| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
HPLC-изменение времени удержания при добавлении элюента?! >>>
|
 |
| Автор | Тема: HPLC-изменение времени удержания при добавлении элюента?! | ||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
 12.10.2007 // 13:56:30
Уважаемые форумчане, помогите пожалуйста понять следующий феномен: при добавлении в полупустую бутыль емкостью 1 л ещё 500 мл ацетонитрила изменяется время удерживания пика (хлорогеновая кислота) - пик элюируется раньше на 1-2 мин, то есть например выходил в 16 мин, начинает в 14,8 мин после дозаполнения. Температура элюента такая-же, как и остатка в бутылке, пробовал закручиввать неплотно, чтобы не создавать разность давления - то же эффект. Тефлоновый фильтр на капилляре поменял - на феномен это не влияет. Добавлял ацетонитрил тоже из полупустой бутыли - эффект сохраняестся. Если просто вытащить капилляр на ссеридину бутылки - эффект не наблюдается. Эффект наблюдается на разных образцах и не зависит от природы образца. Больше пока мыслей нет, может кто подскажет решение - буду благодарен. Колонка С18 , Система - кислая вода: ацетонитрил, градиент 5-12 % ацетонитрила 10 мин, 12 % - до 15 мин, потом промывка ацетонитрилом до 85%. 25 градусов термостат. Объем пробы 50 мкл. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Kalambet Пользователь Ранг: 484 |
 12.10.2007 // 14:52:39
Гипотеза: эффект может зависеть от высоты уровня ацетонитрила (пережатый всасывающий капилляр или что-то в этом роде). Проверка может быть осуществлена подъемом бутылки с ацетонитрилом вместо доливания. Подъем капилляра не поможет. |
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
12.10.2007 // 15:00:16
Сейчас попробую проверить - поднять бутылку, - и доложу, но не очень понял, в чём принцип. капилляр проверил - абсолютно интактный, только если где-то внутри может пузырьком воздуха перекрыт частично, ну чисто теоретически. Но система прокачивается перед стартом каждый раз, так что воздуха быть не должно. Кстати, на соседнем приборе эффект не наблюдается, так что или прибор, или колонка глючат. Заменить колонку пока не представляется возможным, только на следующей неделе могу попробовать. |
||
|
Kalambet Пользователь Ранг: 484 |
12.10.2007 // 15:09:13
Если в капилляр попала какая-то механическая гадость или он пережался, может возникать, например, эффект типа кавитации при всасывании растворителя. |
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
12.10.2007 // 15:57:03
Похоже, Вы таки были правы - поднял бутылку где-то на пол-метра - в результате пик вышел почти на 9 мин раньше! Караул! И что теперь с этим делать, какие будут советы на этот счёт? |
||
|
Styskin Пользователь Ранг: 228 |
12.10.2007 // 17:10:18
Странная ситуация. Попробуйте опустить бутыль ниже головки насоса. Заборный фильтр должне быть на дне... |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
12.10.2007 // 17:22:04
Похоже, всё проще - переставил ацетонитрил на другой канал - эффект исчез, так что похоже клапан на этом канале прохудился. Спасибо всем откликнувшимся, если будут подробности - сообщу. |
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
12.10.2007 // 17:23:09
К сожалению, сегдня уже нет времени попробовать, так как хотел оставить в работу на выходные серию. Может в понедельник поиграюсь дальше. |
||
|
Styskin Пользователь Ранг: 228 |
12.10.2007 // 21:27:51
Насос градиентный? Какой фирмы и модели если не секрет 
|
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
15.10.2007 // 11:15:26
Конечно не секрет Насос градиентный, 4-х канальный, фирмы Dionex - P680 HPLC Pump. |
||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
15.10.2007 // 14:35:42
Поигрался я тут с утра - оказалось, всё не так просто. Изменение времени удерживания происходит вне зависимости от канала (я правда только на 2.- попробовал, но думаю, этого достаточно). Ситуация такая - бутыль на месте - пик выходит на 15-й минуте, поднимаю на пол метра выше - пик выходит на 7-й минуте, поускаю ниже насоса на пол-метра - пик выходит на 25-й минуте. Какие будут мыли по этому поводу? То есть в принципе, всё логично, чем выше - тем легче ацетонитрил закачтвается, тем раньше выходит ипк, это понятно, только вот что поломалось конкретно, у кого какие мысли? Позвонил в службу тех.поддержки, они с таким не сталкивались, и пока мыслей никаких, но обещали посоветоваться с кем-то и заехать на днях. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
