Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Выделение фосфолипидов из водных проб >>>

  Ответов в этой теме: 5

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Выделение фосфолипидов из водных проб
metrim
Пользователь
Ранг: 646

15.03.2011 // 18:45:11     
Пробуем сейчас методику выделения фосфолипидов (PLFA) из почвенных образцов для последующей идентификации их и интерпретации как мармеров таксономического состава почвенной микробиоты. Ничего сильно нового в этом нет.
Возникла тут мысля: попытаться адаптировать этот метод для водных проб. При этом сложность состоит в том, что методика пробоотбора предполагает экспедиционные условия, т.е. нужно иметь возможность законсервировать образцы воды на неделю-месяц без наличия холодильника, возможности выпарить, лиофилизировать и пр.
Короче нужно найти или сделать какие то "концентрирующие патроны", что бы прокачивать через них 1-2 литра воды, сажать на них PLFA, герметично упаковывать, а уже потом, по возвращении в лабораторию - спокойно экстрагировать, чистить и пр.

Совершенно не представляю как подступиться к этому вопросу. Подскажите хотя бы в каком направлении искать, что смотреть.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Garry
VIP Member
Ранг: 1075


15.03.2011 // 20:07:41     
Либо концентрировать на твердофазных патронах с XAD-2 (7) полимером или на худой конец ТФЭ с С18. Можно прикупить полимерных дисков для ТФЭ для фильтрации через них до 1 л воды.
Если ни того ни иного нет возможности приобрести, то запаситесь делительной воронкой и герметичными емкостями с тефлоновыми септами. Ну и ... бутылью с хлороформом или хлористым метиленом. Делов - то, экстрагируете фосфолипиды в хлороформ, отделяете хлороформенный экстракт и сливаете в герметичную емкость. Конечно работа с хлороформом чревата крепким сном и больной печенью, но если это делать под вытяжкой или на свежем воздухе, то... нормально.
metrim
Пользователь
Ранг: 646


16.03.2011 // 17:36:35     
Garry, спасибо за ответ
ТФЭ с С18 в хозяйстве есть. Только вот народ говорил, что это не лучший вариант в таком случае.
Мембранные фильтры тоже есть и полимерные и "стеклянные", но вот получится ли на них "посадить", а главное потом "снять" количественно???
С бутылями хлороформа возможности путешествовать вероятно не предвидится.
Вообще сейчас ка раз по методике которую пробуем из почвенных образцов в делительной воронке PLFA выгоняют в хлороформ. Просто я все это наблюдаю и понимаю, что возможности организовать такой же процесс в полевых условиях - нет.

Вот отобрать объем воды и быстро пропустить через патрон или фильтр, а потом "законсервировать" в малом объеме хлороформа - наверное получится.

Собственно определение потом проводится на ГХ, нормировка производится по вводимому в пробу маркеру (не встречающемуся в природных условиях)
petrovich1881
Пользователь
Ранг: 17


01.09.2011 // 21:46:56     
Редактировано 1 раз(а)

Как-то пару лет назад смотрел диссер про PLFA биопленки в питьевой воде www.ktl.fi/attachments/suomi/julkaisut/julkaisusarja_a/2003a16.pdf. Там экстракция, но может что-нибудь полезное найдете еще.
Для экспедиционных условий навскидку могу предложить стерильные бутылки с заранее налитым хлороформом, только бутылки взять с прижимной керамической пробкой типа из-под пива Grolsch, проавтоклавировать и, если хотите, сменить прокладку под крышкой. Пробы вливать в бутылки (встряхивание в рюкзаке осуществляется автоматически!), а по возвращении довести экстракцию до конца.
metrim
Пользователь
Ранг: 646


04.09.2011 // 22:23:00     

petrovich1881 пишет:
Как-то пару лет назад смотрел диссер про PLFA биопленки в питьевой воде www.ktl.fi/attachments/suomi/julkaisut/julkaisusarja_a/2003a16.pdf. Там экстракция, но может что-нибудь полезное найдете еще.
Благодарствую!


Для экспедиционных условий навскидку могу предложить стерильные бутылки с заранее налитым хлороформом, только бутылки взять с прижимной керамической пробкой типа из-под пива Grolsch, проавтоклавировать и, если хотите, сменить прокладку под крышкой. Пробы вливать в бутылки (встряхивание в рюкзаке осуществляется автоматически!), а по возвращении довести экстракцию до конца.
Ну уж такие изыски - скорее всего излишни.
Вроде как и полипропилен - вполне адекватно держит хлороформ время необходимое для транспортировки. Во всяком случае пробовали оставлять экстрагирующую смесь со стандартами в фальконах (50мл) , а потом прогоняли её через всю пробоподготовку и существенных погрешностей от пластика замечено не было. Хотя конечно это был лишь прикидочный тест и со 100% уверенностью - говорить сложно.
petrovich1881
Пользователь
Ранг: 17


07.09.2011 // 22:59:01     
Такой вариант кажется вполне ок, особенно если все ёмкости будут из одной партии, чтобы убрать влияние примесей - шиш его знает, что там может экстрагироваться из полипропилена.
Только что пришло в голову воспоминание насчет обращеннофазовых картриджей Alltech IC-RP. Что если прокачивать через них вашу прудовую предфильтрованную воду, а дома уже отмывать хлороформом севшую на полистирол органику?

  Ответов в этой теме: 5

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты