Форумы ANCHEM.RU: Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно?

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно? >>>

Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно?

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

25.04.2011 // 12:38:10

Столкнулись с проблемами при экстракции вальпроевой кислоты из плазмы крови. Она не вытягивается неполярными растворителями, типа гексана и эфира. Её концентрация в плазме крови очень большая. До 50 мкг/мл. Можно разводить без опасения за чувствительность метода. Вместо экстракции делаем следующее. Плазму крови разводим метанолом 1:10, центрифугируем 13000 rpm, осаждаем белки, супернатант колем напрямую в ГХ-МС (колонка НР-1). Хотелось бы знать, нет ли здесь опасности для колонки. Она неполярная, а в пробе содержится вода - 7-9%.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

DSP007
VIP Member
Ранг: 2228

25.04.2011 // 13:29:14

Редактировано 1 раз(а)

Ну поставьте эту, как ее , предколонку из обломка какой нибудь колонки. Вода HP-1 не страшна, за масс-спектрометр- не ручаюсь. А касательно почему не экстрагируется- дык все сильные органическкие кислоты присутсвуют в организме в виде солей, а вальпроевая вообще сидит на липопротеидах низкой плотности "свесив хвост". Вломите серняшечки или соляночки и будет Вам хорошая экстракция.

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

25.04.2011 // 13:51:28

Редактировано 1 раз(а)

Подкисляли 1 М Н3РО4 - 50/50, после экстрагировали эфиром, гексаном. Очень низкий % экстракции.

Korvet
Пользователь
Ранг: 1114

25.04.2011 // 18:21:38

а ионообменная ТФЭ? а может даже и просто ТФЭ...все таки как вы делалаете не надо лучше, дело не в воде, а в сахарах, минеральных веществах, липидах которые все тоже содержаться в пробе, оседая в лайнере и колонке и ухудшая работу всей системы в целом. может 5-10 вколов ещё ничего сделать, но если на постоянку, я бы поискал другой способ пробоподготовки.

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

26.04.2011 // 10:36:03

Korvet пишет:
а ионообменная ТФЭ? а может даже и просто ТФЭ...все таки как вы делалаете не надо лучше, дело не в воде, а в сахарах, минеральных веществах, липидах которые все тоже содержаться в пробе, оседая в лайнере и колонке и ухудшая работу всей системы в целом. может 5-10 вколов ещё ничего сделать, но если на постоянку, я бы поискал другой способ пробоподготовки.

Спасибо, примерно о таких вещах я и хотел проконсультироваться.

КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306

03.05.2011 // 21:48:30

Гм... странная получилась методика.. лень смотреть на формулу этой кислоты, но и так ясно, что она прекрасно связывается с белком.. в результате целевое удаляется, а грязь селективно остается

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ФГУ «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море»
Федеральное государственное учреждение «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море» создано в соответствии с распоряжением Правительства Российской Федерации и осуществляет свою деятельность на территории Российской Федерации, во внутренних морских водах, территориальном море, в исключительной экономической зоне и на континентальном шельфе Российской Федерации.

Andrew
VIP Member
Ранг: 1370

04.05.2011 // 11:29:46

Высаливание не пробовали? А еще есть неплохой вариант смешивание крови с безводным сульфатом натрия до сыпучего состояния, а потом - извлечение спиртом изи ацетонитрилом. Подробности не помню, давно было. Так, в качестве идеи. Попробуйте поискать публиказии В.В. Зимнухова. Може о что-нить опубликовал из таких вещей.

КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306

04.05.2011 // 12:13:06

Редактировано 1 раз(а)

Только не спиртом, а ацетонитрилом для вэжх или эфиром для гх

я это примерно и имел в виду, Андрей, только ждал сначала реакции) наверное, еще перед этой процедурой надо все хорошенько закислить .. я бы закислил, дальше эту "сыпучку" сделать, экстрагировать эфиром.. можно экстракт пропустить через силикагель на всякий случай.. и колоть..


Ответов в этой теме: 7	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты