| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
как разделить сахара? >>>
|
 |
| Автор | Тема: как разделить сахара? | ||
|
Alt Пользователь Ранг: 2 |
 07.02.2007 // 10:36:32
Подскажите, пожалуйста, как разделить сахара? Условия: жидкостн. хроматогр. Shimadzu LC-10ATvp, колонка диасорб 130 амин 150/4 мм, детектор УФ. Спектры снимали в изократическом режиме, длина волны 192 нм. Меняли температуру от 30 до 70 С и эл-ты: ацетонитрил разной конц. (от 2 до 75 %), спиртовый р-р, вода, боратный буфер; - сахара выходят в одно время 
|
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Алексей (СамГУ) Пользователь Ранг: 367 |
07.02.2007 // 12:57:49
Во-первых, какие сахара...укажите конкретно, что хотите разделить. Возможно умерла колонка с NH2, кстати данный сорбент требует к себе очень аккуратного обращения и особой живучестью не отличается. Предлагаю её проверить следующим образом: вещества глицерин и сорбитол(или сахароза), ПФ 78-80% ацетонитрила (остальное вода), скрость ПФ 1,5 мл/мин., температура 25 град. Это условия на колонку с диаметром 4,6 мм и длинной 220 мм (зерн сорбента 5 мкм), условия нужно будет скорректировать под габариты вашей колонки. Глицерин приблизительно выходит на 3 мин., сорбитол на 7 мин., сахароза на 10 мин. Поскольку у вас УФ-детектор сделайте концентрацию аналитов 3-4 мг/мл в растворе аналогичном составу ПФ. |
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
07.02.2007 // 13:04:42
На форуме об этом уже кучу раз писали, посмотрите пожалуйста. Вы уверены, что это "сахара"?(кстати, какие углеводы?) Вы хотите сказать, что состав элюента не влияет на время выхода сорбата(коэффициент емкости определяли?) |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
07.02.2007 // 13:14:58
Углеводы на аминофазе разделяются при нормальном градиенте. Начало- MeCN/H20 (95/5), конец- вплоть до чистой воды (0/100). Порядок выхода- по увеличению ММ. Разумеется, не забываем про уравновешивание. Детект- УФ 195 нм (потребуется приличный MeCN), чувствительность плохая. Добавки в элюент не нужны. Колонка не любит водную фазу, прививка слетает быстро. Срок службы колонны- около полугода при интенсивной работе (а может- и меньше). Хранить в 100% ацетонитриле. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
07.02.2007 // 15:03:07
Работать по такой методике нельзя. Колонка в чистой воде садится не из-за того, что слетает прививка... Действительно, сахара делятся в изократе ацетонитрил-вода 85-15. Спирт вместо ацетонитрила здесь неуместен. Если "сахара" не делятся, значит либо колонка села от первоначальных экспериментов, либо Вы видите не сахара, а глюк, этакий системный пик, благо на 192 нм, как говорится в пословице, даже воздух поглощает. Далее, на УФ Вы увидите только тогда сахара, когда их много, порядка 1%. Это соки, например, вино и т.д. И длину волны все-таки сделайте хоят бы 200. |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
08.02.2007 // 9:35:34
Интересно, а из-за чего тогда садится колонка и что вообще понимают под "просадкой" аминофазы? Waters прямо пишет, что аминофаза на силикагеле неустойчива не то что в чистой воде, а даже если ее содержание в элюенте превышает 15%. Кому верить? |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
08.02.2007 // 14:29:05
Если не вникать в тонкости механизма взаимодействия авинофазы с водой (образование там всяких водородных связей и т.д.), то америкосы правы: аминофаза, будучи вообще неустойчивой даже при хранении, от воды загибается вообще с дикой скоростью. Причём почти независимо от производителя. |
||
|
Vlad Orlovsky Пользователь Ранг: 60 |
08.02.2007 // 15:55:34
Наша компания выходит с новои колонкои которая делит сахара (наряду с дрыгими соединениями). Основана не на амино фазе. Даите мне свои емаил и я пришлю парy методов): |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
08.02.2007 // 16:50:40
Влад, этих колонок (которые делят сахара) пруд пруди самых разнообразных (по цене от 2 тыс у.е.). Ему нужно делить на том, что есть. Т.е. аминофазе. |
||
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
08.02.2007 // 17:05:35
Влад, Ваши колонки нам известны. Если я правильно понимаю, речь идёт о Праймсепе и HILIC механизме? |
||
|
Vlad Orlovsky Пользователь Ранг: 60 |
08.02.2007 // 17:16:18
No it is not Primesep. We will introduce Abelisc line of columns during Pittcon 2007 (Chicago. It is HILIC/Ion-Exchange |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 10 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
