| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ, Внешний стандарт, объём инжекции. >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ, Внешний стандарт, объём инжекции. | ||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
 27.11.2010 // 23:08:27
День добрый. На руках интересный документ, вернее его вариант. Препарат с тремя дозировками. Готовится СО одной концентрации, на колонку вкалывается 10 мкл СО, 10 мкл (первая дозировка), 25 мкл (вторая), 50 мкл (третья). «Правильно» ли вкалывать разные объемы (до этого подобных методик не встречал) и если да то обязательно ли это отражать в формуле, ну скажем для СО, умноженная навеска на 0,01 а для исп 0,01 0,025 0,05 соответственно. Либо оговорить славами и всё. Навеску испытуемого менять не возможно, да и хотелось бы оставить раствор СО без изменения, один раствор. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
28.11.2010 // 12:22:04
Автосамплер если - нормально.. |
||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
28.11.2010 // 14:19:00
По логике вещей не правильно: когда проводят поверку хроматографа, то смотрят стабильность базовой линии, точность при повторных вводах пробы но не проверяют изменение объема ввода пробы. Другими словами если мы "велели" автосамплеру ввести сперва 25 мкл, а затем 50 мкл пробы - вполне возможно, что вводится 26 и 48 мкл. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
28.11.2010 // 17:15:25
Ну так чего - взял сам и проверил... Я в молодости даже себя калибровал - насколько точно вручную инжектирую 5 мкл пробы на неполной петле (20 мкл). Укладывал СКО в 2% в спокойном состоянии духа и в 4% - при спешке.. |
||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
28.11.2010 // 18:45:29
Редактировано 1 раз(а) "Проверить" то можно, а вот "поверить" - нельзя. Если при утверждении методики эксперт будет въедливый, посмотрит на методику и на свидетельство о поверке хроматографа - то не пропустит. И в принципе будет прав: в методике поверки хроматографа ничего про изменение объема вводимой пробы нет. Да и какая проблема разбавить раствор СО? Хотя мне тоже попалась методика в регистрационном досье на ЛС, в которой испытуемого раствора вводят 20 мкл, а раствора СО - 10. Посмотрим, что скажет эксперт. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
28.11.2010 // 21:40:32
Редактировано 1 раз(а) А не надо этому эксперту слишком много знать  во многом знании много печали Пишите - разбавляли СО - и все - какие проблемы-то?
|
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Kalambet Пользователь Ранг: 484 |
29.11.2010 // 11:19:29
Приличные люди автосамплеров с такой ошибкой объема вводимой пробы не делают. В зависимости от объема шприца, конечно. Я бы при 100-мкл шприце поставил на 0.1 мкл погрешность. Градуировка все выдержит - зависимость отклика от количества введенного вещества. Правильность процедуры зависит от действий пользователя на этапе измерения - если проба вводится шприцом, то описанная процедура скорее правильная, поскольку погрешность построенной зависимости учтет ошибку дозирования. |
||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
29.11.2010 // 11:28:42
Нет неверно. Точнее развести растворы соответственно. Автосэмплер это хня, а вот если кто так попробует делать вручную в реодайн.. |
||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
29.11.2010 // 21:27:51
День добрый. Для ясности, объясню суть проблемы. Препарат при максимальной дозировке, это 20 доз в 100 мл (минимально возможный объём). Чтобы увеличить пропорционально, нужно брать 45 доз и 100 доз. Лично я не возьмусь дозировать 100 доз скажем по две параллельные в 5-7 сериях в день, и это только на количественное определение. Плюсом, сложность в том, что при максимальной дозировке при заколе 50 мкл высота основного пика 0,15 е.о.п., по мимо всего прочего нужно контролировать одновременно с количественным определением 2 примеси в 0,5 %, а это уже 0,008 е.о.п, снижать концентрацию дополнительным разведением пробы некуда. Что посоветуете. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
29.11.2010 // 23:56:19
Не, я не понял. Так в чем проблема-то? Ваш единственный стандарт наоборот - самый разбавленный? Ну, если так, то выход один - дозировать автосамплером разные объемы. Если самые концентрированнный - то удобнее его разведением приготовить серию и вклалывать один объем. Пик низковат? Ну, немного измените условия. Если колонка 250х4.6 с 5 мкм, то взяв 150х4.6 с 3 мкм, поднимете высоту пика примерно в 2 раза. А еще проще - просто увеличьте скорость потока - насколько это приемлемо по давлени. На удачных 250х4.6 с 5 мкм можно работать на 3 мл/мин при давлении около 200. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 9 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
