Форумы ANCHEM.RU: Дигидрокверцитин

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Дигидрокверцитин >>>

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Дигидрокверцитин

Evgenya
Пользователь
Ранг: 12

11.09.2006 // 11:22:44

Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Vasya
Пользователь
Ранг: 129

11.09.2006 // 11:42:40

Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

11.09.2006 // 11:45:11

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?

Вообще то это не самая сложная задача для ВЭЖХ.
Но маловато информации для того, чтобы посоветовать что-то конкретное.
На каком элюенте работаете? По каким признакам (спектр, спектральные отношения и т.д.) Вы определили, что несколько первых вколов из колонки выходило именно Ваше целевое соединение, а не мылась какая то грязь? С какими образцами (в смысле - стандарты или природные объекты) работаете, на каких длинах волн?
Далее, что касается Ваших вопросов.
Указанная Вами колонка - 5-микронный октадецилсиликагель (не "октадодецил"), то есть С18, причем с повышенной плотностью прививки. Вполне приличный сорбент.
С8 обычно на колонке так и указывают или гораздо реже - OS (октилсиликагель).

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

12.09.2006 // 0:22:51

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?[/quote
Здравствуйте! Издеваться над "сердцем"(в смысле колонкой) не надо Дигидрокверцетин не устойчив к окислению(например кислород воздуха), не зря относится к антиоксидантам(инактивация активных форм кислорода(синглетное состояние),активных свободных радикалов и др.) Относится к флавонолам, которые обладаю нестойким дигидро-гамма-пирановым кольцом, короче достаточно лабильны (особенно в присутствии кислот и щелочей), кольцо "раскрывается" и образуются халконы(у которых и хроматографические характиристике другие, и максимумы поглощения в уф-области спектра тоже). Вот варианты(конечно же не абсолютные ). Дальше выводите сами. А что дигидрокверцетин, решил отдохнуть у Вас в колонке и попить там гексанчика, рассказывая всем, как он соскучился по L-аскорбиновой кислоте, это вряд ли . Удачи!
С уважением,
Алексей

Evgenya
Пользователь
Ранг: 12

12.09.2006 // 12:15:46

Vasya пишет:
Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.

Использовали элюент ацетонитрил+вода+укс.кислота.
Согласно S-критерию обращ.фазы изопропанол гексан обладают большей элюирующей силой.Чем тогда промывать колонку? Могло ли быть засорение колонки этим веществом, перегрузка? Потому что при длине волны 290 нм пики выходили при 4-х вколах пробы, затем все прекратилось. С самописцем все в норме.

Evgenya
Пользователь
Ранг: 12

12.09.2006 // 12:16:44

Vasya пишет:
Дигидрокверцетин ведет себя на обращенофазной колонке (С18) послушно, если в качестве элюента использовать подкисленные водные растворы метанола или ацетонитрила.
А что, позвольте узнать, заглохло? Кстати, вряд ли вещество могло засориться колонкой. И уж если Вы хотели смыть с колонки ДГК, то уж совсем зря гексаном - не растворяется.
Короче (избитое для форума предложение), изложите подробно и внятно свои действия и последствия их.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Масс-спектрометр с индуктивно связанной плазмой - ИСП-МС XSeries 2
Thermo Scientific XSERIES 2 ICP-MS – квадрупольный масс-спектрометр с индуктивно связанной плазмой, созданный как для рутинного анализа, так и для исследовательской работы

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Evgenya
Пользователь
Ранг: 12

12.09.2006 // 13:27:22

virtu пишет:

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?[/quote
Здравствуйте! Издеваться над "сердцем"(в смысле колонкой) не надо Дигидрокверцетин не устойчив к окислению(например кислород воздуха), не зря относится к антиоксидантам(инактивация активных форм кислорода(синглетное состояние),активных свободных радикалов и др.) Относится к флавонолам, которые обладаю нестойким дигидро-гамма-пирановым кольцом, короче достаточно лабильны (особенно в присутствии кислот и щелочей), кольцо "раскрывается" и образуются халконы(у которых и хроматографические характиристике другие, и максимумы поглощения в уф-области спектра тоже). Вот варианты(конечно же не абсолютные ). Дальше выводите сами. А что дигидрокверцетин, решил отдохнуть у Вас в колонке и попить там гексанчика, рассказывая всем, как он соскучился по L-аскорбиновой кислоте, это вряд ли . Удачи!
С уважением,
Алексей
причем тут аскорбиновая кислота?это шутка?

