Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ пробоподготовка??

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ пробоподготовка?? >>>

  Ответов в этой теме: 13
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: ВЭЖХ пробоподготовка??

6.ok.off
Пользователь
Ранг: 20

06.06.2005 // 16:08:10

Предстоит анализ культуральной жидкости после роста микроорганизмов на предмет наличия орг. кислот (молочной, пропионовой, уксусной и д.р.)
Колонка С18.
В процессе пробоподготовки нужно максимально очистить пробу от белка, пептидидов , сахаров и д.р. (главное от белка)
Вопрос - как это проще всего сделать??

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

06.06.2005 // 16:30:17

Ну, ей богу, как комсомольцы 30-х годов... Создавать себе трудности, а потом их героически преодолевать.
Делать эти кислоты на ВЭЖХ - не самый лучший выбор.
ГХ будет куда как дешевле и проще. Благо, что перечисленные Вами вещества летучи. Проблемы будут разве что с молочной кислотой, но и они преодолимы.
Прошу извинить общество, но развернутые посты писать некогда. Я в командировке. Вот дорвался до интернета на несколько минут...

6.ok.off
Пользователь
Ранг: 20

06.06.2005 // 16:50:29

Спасибо за ответ.
Вот так вот я их и гонял на ГЖХ пока тот в конец не умер (Хром 4).

Виталий
Пользователь
Ранг: 1378

06.06.2005 // 17:35:55

6.ok.off пишет:
Спасибо за ответ.
Вот так вот я их и гонял на ГЖХ пока тот в конец не умер (Хром 4).

А как он умер-то? С чего ему мреть?
А вы их в чистом виде гоняли или метилировали?

6.ok.off
Пользователь
Ранг: 20

06.06.2005 // 19:37:33

Кислоты гонял прямо так.
А умирал он долго но был каждый раз реанимирован, а тут не держит температуру в термомтате колонок. Гуляет от 110 до 160.
Вот не знаю чего с ним делать, мож кто сталкивался??

podlodka
Пользователь
Ранг: 32

07.06.2005 // 12:32:35

Редактировано 2 раз(а)

6.ok.off пишет:
Предстоит анализ культуральной жидкости после роста микроорганизмов на предмет наличия орг. кислот (молочной, пропионовой, уксусной и д.р.)
Колонка С18.
В процессе пробоподготовки нужно максимально очистить пробу от белка, пептидидов , сахаров и д.р. (главное от белка)
Вопрос - как это проще всего сделать??

Работаю с кж постоянно, просто отфугуйте и нативный раствор разбавьте водой до нужной концентрации ( я работаю в диапазоне 0,2-3 г/л). От сахаров избавляться нет никакой надобности. От белка (если есть необходимость) избавиться легко, просто разбавление делать к примеру 50% ацетонитрилом, далее фугуете и на анализ.
На С18 все!!!! органические кислоты деляться без проблем. Только надо использовать не очень убитую колонку 250 х 4,6 мм.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

ИК-Фурье спектрометр Varian 640-IR
ИК Фурье спектрометр Varian 640-IR – это недорогой спектрометр, совмещающий выдающиеся параметры и простоту в эксплуатации. Наличие уникальных программных и технических решений позволит даже неопытному пользователю быстро освоить этот метод.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

podlodka
Пользователь
Ранг: 32

07.06.2005 // 12:36:06

Леонид пишет:
Делать эти кислоты на ВЭЖХ - не самый лучший выбор.
ГХ будет куда как дешевле и проще. Благо, что перечисленные Вами вещества летучи. Проблемы будут разве что с молочной кислотой, но и они преодолимы.

Позвольте с Вами не согласиться. Органические кислоты на ВЭЖХ определять не так уж и трудно, просто условия надо подобрать и колонку :о)
И абсолютно никаких проблем с молочной килотой!!!
Да и пробоподготовка минимальна!

КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306

10.06.2005 // 22:59:11

Господа и госпожа Наташа!

Даже захотелось ругнуться, хотя времени сомсем нет. Эту тему миллион раз обсуждали с постами по 40 (!!!) ответов. Пробу пропускаешь через патрончик с С8 и ли нитрилом и колешь. Элюент 20 мМ кислый фосфат.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

27.06.2005 // 9:08:03

podlodka пишет:

Леонид пишет:
Делать эти кислоты на ВЭЖХ - не самый лучший выбор.
ГХ будет куда как дешевле и проще. Благо, что перечисленные Вами вещества летучи. Проблемы будут разве что с молочной кислотой, но и они преодолимы.
Позвольте с Вами не согласиться. Органические кислоты на ВЭЖХ определять не так уж и трудно, просто условия надо подобрать и колонку :о)
И абсолютно никаких проблем с молочной килотой!!!
Да и пробоподготовка минимальна!

И в чем же Вы не согласны?

Я не утверждал, что решить эту задачу методом ВЭЖХ нельзя. Можно, с некоторыми нюансами.
Но ведь Вы не будете спорить, что на ГХ это будет гораздо дешевле, как по начальным затратам, так и по себестоимости каждого последующего анализа?
И по молочной кислоте я имел ввиду некоторые проблемы именно по ГХ.

podlodka
Пользователь
Ранг: 32

27.06.2005 // 14:17:04

Редактировано 1 раз(а)

Леонид пишет: И в чем же Вы не согласны?
Я не утверждал, что решить эту задачу методом ВЭЖХ нельзя. Можно, с некоторыми нюансами.
Но ведь Вы не будете спорить, что на ГХ это будет гораздо дешевле, как по начальным затратам, так и по себестоимости каждого последующего анализа?
И по молочной кислоте я имел ввиду некоторые проблемы именно по ГХ.

Не согласна что проще именно в КЖ. Что касаемо стоимости, то мы используем колонку которая стоит 300$ и проводим на ней до 600 анализов (регенерируем ее и затем используем еще раз)а после ее можно использовать для других более простых объектов. В качестве элюента идет в основном вода. На пробоподготовку времени и расходников уходит минимальное количество. Так что в общей сложности анализ не так уж и дорог.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

28.06.2005 // 8:45:28

podlodka пишет:

Леонид пишет: И в чем же Вы не согласны?
Я не утверждал, что решить эту задачу методом ВЭЖХ нельзя. Можно, с некоторыми нюансами.
Но ведь Вы не будете спорить, что на ГХ это будет гораздо дешевле, как по начальным затратам, так и по себестоимости каждого последующего анализа?
И по молочной кислоте я имел ввиду некоторые проблемы именно по ГХ.
Не согласна что проще именно в КЖ. Что касаемо стоимости, то мы используем колонку которая стоит 300$ и проводим на ней до 600 анализов (регенерируем ее и затем используем еще раз)а после ее можно использовать для других более простых объектов. В качестве элюента идет в основном вода. На пробоподготовку времени и расходников уходит минимальное количество. Так что в общей сложности анализ не так уж и дорог.

Ну что же...
Давайте считать. Стоимость ГХ в минимально необходимой конфигурации составит не более 10-12 килобаксов. Колонка - порядка 100 баксов. Ее можно подготовить и самостоятельно, что обойдется почти даром. На ней можно сделать более 3000 анализов веществ подобной структуры. На это количество анализов нужно будет два балона азота, стоимость которого и учитывать то смешно.
Добавим сюда гораздо большую чувствительность в ГХ. Пробоподготовка - как минимум не сложнее и не дольше, чем для ВЭЖХ. Время анализа раза в два быстрее.
ВЭЖХ за эти деньги просто не купить
Ну а так, цвет веревки - дело вкуса. У каждого свои пристрастия в плане использования методов.
Помню, как-то Шпигун уверял, как хорошо делать тяжелые металлы методом ионной хроматографии.
Да кто спорит о принципиальной возможности. А вот целесообразно и рационально ли это...
Так что если речь идет о постановке данной методики с нуля, начиная с приобретения оборудования, то однозначно - ГХ лучше.
Ну а если есть лаборатория и в ней кроме ВЭЖХ ничего нет, то за отсутствием гербовой пишут на простой. Тут, ясное дело, есть смысл ставить методику на ВЭЖХ.
В конце концов обстоятельства заставляют нас считать деньги.
Так что предмета для спора не вижу.


Ответов в этой теме: 13 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты