| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. >>>
|
 |
| Автор | Тема: Проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. | ||
|
Роберто Пользователь Ранг: 46 |
 09.09.2020 // 17:25:19
Редактировано 2 раз(а) Здравствуйте возникла проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. Нет разделения пиков по времени, выходят одна за другой практически через 0,5 минуты одна за другой. Колонка: Luna С18(2) 150х4,6 мм 5 мкм(Phenomenex) ПФ: 20%ACN;80% бидис. вода подкисленная фосфорной кислотой до pH=2,5 температура термостата: 30*С скорость потока: 1,0 мл/мин; объем петли: 20 мкл; детектирование: спектрофотометрическое; длина волны 230 нм для бензойной кислоты, 254 нм для сорбиновой кислоты Также есть колонка Eurospher 100-5 C18 250x4,6 при тех же условиях так же нет разделения кислот. Год назад работали на колонке Microsorb MV100-5 C18 150x4,6 разделение было хорошее время между выходом сорбиновой и бензойной кислот было 5-7 минут. Тут прописаны условия хром. сравнения двух колонок:Phenomenex Luna 5 µm C18(2) и Hypersil-Keystone® HyPURITY™ Elite 5 µm C18. Там есть но как по мне очень слабое разделение, у меня на полученных хроматограмме произошло наложение пиков https:// |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
 09.09.2020 // 20:21:52
Редактировано 1 раз(а) Времена удерживания какие? Какое разрешение пиков? Число тарелок? Асимметрия пиков? Разница 0,5 мин мало о чем говорит. Rs ≥ 1,5 не получается? Если причина плохого разделения просто в слабом удерживании веществ, можно снизить долю ACN в ПФ. На более длинной колонке Luna C18(2) с похожей ПФ делятся с разрешением около 1,5: |
||
|
Роберто Пользователь Ранг: 46 |
10.09.2020 // 5:04:01
Редактировано 1 раз(а) Забыл указать времена выходя кислот.Для Сорбиновой 13,84 мин, бензойная кислота 14,50 минут. Пики симметричные. Попробую снизить кон-цию ACN |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
10.09.2020 // 7:02:55
Редактировано 1 раз(а) Времена говорят, что удерживание достаточно высокое (факторы удерживания в районе 9), поэтому снижение доли ACN, еще увеличив времена, уже вряд ли существенно улучшит разрешение, но попробовать можно. Значит селективности данной системы фаз маловато для разделения. Можно еще поиграть с ПФ, например взяв метанол вместо ACN (только долю побольше). Либо пробуйте другую колонку. Либо можно идти в сторону увеличения эффективности (большая длина колонки или меньший диаметр частиц). Как вариант, еще можно попробовать снизить температуру до 20 градусов. В принципе можно еще попробовать увеличить долю ACN: факторы удерживания уменьшатся, но может подрасти селективность. |
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
10.09.2020 // 8:59:05
А что за образец? попробуйте увеличить pH. У бензойной кислоты pKa=4.2, у сорбиновой 4,8. В промежуточном pH одна будет заряжена и удерживаться хуже, вторая - нет и удерживаться лучше. Например, делают при pH 4.4 https:// тоже делают при pH 4.4 |
||
|
Роберто Пользователь Ранг: 46 |
10.09.2020 // 16:30:50
Редактировано 1 раз(а) Спасибо за ответы. Снизил концентрацию ацетонитрила до 17 % Сорбиновая 15,42 мин , бензойная 16,22 мин кислоты. Думаю pH до 4,4 довести проверить как будет делится. Метанола нет, заказываю все ни как купить не могут. Спасибо еще раз за ответы. Voodensky, напитки безалкогольные. К сожалению по первой ссылке файла нет |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
10.09.2020 // 18:42:08
В ссылке часть названия, найти легко. Только помните о том, что pKa указаны для водных растворов, а не для водноорганических. |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
10.09.2020 // 20:03:19
Разрешение-то пиков какое? |
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1330 |
10.09.2020 // 22:38:39
Редактировано 1 раз(а) 235 нм, 50С, ACN/ацетатный буфер(рН 3,5-4,0) 20 : 80, 10 мкл, 1,0 мл/мин |
||
|
Роберто Пользователь Ранг: 46 |
11.09.2020 // 18:08:40
Здравствуйте, сори. Rs=1.78 .Слабоватое, может стоит температуру снизить до 25*С хотя пока это сложно, жарко в помещении или снизить концентрацию ACN до 15% хотя думаю время выхода сместится в право сильно . В аттестованной методике от Аквилона при 20*С работают. |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
11.09.2020 // 19:20:04
Редактировано 1 раз(а) Слабоватое? Пики полностью разделены. Чего еще надо? Разрешение есть смысл пытаться увеличить только в том случае, если вы собираетесь определять оба компонента при их сильно разном содержании, а точнее когда их пики сильно отличаются по величине (раз в 100 и больше). В этом случае разрешения около 1.5 уже будет недостаточно, и маленький пик будет частично или полностью "съедаться" большим пиком. Но анализ напитков - не такой случай. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
