| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Как управлять временем удерживания? Уравнение Скота. >>>
|
 |
| Автор | Тема: Как управлять временем удерживания? Уравнение Скота. |
|
zdoronkov96 Пользователь Ранг: 4 |
 20.07.2022 // 19:44:26
Уравнение Скота гласит, что 1/Vr = A + B * Cдоб., где Сдоб - доля добавки в элюенте; A и B - коэффициенты, Vr - удерживаемый объем. Приходилось добавлять ACN (ОФ ВЭЖХ), чтобы уменьшить время удерживания, однако в каком количестве? Всегда подбирал наугад, начиная с малых объемов. Вопрос состоит в том, как сделать это грамотно? Есть уравнение Скота, но где взять коэффициенты? Правильно ли я понимаю, что их нужно выводить эмпирически, строя калибровочную кривую для конкретной колонки и веществ? |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
20.07.2022 // 21:23:35
Редактировано 3 раз(а) Да, конкретные коэффициенты подобных зависимостей определяют экспериментально. В ОФ ВЭЖХ для не слишком широкого диапазона концентраций орг. растворителя в ПФ (процентов 20-50 диапазон) обычно неплохо работает уравнение вида lgQ (или lnQ) = A - B*φ, где φ - объемная доля растворителя в ПФ, а Q - параметр удерживания (фактор удерживания k', исправленное время удерживания tR' или исправленный объем удерживания VR'). Соответственно, тут достаточно двух экспериментальных точек, ограничивающих интересующую вас область составов ПФ, чтобы найти коэффициенты. Для более широкого диапазона концентраций в правую часть формулы можно добавить квадратичный по φ член. Для низкомолекулярных орг. веществ эти зависимости более-менее пологие. Для белков - крутые (всего несколько процентов органики в некотором диапазоне меняют удерживние от очень сильного до очень слабого). Для расчета указанных параметров удерживания нужно знать мертвое время (мертвый объем). Его определение не совсем тривиальная задача, но как вариант на колонках без доп. полярных групп можно ориентироваться на время удерживания урацила или тиомочевины при ненулевой и не 100 %-й доле органики в ПФ (50-70 %). Совсем грубо можно оценить мертвый объем, умножив объем пустой колонки на величину от 0,5 до 0,7 [это типичная доля мертвого объема от объема пустой колонки; можно на этот диапазон ориентироваться, чтоб оценить адекватность экспериментального значения мертвого объема, а то некоторые берут тупо объем удерживания первого попавшегося пика на хроматограмме, а он или больше объема колонки (т.е., очевидно, имеет место сорбция), или в диапазоне от 0,35 до ок. 0,5 (т.е. имеет место полная или частичная эксклюзия из пор сорбента); про внеколоночный объем помнить тоже надо, т.к. он не всегда пренебрежимо мал]. |
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1330 |
22.07.2022 // 0:42:31
Грамотно, для этого в ОФ ВЭЖХ нужно прогнать аналит в 100% АСN, в 100% воде и в линейном градиенте ACN 0-->100%, учесть мертвое время колонки и объем смесителя. Уравнение Скота выражает общую закономерность и мало применимо в практической работе. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 2 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
