Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
Твердофазная экстракция из плазмы >>>
|
Автор | Тема: Твердофазная экстракция из плазмы | ||
РоманК Пользователь Ранг: 58 |
02.02.2005 // 14:47:26
Подскажите пожалуйста литературу по твердофазной экстракции лекарственных препаратов из плазмы крови |
||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
02.02.2005 // 17:15:22
Общие принципы не зависят от матрицы, различия в деталях. Литературы очень много и, хотя она не успевает за рынком сорбентов, базовые принципы уже давно устоялись и попали в книги. У меня на полке стоит сборник: Solid-phase extraction. Principles, Techniques and Applications. ed. N. J. K. Simpson, M. Dekker Inc., NY, 2000. Присутствующий здесь Константин Сычев написал по ТФЭ обзор, см. соответсвующий топик. Специально по плазме есть обзоры в периодике: Я работаю почти исключительно с плазмой, могу подсказать, если есть конкретные вопросы. |
||
Siemens Пользователь Ранг: 2 |
02.02.2005 // 17:58:56
А Вы не хотите ли поделиться этой книжечкой с нуждающимися? Могли бы и выложить ее в электронном виде, чтобы и другие могли ею пользоваться. Что Вам, жалко, что ли? |
||
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
02.02.2005 // 18:30:46
Мне не жалко. Приезжайте ко мне в Монреаль, отсканируйте. У меня на 514 страниц времени нет. Да и места на сервере для такого объема у меня тоже нет. |
||
Siemens Пользователь Ранг: 2 |
02.02.2005 // 18:38:08
Смог бы - приехал. А сканировать можно и по частям, небольшими порциями. |
||
РоманК Пользователь Ранг: 58 |
03.02.2005 // 11:30:00
Благодарю за ссылки. Обзор Константина читал. Интересует стадия осаждения белков. Встречал упоминания о том, что для этого используется трихлоруксусная кислота. А в каком количестве брать, какая должна быть концентрация? |
||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.02.2005 // 14:26:47
Вообще-то при использовании ТФЭ в осаждении белков нет необходимости, мы обычно пропускаем через патрон плазму, просто разбавленную соответствующим буфером как минимум вдвое, разве что иногда центрифугируем перед этим, чтобы отбить сгустки. В принципе, свежеразмороженные образцы, стабилизированные ЭДТА, после разбавления пополам хорошие патроны не забивают. Предварительное осаждение трихлоруксусной кислотой может потребоваться, разве что, если патроны плохого качества или если необходимо очень сильное подкисление образца перед экстракцией (в этом случае частичное выпадение белков начинается при использовании любой кислоты). На полкубика плазмы (лучше всего охлажденной) добавляют равный объем 20% трихлоруксусной кислоты в воде, перемешивают (vortex), после чего лучше всего центрифугировать при 15000 об/мин. Осаждение проводят в соответсвующих полипропиленовых пробирочках для центрифуги. Хочу заметить, что если использовать осаждение белков без последующей ТФЭ, то гораздо эффективнее работает ацетонитрил или ацетон в пятикратном по отношению к плазме избытке. |
||
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
03.02.2005 // 17:27:43
Хорошо, когда уже ничего говорить не надо Спасибо за прочитанный обзор! |
||
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
03.02.2005 // 20:17:11
Многие лекарства на 20 - 90% связываются с белками крови. Как они при ТФЭ извлекаются? |
||
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.02.2005 // 20:53:16
Да, действительно, связываются многие, но чаще всего недостаточно прочно, чтобы помешать экстракции. В моей практике были случаи, когда сначала были проблемы со степенью извлечения, но они решались правильным подбором буфера и его концентрации. Возможно, есть случаи, когда надо прибегать к предварительному осаждению белков именно по этой причине, но я не сталкивался с такими. В любом случае, степень извлечения надо оптимизировать. Мы добиваемся как минимум 70%. |
||
РоманК Пользователь Ранг: 58 |
04.02.2005 // 12:27:47
Если не нужно осаждать белки, то это даже еще лучше. Попробую. Может получится. |
|
||
Ответов в этой теме: 32
|
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |