| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Проблемы в хроматограммах ВЭЖХ - кто сталкивался. отзовитесь! >>>
|
 |
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
 19.07.2011 // 22:05:01
Уважаемый MeOH! Мы с Вами переписываемся не впервые, Ваши замечания всегда в точку, профессиональны и детальны. И сейчас благодарю Вас за внимание к теме. Виноват: смешал все в кучу, не дав пояснений, поэтому Ваше недоумение вполне объяснимо. Хотел бы пояснить: хроматограммы 1 и 2, 3 и 4, 5 и 6 попарно демонстрируют проблему. Поэтому во времени попарно они практически не разделены, т.е вопрос разрушения колонки вряд ли актуален. Разнобой с объемами таки да, действительно есть, но только в хроматограммах 3 и 4, в остальных по 20 мкл. По поводу площадей, действительно, никак не поменяют настройки приборов, уберя вообще эту злосчастную точку. Режим работы изократический, поэтому вопрос с подвижной фазой, я думаю, отпадает. По поводу давления, действительно, вопрос интересный, надо выяснить. Единственное, что пока не понял по Вашим замечаниям: r&b - что это? и "пробовали сделать в точности так, как указано в EP на октадециле?" Если все-таки у Вас будет время, просмотрите, пожалуйта, хроматограммы попарно. Ваше мнение интересно. В любом случае благодарю за участие в обсуждении |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
20.07.2011 // 11:52:59
Эх скучаю по хроматографии... Ok, посмотрел., нагляднее было бы посмотреть увеличенную базу.. те захватите базовую и до высоты 5mAU и загрузите как указано в инструкции на сайте (кстати вполне понятной). Вопросов много НАПРИМЕР по Lisinoprilу у Agilent 1 даже больше ТТ чем у Instrument 1, АСИММЕТРИЯ!!! у Instrument 1 АНАЛОГИЧНАЯ Agilent 1, что наводит на определенные мысли и требует доп. изучения асимметрия на agilent 1 для Магитрона какая то странная... размечайте пик параллельно или почти параллельно базовой (а не так как в кетотифене-Agilent 1) "Eka, Nino, Khatuna, Nata - интересный контингент., 4 милых хроматографистки на 3-х машинах - r&b прямотаки." - имею ввиду наличия у приборов нескольких операторов., когда к 1 прибору привязан 1 специалист, то ему легче обнаружить проблему (правило 1й руки))). Вообще замечаний по качеству выполнения много, но я позже озвучу, посмотрите для начала давление |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
20.07.2011 // 22:01:04
Редактировано 1 раз(а) Уважаемый MeOH! Во-первых, хочу сообщить, что хроматограмма 3 действительно попала в этот ряд случайно (заметили только благодаря Вашему замечанию). Поэтому даю ссылку на реальную хроматограмму №3 из этого ряда: Теперь по поводу давления и эффективности: Хроматограмма 1 (Agilent3) - ок.204 бар, 12168 ТТ (асимметрия нормальная) Хроматограмма 2 (Agilent1, проблемный) - ок.190 бар, 8725 ТТ (асимметрия выше нормы) Хроматограмма 3 (Agilent2) - ок.148 бар, 9611 ТТ (асимметрия нормальная) Хроматограмма 4 (Agilent1, проблемный) - ок.256 бар, 5392 ТТ (асимметрия выше нормы) Хроматограмма 5 (Agilent3) - ок.118 бар, 6512 и 5087 ТТ (асимметрия нормальная у первого пика и так себе у второго) Хроматограмма 6 (Agilent1, проблемный) - ок.110 бар, 6725 и 5591 ТТ (асимметрия выше нормы у обоих пиков) Т.е. проблема в Agilent1 все-таки из-за детектора, или где-то все-же течь? Какое Ваше мнение? |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
20.07.2011 // 22:27:02
Вас самих не смущает ничего? Одна и та же колонка, все то же, а давления везде разные- да еще не просто разные- от 204 до 110 атм. Как такое возможно? ППЦ... |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
20.07.2011 // 23:29:58
Уважаемый Serga! Сравнения возможны только попарные: 1 со 2, 3 с 4, 5 с 6. В том и дело, что смущает: что происходит с прибором Agilent 1? В чем причины изменения форм пиков, асимметрии выше нормы в работах именно на этом приборе? То ли детектор, то ли течи, может другие причины? Поэтому и обратился на форум.Буду благодарен за любые советы, идеи, пояснения и проч. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
21.07.2011 // 5:23:17
Редактировано 1 раз(а) Как прикажете сравнивать 148 и 256 бар? Так сколько на самом деле колонок и составов элюентов (анализов)- один или два? Почему сравнивать надо "попарно", если колонка и элюент одинаковые? Для чего вы таскаете одну и ту же колонку по трем приборам? Я извиняюсь, там у вас есть чел с опытом работы в ВЭЖХ? |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