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

12.09.2006 // 13:41:06

Ну не совсем и шутка. Аскорбиновая кислота - сильный восстановитель и в некоторой степени может защищать Ваш аналит от окисления.
Обычно, когда сорбат склонен садиться в колонке, все было бы наоборот. Первые вколы ничего не выходит, а потом, когда сорбент насытится, вещество начинает выходить.
У вас же, как я понял, все с точностью до наоборот.
Может что с дозатором и вещество просто не попадает в колонку. Или у Вас такая среда, что аналит уже давно окислился и осмолился?
Опишите подробно свои действия. Что за объект, что за прибор и каков алгоритм пробоподготовки и анализа.

Farma
Пользователь
Ранг: 382

12.09.2006 // 15:16:48

Evgenya пишет:
Уважаемые коллеги,как себя ведет дигидрокверцитин (биофлавоноид) в обращеннофазной колонке?
Дело в том, что несколько раз проба успешно элюировалась,пики регистрировались, потом заглохло и прекратилось это дело.Могло ли быть засорение этого вещества колонкой? Хотя концентрация 1 мг/мл. Промывали изопропанолом с гексаном, бесполезно.Не подскажете в чем дело?
Использовали колонку Whatman Partisil 5 ODS-3.
Это означает С8 или С18?.ODS-Это октадодецил силан?

Evgenya, а какой перерыв был между вколами? Если несколько суток, то теоретически ваш флавоноид мог и распасться. И Вы уверены, что те пики, которые выходили, действительно принадлежат целевому веществу? Может, оно и не сходило вовсе?

Vasya
Пользователь
Ранг: 129

12.09.2006 // 16:25:13

Evgenya пишет:
Использовали элюент ацетонитрил+вода+укс.кислота.

Градиент ацетонитрила или изократика? Сколько укс. к-ты? Вы уверены, что пик соответствовал ДГК?

Evgenya пишет:
Согласно S-критерию обращ.фазы изопропанол гексан обладают большей элюирующей силой.

А что такое S-критерий?

Хотя... если сорбат (ДГК) не растворяется в элюенте (гексане), то зачем тогда нужен этот S-критерий?

Колонку лучше мыть метанолом (5-10% воды) и колоночку подогреть до 40град. Можно и этиловым спиртом, а изопрпанолом, может, и лучше будет, но тут надо быть очень осторожным - основная проблема в вязкости.

Evgenya пишет:
Могло ли быть засорение колонки этим веществом, перегрузка?

Вещество могло конечно выпасть в осадок на входном фрите и зависит это от многих факторов. А чем Вы вводите в-во? В чем оно растворено?
О перегрузке же можете сказать Вы сами - по количеству введенного Вами же стандарта и по форме пика. И как оно было?

Менял ли пик форму от ввода к вводу, площадь?

olmail
Пользователь
Ранг: 112

12.09.2006 // 17:49:06

С дигидрокверцетином проблем быть не должно, у нас он легко смывается с колонки Atlantis С18 4.6*250 mm 5mkm с 20% (0 минут) до 40% (15 минут) ацетонитрила за 9,2 минуты (скорость потока 0,9 мл/мин). второй компонент - вода с трифторуксусной кислотой до рН=3,0. Стандарт в растворе устойчив (по крайней мере при температуре 4-8С). Так что ищите проблему в системе. Приготовьте новый стандарт (концентрация в 1 мг/мл более, чем достаточная, хватит и 0,1). Попробуйте другие вещества (лучше которые раньше делали), например, кофеин, все в порядке ли с ним.


Ответов в этой теме: 14 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты