| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ: определение токоферола в масле семян тыквы, частокол пиков. >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ: определение токоферола в масле семян тыквы, частокол пиков. | |||||
|
Маришка Пользователь Ранг: 16 |
 01.03.2010 // 22:54:07
Уважаемые химики! Помогите, пожалуйста! У меня возникли проблемы при количественном определнии токоферола в масле семян тыквы. Мы прорабатываем ФС. Пробоподготовку делаем в соответствии с ФС. Но даже для РСО на хроматограмме у меня "частокол". колонка С18, элюент - спирт-вода-9:1. Какие "подводные камни" могут быть? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
02.03.2010 // 11:18:45
ФС конечно я посмотрю, причина же "частокола" в том что в масле тыквы содержится не а-токоферол, а токоферолы, в том числе и в виде жирных эфиров. В общем то метод борьбы с этой проблемой - гидролиз щелочью, но там свои заморочки в виде окисления токоферолов при нагревании, надо либо кипятить в атмосфее азота, либо также обрабатывать и стандартный образец токоферола ацетата. |
|||||
|
Маришка Пользователь Ранг: 16 |
02.03.2010 // 20:24:09
Спасибо за ответ. Мы гидролизуем и сам заведомый токоферол ацетат и пробу. Но большое количество пиков у меня появляется не только при анализе пробы, но и самого токоферола. |
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
03.03.2010 // 11:05:54
Значит окисляется. Раствор в итоге коричневый? |
|||||
|
Маришка Пользователь Ранг: 16 |
03.03.2010 // 16:23:22
Нет, раствор получается бледно-желтый. Сегодня кипятила в токе аргона (у нас азота нет). Выходит уже меньше пиков (порядка трех), но они все одинаковые по высоте. От подсадки к подсадке все время плывет время удерживания. |
|||||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
03.03.2010 // 22:37:53
Редактировано 3 раз(а) День добрый. В природе не существует растений содержащих исключительно альфа токоферол  , вопрос лишь в том, видите ли вы дельта и гамма .Омыление делать придется (эфиры токоферолов имеют очень не хорошие формы пиков, да и спектры от оных жуткие  ), не забудьте добавить на 5г масла 0,1-0,2 аскорбинки, хотя уверяю вас, токоферолы это последние вещества которые будут претерпевать разложение от температуры (60-78 гр) . Токоферолы стабильны до 250гр., хотя щелочь и снизит эту температуру, ну добавьте еще БОТ. Благодаря омылению вы избавитесь от ряда не интересующих вас веществ, уйдут с водой, только параллельно делайте всё тоже с фармокопейным альфа токоферолом. На вашей колонки выход такой дельта (≈0,8), гамма(≈0,9), альфа(1), разделение, правда, в вашей подвижке так себе, но она забита во всех документах. Да и ещё не стройте иллюзий о калибровках, омылять придется (первые раз 10 минимум) токоферол + масло (воспроизводимости приходит очень не сразу). Спирт вода не очень сильный элюент  (возможно, остаётся гадость от предыдущего вкола, выходящая в следующем) попытайтесь регенерировать колонку между анализами ацетонитрилом (это легко если у вас 2 и более элюентных линей), только не забывайте уравновешивать после этого колонку ≈15-20 объемов системы водно-спиртовым элюентом, только четко повторяйте скорости и времена, тогда появится воспроизводимости. PS.. Не обижайтесь, если я слишком подробен, я не знаю ваш опыт.  PSS.. Поздравляю вас, если на хроматограмме у вас только три основных пика так и должно быть . Хотя у меня в ≈0,5 выходит один вернее несколько плохо поделенных пиков, их нет на бесцветных маслах, я так думаю это пигменты вероятно каротинойды. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
03.03.2010 // 23:02:31
Что такое подсадка , это введение через инжектор пробы в линию.?
|
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
09.03.2010 // 9:09:50
1. Какой у Вас детектор, позволяет поставить хотя бы две длины волны одновременно? Именно это необходимо сделать, чтобы понять - какие пики из "частокола" - это токоферол. 2. Вообще, должно быть именно три пика после гидролиза. 4 изомера, два из которых в на С18 не делятся.. Первый пик должен быть самым большим. 3. Вообще говоря, есть стандарт токоферолов. Какие могут быть проблемы, если есть стандарт? 4. Времена плывут по многим причинам. Во-первых, наверное, у Вас колонка не термостатируется. А нужно ее не просто термостатировать, в поддерживать при постоянной повышенной температуре порядка 40-50С. Во-вторых, смесь свою с самого начала надо было гидролизовать. Теперь колонка у Вас забита всякой жирной гадостью. Моют колонку так - переворачивают и прокачивают 20% хлороформа или хрористого метилена в ацтонитриле или спирте. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 7 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
