| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ. Влияние реагентов на разделение. >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ. Влияние реагентов на разделение. | |||||
|
DDT Пользователь Ранг: 73 |
 10.03.2024 // 21:32:13
Редактировано 1 раз(а) Добрый вечер, уважаемые хроматографисты. Прошу совета. Мы определяем нуклеотиды с использованием в качестве подвижной фазы 0,1М фосфатный буферный раствор c pH=6,9 и используя хроматографическую колонку с фазой С18. Для однозначной идентификации нам предлагают прогнать через хроматографическую систему раствор АТФ, который также содержит: натрий карбонат безводный, натрий гидрокарбонат, этилендиаминтетрауксусную кислоту, пропиленгликоль. Могут ли повлиять эти компоненты на хроматографическую колонку и дальнейшее разделение? Из литературы известно, что если добавлять какой-нибудь реагент, например ион-парный - триметиламин, то меняется механизм разделения и в дальнейшем хроматографическую колонку С18 уже сложно будет »реанимировать». |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
11.03.2024 // 7:19:48
Редактировано 2 раз(а) 1. Триметиламин можно назвать ион-парным реагентом с натяжкой (слишком короткие у него углеводородные хвосты). 2. Его (вот тут не понял: триметиламин у вас в пробе или все-таки в ПФ?) и остальных (довольно безобидных) компонентов пробы вы вводите в колонку совсем мало. Это не то же самое, что подавать его в колонку в составе ПФ. 3. "Убивание" колонки ион-парным реагентом - в некоторой степени предрассудок, хотя все же желательно для конкретной ион-парной хроматографии использовать выделенную только для этого колонку. 4. Если вы делите нуклеотиды на колонке C18, в вашем "0,1М фосфатный буферный раствор c pH=6,9", сюрприз, должен быть ион-парный реагент, например триэтиламин или трибутиламин. |
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1330 |
11.03.2024 // 19:49:53
Редактировано 2 раз(а) не совсем понятно, что Вы имеется ввиду... "...натрий карбонат безводный...", а это вообще о чем в растворе-то? Если речь идет о том, чтобы вколоть препарат "Натрия аденозинтрифосфат раствор для в/в введения", то можете смело разбавить и вколоть... |
|||||
|
DDT Пользователь Ранг: 73 |
12.03.2024 // 0:37:49
Редактировано 1 раз(а) Благодарю за советы. Мы не используем ион-парный реагент и у нас он не содержится не в пробе не в ПФ. Все нуклеотиды хорошо разделяются при использование в качестве подвижной фазы фосфатный буфер и 1-5% ацетонитрила. Мы немного засомневались в стандарте АТФ, так как он просрочен и решили приобрести раствор АТФ в аптеке https://planetazdorovo.ru/perm/catalog/lekarstva-i-bad/serdtse-i-sosudy/pitanie-miokarda/natriya-adenozintrifosfat-vial-rastvor-20/ Методом добавок еще раз хотим убедится, что все делаем правильно. |
|||||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
12.03.2024 // 12:01:45
А какая у вас колонка, если не секрет? Просто C18? Нет приставки AQ или чего-то связанного с водой? |
|||||
|
DDT Пользователь Ранг: 73 |
18.03.2024 // 0:34:48
Редактировано 1 раз(а) У нас колонка Discovery® C18 HPLC Column 25 cm × 4.6 mm × 5 мкм (https:// С 100 % водный буфер пропускаем и пока все нормально. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
18.03.2024 // 7:20:12
Периодически (раз в неделю или после каждой серии проб) промывайте колонку более сильным элюентом, доводя долю ацетонитрила до 100 %, чтобы смыть накапливающиеся в колонке при работе со слабым элюентом гидрофобные загрязнения. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 6 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
