Форумы ANCHEM.RU: Чем лучше отмыть С-18 колонку?

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Чем лучше отмыть С-18 колонку? >>>

Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Чем лучше отмыть С-18 колонку?

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

18.04.2018 // 21:50:58

Добрый вечер!

На аналитической колонке С-18 делим по ECN метиловые эфиры ЖК (изократика, ацетонитрил), собираем нужную фракцию.
После 5-10 заколов давление подрастает и чем больше колем, тем оно выше. Подозреваю, что из-за ЖК с ECN 18 и выше, примесей каротиноидов..
Чем лучше всего это смыть? Можно ли гексаном?

И второй момент, сколько мг можно вкалывать в колонку 250*4,6 мм, 5 мкм? какова оптимальная нагрузка?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

darkkiss
Пользователь
Ранг: 192

19.04.2018 // 0:38:56

Chamomillablue пишет:
Можно ли гексаном?

Есть стандартные рекомендации для С18 колонок:
вода-изопропанол-хлористый метилен-гексан-хлористый метилен-изопропанол-вода-рабочая фаза.

В условиях сильного недостатка времени, последовательность изопропанол-хлористый метилен, я заменяю тетрагидрофураном.

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

19.04.2018 // 1:34:18

darkkiss пишет:
Есть стандартные рекомендации для С18 колонок:
вода-изопропанол-хлористый метилен-гексан-хлористый метилен-изопропанол-вода-рабочая фаза.

В условиях сильного недостатка времени, последовательность изопропанол-хлористый метилен, я заменяю тетрагидрофураном.

Спасибо!

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

19.04.2018 // 8:24:55

Если вышеуказанное не срабатывает противотоком, я беру еще ДМСО, потом воду, потом 3% перекись, но это жестче.

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

19.04.2018 // 10:15:05

SergeyK пишет:
Если вышеуказанное не срабатывает противотоком, я беру еще ДМСО, потом воду, потом 3% перекись, но это жестче.

А сколько мг можно вкалывать в колонку 250*4,6 мм, 5 мкм? какова оптимальная нагрузка? 1 мг -- это много или приемлемо?

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

19.04.2018 // 11:26:43

Редактировано 1 раз(а)

Chamomillablue пишет:

SergeyK пишет:
Если вышеуказанное не срабатывает противотоком, я беру еще ДМСО, потом воду, потом 3% перекись, но это жестче.
А сколько мг можно вкалывать в колонку 250*4,6 мм, 5 мкм? какова оптимальная нагрузка? 1 мг -- это много или приемлемо?

Чтобы что? Чтобы пики были симметричные для количественной аналитики? Или чтобы препаративно разделить? Препаративно я и 20% м.д. вещества от массы сорбента делил, вопрос в том, что от чего делить. Детекторовать есть чем? Хоть коллектором фракций собирайте и профиль элюирования стройте потом, хоть фотометром, хоть кондуктометром, если проточной ячейки нет.
www.flash-purification.com/how-do-i-determine-loading-capacity-in-reverse-phase-flash-column-chromatography/
https://www.chromacademy.com/chromatography-HPLC-Column-Overload.html

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

	Чашки Петри Чашки широко используются в микробиологии для культивирования колоний микроорганизмов
	[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

19.04.2018 // 12:09:22

SergeyK пишет:
Чтобы что? Чтобы пики были симметричные для количественной аналитики? Или чтобы препаративно разделить? Препаративно я и 20% м.д. вещества от массы сорбента делил, вопрос в том, что от чего делить. Детекторовать есть чем? Хоть коллектором фракций собирайте и профиль элюирования стройте потом, хоть фотометром, хоть кондуктометром, если проточной ячейки нет.
www.flash-purification.com/how-do-i-determine-loading-capacity-in-reverse-phase-flash-column-chromatography/
https://www.chromacademy.com/chromatography-HPLC-Column-Overload.html

Спасибо за ссылку )
Мне нужно препаративно собрать фракцию МЭЖК с ECN 12 (14:1, 16:2-ЖК) из смеси ЖК с ECN 8-20
Коллектор фракций есть, детектируем в 215 нм

Chamomillablue
Пользователь
Ранг: 1302

19.04.2018 // 12:49:36

в нашем случае, как оказалось, хватило промыть колонку смесью ацетонитрил:2-пропанол 50:50 и давление вернулось к начальному


Ответов в этой теме: 7	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты