя необходимо 100 мл 60% ТХУ (трихлоруксусной кислоты), 60 мл ледяной уксусной кислоты,168 мл (изопропанола, или этанола 96 % ,или ацетона) , 0,2 г Кумасси R-250, или G-250 и до метки водой. Раствор можно использовать многократно (до выпадения хлопьев). В кювету для проявления наливаете подогретый до (50-60 С) проявитель, в него помещаете пластинку и на качалку минут на 60. Только смотрите, чтобы пластинка была погружена полностью и не всплывала "пузом". Далее проявитель сливаете, ополаскиваете дист.водой на той же качалке до просветления геля. Можете в качестве промывочного раствора применять и Вашу промывку, только метанол заменить на тот же изо-пропанол.... а можно и просто в растворе уксусной..... а можно и без нее... только отмывка получится несколько дольше. |
optima Пользователь Ранг: 322 |
29.03.2016 // 21:41:26
Редактировано 3 раз(а) 40% метанола многовато как-то. Пластинка сильно в размерах уменьшается после такой фиксации? Для изопропанола рецепт такой: 10 % изопропанола, 10% ледяной уксусной, остальное вода. В этой смеси 0,1-0,2% Кумасси. Сразу в этом растворе и фиксируете и красите. Минут 10-15 в горячем растворе, но не кипятить. Под вытяжкой! Затем в горячей воде отмываете. Но все-таки - если у вас пятно одинаковое на всех форезах независимо от пробы - проблема может быть в электродах и камере. Если пятно мигрирует и меняется - либо проблемы с окраской, либо в пробах мочевина, соли, твин, растворители и т.д. |
toxic1978 Пользователь Ранг: 249 |
25.04.2016 // 10:43:20
смените стекла, проверьте целостность гребенок, катоды и аноды. |
|
||
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |