| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Забилась колонка Symmetry С18 >>>
|
 |
| Автор | Тема: Забилась колонка Symmetry С18 | ||
|
бандеролог Пользователь Ранг: 4 |
 04.05.2007 // 11:37:04
Дико конечно звучит, но я на неё наносил 10% раствор белка в надежде определить остаточное содержание детергента. Элюцию проводил ацетонитрилом или метанолом. В результате при потоке метанола 1 мл/мин давление становится > 4000 PSI. Чем бы мне её поотмывать? или просто выкинуть. Спасибо |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
04.05.2007 // 12:11:14
Что ж Вы так, белок на незащищенную ОФ колонку? Это прям мазохизм какой то.  Если нет колонки с дифильным сорбентом, уж хоть бы предколонку предусмотрели. Быстрей всего от ацетонитрила или метанола белок скоагулировал и забил входной фильтр и/или межчастичное пространство сорбента на входе. Можно попробовать перевернуть колонку и провети обратную промывку водой с ацетонитрилом. Если не поможет - неизбежна разборка и замена входного фильтра, а то и первых 3-5 мм слоя сорбента в колонке. |
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
04.05.2007 // 12:16:25
Редактировано 1 раз(а)
 да бывает и по хлеще, я слышал, как один "хроматографист" в хотел зубной пасте что-то определить, взял развел зубную пасту элюентом,слегка так, и вколол  Теперь по делу: 1)если колонка сейчас у Вас под метанолом, тогда сделайте так:5 ГО 20% МеОН -вода, потом 7 ГО 5% МеОН - вода, посмотрите что с давлением, скорее всего улучшения не будет, переходите к пункту 2 2)Переверните колонку и не менее 15 ГО 5% МеОН - вода при небольшой скорости потока. Скорее всего "забит" входной фрит колонки. А Ваш белок в чем наиболее хорошо растворяется? Возможно, необходимо будет менять входной фрит. ГО - геометрический объем (колонки) |
||
|
Igor Sit Пользователь Ранг: 150 |
04.05.2007 // 12:48:24
- в желудке...
|
||
|
Дым Пользователь Ранг: 383 |
04.05.2007 // 13:02:53
Тадыть подвижную фазу из солянки с ферментами...Разбодяжить какой-нить "Мезим" ))А ежели серьезно-все правильно выше сказано. Аккуратно только... |
||
|
Дым Пользователь Ранг: 383 |
04.05.2007 // 13:03:53
ТОлько все эксперименты следует начинать на обратном потоке. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
04.05.2007 // 13:08:40
Редактировано 1 раз(а) Я бы после этого (если предыдущие упражнения не дали результата) помыл бы еще в обратном направлении 0.1% трифторуксусной кислоты в 50%-ном ацетонитриле с минимальной скоростью в течение часа-двух. И напоследок, если ничего не поможет, зверский способ, описанный для ОФ колонок Vydac: помыть смесью 1ч. 0,1М HNO3 с 3-мя частями изопропанола, желательно при повышенной температуре и подольше. Не уверен правда, что Ваша колонка это выдержит, но если уже не будет другого выхода... Если все-таки решитесь - сообщите о результатах! |
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
04.05.2007 // 13:43:14
Мда... Добрый ты, Юра, аж сил нет... От чего другого отмыть, может и прокатит. А белок от азотки по ксантопротеиновой реакции вообще зацементируется и перестанет растворяться хоть в чем-либо. Вот тогда точно колонке п....ц придет. А эта маленькая северная лисичка шутить не любит...
|
||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
04.05.2007 // 14:13:38
Редактировано 1 раз(а) За что купил - за то продаю. Сам в фирменных "Care and use" на 300-ангстремники С4 и С18 читал! |
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
04.05.2007 // 14:23:47
Олимпиада для хроматографистов, отборочный тур: Задачи: 1)предложите наиболее эффективный/дешевый и быстрый способ убить указанный выше сорбент 2)предложите варианты дальнейшего применения убитого Вами сорбента в аналитической практике |
||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
04.05.2007 // 14:36:08
А с ферментами интересная идея. С азоткой - это на конец надо оставить, чтобы наверняка,чтобы потом искать ответ на задание №2 to "бандеролог": Да, и если решите реализовать какой-нибудь необычный способ,пожта напишите о результатах. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 21
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
