| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ нуктеотидов >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ нуктеотидов |
|
Quasi Пользователь Ранг: 16 |
 25.05.2006 // 9:24:26
Уважаемые аналитики! Подскажите, пожалуйста, систему для разделения стандартов нуклеотидов (аденозинмонофосфат, гуанозинмонофосфат, цитидинмонофосфат, уридинмонофосфат, тимидинмонофосфат)режиме обращенно-фазовой хроматографии на С18 со спектрофотометрическим детектированием. Спасибо. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
25.05.2006 // 9:55:36
Редактировано 1 раз(а) Попробуйте два варианта : 1. Изократика. а). Колонка : ODS C18 Подвижная фаза : A-метанол = 1 : 1 ; A : 0.005M диоктилсульфокуссинат натрия pH 2.5 10% муравьиной кислотой б). Колонка : Nucleosil 100 C18 Подвижная фаза : (1.61г тетрабутиламмония гидросульфат в 25мл)-1M NaH2PO4- Метанол-Вода=10-20-10-60 2. Градиенты. а). Колонка : Nucleosil 5 C18 Подвижная фаза : 0.2 M аммоний формиат pH 3.5; 0-5мин буфер, 5-11мин буфер/Метанол (96 - 4), 11-18 мин до буфер/метанол (70 - 30) Комментарии : Литература : J.Clin.Chem. Clin. Biochem. 22(1984) 175-184 б). Колонка : Ultrasphere ODS Подвижная фаза : A: 0,025 M KH2PO4 с 2 г/л тетрабутиламмония гидрофосфат; В: 0,125 M KH2PO4 с 2 г/л тетрабутиламмония гидрофосфат -Ацетонитрил = 1-3 %. Градиент линейный. А детекция при 249- 260 нм |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.05.2006 // 12:06:41
Одним словом, два варианта: с ион-парным и без ион-парного. С ион-парным, думаю, пройдет на любой мало-мальско дышащей обращенке. 5мМ тетрабутиламмония (ТБА) сульфата или еще чего (только не бромида), и 30-50% ацетонитрила. Да, и буфер обычно закисляют (фосфоркой к примеру) до рН 3, но это спорно (можно попробовать и не кислить, но при этом удерживание будет прилично возрастать). Если решили поиграть рН буфера, то надо немножко 25мМ кислого фосфата добавить, чтоб была буферная сила. Можно и без ион-парного, просто на 4% метанола или ацетонитрила и фосфатном буфере, закисленнным побольше (до рН 2.5, к примеру). Но тут далеко не любая колонка подойдет, может быть и фазовый коллапс, и плохое удерживание-разделение. Так, для Wakosil-а у меня есть такие хроматограммы для фосфатов тиамина, 16-и изменных нуклеиновых оснований (правда, они без фосф. остатков). Все делится хорошо и устойчиво. Есть и модификация последней системы. Можно в буфер сразу добавить 1% триэтиламина, а потом уже кислить фосфоркой до 2.5. Подавать к столу с 2-10% ацетонитрила. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 2 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
