| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Определение сахаров и кислот на ГЖХ >>>
|
 |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
 13.03.2010 // 0:52:46
Н-да... такая задача 100% для ВЭЖХ. Делается обычно - сначала набирают статистику на ВЭЖХ-УФ, затем несколько наиболее типичных образцов снимают на ВЭЖХ-МС. Ну, и стандарты - все что есть в наличии хороши.. Все в куче потом расшифровывают. Если все нужно точно количественно, то нужные стандарты закупают.. все градуируют, т.е. разрабатывают методику под ВЭЖХ-УФ.. Короче, все-таки серьезное исследование - но с точно гарантированным счастливым концом. Полярные кислоты прекрасно делятся и в обращенке, и в гидрофильном режиме. А лучше - использовать смешанные фазы. Например, обращенно-анионообменные или нормальнофазово-анионообменные. Простейший вариант последней - банальная аминофаза. На элюентах ацетонитрил-вода при небольшой доле воды вклад нормально-фазового и анионообменного типов удерживания для карбоксильных кислот сопоставим. Соотвественно, отсюда гибкость в подстройке нужной селективности. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
13.03.2010 // 14:55:38
Редактировано 1 раз(а) Никто не спорит, что адекватнее такую задачу решать в рамках ВЭЖХ. Но... Помимо ВЭЖХ-УФ нужно использовать другие типы детектирования, например ELSD, так же необходимо будет подумать и о дериватизации, для увеличения чувствительности - концентрации то неизвестны. Далее, по-хорошему, "типичные" пики надо собирать и отдельно "драконить". Насчет ВЭЖХ-МС, допустим стоит просто ESI-MS(Q) (что очень часто встречается), в -ESI допустим получите [M-H]- и что дальше? А если фрагментация в ионном источнике и Вы наблюдаете не [M-H]-? Выделять каждый пик и делать прямую инфузию или в +ESI в форме аддуктов с катионами металлов - итог - номинальная молекулярная масса + какая-то инфа по структуре (фрагментация в ионном источнике) - и что дальше? TOF - замечательно, но как быть с изомерами? QqQ - хорошо, а если в литературе не найдете МС/МС спектры, сами сможете расшифровать? То же касается и IT. Да, и какой к черту "Простейший вариант последней - банальная аминофаза. На элюентах ацетонитрил-вода при небольшой доле воды вклад нормально-фазового..." |
||
|
Gudvin50 Пользователь Ранг: 1 |
16.03.2010 // 12:09:37
Для drynn. В свой практике я использую для решения подобной задачи дериватизацию силирующими агентами. Использую смесь триметилхлорсилана, N, O-бис(триметилсилил)трифторацетамида в пиридине (1:2:2). 100 мкл смеси на 1-10 мкг смеси окси-кислот, моно- и дисахаридов. Силирую 30 мин. при н.у., ввожу 0,5 мкл ВС -тридекан (или гексадекан), инжектирую 0,5 мкл полученного раствора в испаритель хроматографа при 280 оС. Анализ выполняю на Кристалле 2000М с кап. колонкой 30 м, диам. 0,2 мм, НФ=полиметилфенилсиликон (5%фенильных). Аналог Ms5. в режиме программирования T от 40 до 285 с шагом 3 гр./мин. Детектор ПИД. Идентификацию выполняю на хроматографе "TRACE GC ULTRA" фирмы "Thermo Elektron", оснащенном капиллярной аналитической колонкой корпорации Thermo Electron длиной 60м и диаметром 0,32мм. Неподвижная фаза - полифенилметилсиликон, содержащий 5% фенильных групп и 95% метильных групп. Толщина неподвижной фазы - 0,25μ. Деление потока гелия на входе в испарителе 1: 30. Масс - селективный детектор DSQ. Ионизация электронным ударом, регистрация положительных ионов, сканирование 50 – 800 Дальтон. Все силирующие реагенты -Мерк-овские. Будут проблемы- пишите на punegov{coбaчkа}ib.komisc.ru |
||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
16.03.2010 // 21:06:26
Gudvin50, есть небольшой вопрос по тому что Вы написали. 1. пробовали ли Вы использовать для этой цели просто BSTFA (BSA), без ТМХС? 2. не ли проблем с анализом оксикислот в присутствии углеводов? 3. не происходит ли превращений с углеводами в ходе силирования? я пытался использовать для подобной задачи BSA, в результате в присутсвии глюкозы не увидел лимонной кислоты (хотя без глюкозы она прекрасно получается), сама глюкоза вышла в виде 4-5 пиков с очень похожими масс-спектрами (скорее всего изомеризовалась при силировании). Но я подозреваю на BSA, он у меня 3,5 летний... |
||
|
drynn Пользователь Ранг: 26 |
18.03.2010 // 13:34:31
Спасибо за методику. 2АЛЛ. ВЖЭХ не применим, ввиду отсутствия ВЭЖХ-МС. Нет его и все тут. Анализ будет проводиться для разных качественно и количественно проб. Интересуют ОСНОВНЫЕ кислоты. И в первую очередь качественный и примерных количественный анализ. Пока остановился на двух методиках: -Прометилировать метанолом в HCl (или H2SO4) -методика Гудвина. (Как первая МЕТОДИЧЕСКИ НЕГЕМОРНАЯ методика дериватизации) |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Дмитрий (anchem.ru) Администратор Модератор форума Ранг: 4445 |
 18.03.2010 // 14:43:20
Все обсуждения "механизмов ВЭЖХ" и "собственных теорий" в отдельную тему: !!!
|
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