21.07.2011 // 5:55:42
Дайте по рукам тому, кто у вас прикручивает колонки в систему. Наверняка соединения уже изношены, капилляры завальцованы или смяты, а гайки не обломались только благодаря случайности. Если трубопроводы пластиковые- могли "забыть" конус внутри фиттинга и потом полезли с еще одним конусом- отсюда мертвые объемы и прочие прелести. Аккуратней надо быть. Кто там из ваших четырех дев крутит девайс? (вопрос риторический- нет там никиких дев, просто кто-то извращается  Я знал одну такую- по счастью, с горизонта исчезла- сворачивала бошки гайкам- только так. А прокладку испарителя так затягивала, как я колесные болты не прикручиваю. Разумеется, переломала все шприцы. Ей бы сваи забивать, а не около ВЭЖХ толкаться). Потом, довольно странно, что вы пытаетесь решить проблему через форум. Имея минимум 3 девайса, неплохо бы и спеца прикупить к ним. Если вы нищие, так хотя бы пригласите его на консультацию. Много времени ему не понадобится, чтоб разобраться, откуда растут уши у ваших проблем. |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
21.07.2011 // 10:29:16
Редактировано 1 раз(а) Что же касается Уважаемый Serga! В переписке с Вами у нас некоторое недопонимание: 1) хроматограммы 1 и 2 - одна и та же работа, перенесенная с прибора на прибор: Колонка Luna C18 (250x4,6), др. условия см. на хроматограмме 2) хроматограммы 3 и 4 - одна и та же работа (но другая по отношению к 1 и 2), перенесенная с прибора на прибор: Колонка Varian C8(125x4,6), др. условия см. на хроматограмме 3) хроматограммы 5 и 6 - одна и та же работа (но третья по отношению к 1 и 2 и 3и 4), перенесенная с прибора на прибор: Колонка Luna C8 (2) (250x4,6), др. условия см. на хроматограмме Что же касается 148 и 256 бар, действительно, пытаемся выяснить, в чем причина. Образцы же мы,по Вашему меткому выражению "таскаем" с прибора на прибор, т.к. в приборе Agilent 1 стабильная проблема, которую все-таки упорно ищем. Что же о Вашем вопросе, есть ли человек с опытом работы на ВЭЖХ, то вопрос мне вообще непонятен. Но потытаюсь ответить как разумею, уж не взыщите. Если Вы мне покажете ВУЗ на просторах нашей бывшей необъятной Родины (СССР), который готовит ВЭЖХ хроматографистов нормального уровня, я был бы Вам весьма признателен. Все специалисты, работающие в лаборатории - химики с университетским образованием, но ВЭЖХ все учились самостоятельно, каждый своим путем (как, я думаю, и другие ВЭЖХ хроматографисты). Безусловно, пробелы в знаниях есть, которые люди упорно заполняют. По поводу Ваших следующих замечаний дам ответ в следующем постинге. С уважением |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1071 |
21.07.2011 // 10:43:02
Уважемый Serga! Конечно, в Вашем ответе я отделил зерна от плевел, и благодарю Вас, т.к. зерна весьма ценные, все будет проверяться весьма тщательно. По поводу "нищие" хотел бы заметить, что нищие не имеют 4 прибора Agilent. Что же по поводу "прикупить спеца" или пригласить, есть, но человек, который тоже не знает все и не может знать, хотя юноша весьма толковый, но тоже продолжает учиться (предыдущий мой постинг по поводу подготовки ВЭЖХ специалистов). и Вышел я на форум с проблемой, во-первых, потому, что в своем круге решить проблему пока не удается; во-вторых, потому что обсуждаемая тематика не противоречит правилам форума и в-третьих, потому что, мне кажется, тема не менее интересна, чем другие, обсуждаемые на форуме. Благодарю Вас за участие в обсуждении С уважением |
||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
21.07.2011 // 15:41:24
Редактировано 1 раз(а) С первой и третьей колонками Агилент 1 ваш отработал по давлению нормально (значит, с насосом у него как минимум все в порядке). Тогда возникает вопрос- почему на второй колонке давление так резко отличается? Вы колонки перетаскиваете с их предколонками или там вообще нет предколонок (или предколонки торчат у "своих приборов")? Рассмотрите в увеличит стекло состояние конца капилляра, к которому прикручиваете колонку (или предколонку) у Агилента 1. Что там с ним? Где-то в системе имеется плохо промываемый мертвый объем. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
