| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Два пика одного вещества на хроматограмме >>>
|
 |
| Автор | Тема: Два пика одного вещества на хроматограмме | |||||
|
IGB Пользователь Ранг: 9 |
 30.10.2011 // 12:41:55
При подборе ВЭЖХ методики для вещества, которое содержит кислотные и щелочные группы, получаем или один ассиметрический пик, или два симметрических хорошо разделенных пика. Можно ли использовать один из двух пиков вещества в количественных расчетах? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
30.10.2011 // 18:15:06
1. Если это две "разных формы" одного и того же соединения, то можно использовать суммарную площадь двух пиков, если при этом метролог. хар-ки методики будут удовлетворительными. Как правило, такие системы крайне нестабильны, т.е. у Вас будет постоянно болтаться разрешение между этими пиками, плюс их время удерживания и т.д. Плюс, при наличии двух пиков, вместо одного, у Вас снижается селективность аналитической системы и соотв. увеличивается вероятность ложноположительной идентификации и соотв. кривых результатов колич. анализа. В общем, по этим и другим причинам, такие системы стараются избегать. 2. Если есть подозрения, что один из двух пиков никакого отношения к аналиту не имеет, то - нет. 3. По-хорошему, Вам нужно добиться, чтобы пик аналита был один и его форма и т.д. были удовлетворительными. |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
31.10.2011 // 11:11:48
А простой тест колонки, скажем нафталин в 60%-ном ацетонитриле (конечно, если у Вас обращенная фаза) показывает один симметричный пик? Может просто колонка просела? |
|||||
|
AA_Alex Пользователь Ранг: 372 |
31.10.2011 // 12:46:39
Уточните - вещество, детектор, подвижная фаза, колонка и т.д. А то вопрос получается какой-то абстрактный. Я бы ответил - нельзя. Скорее всего у вас какой-то "косяк". |
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
31.10.2011 // 17:54:50
Редактировано 1 раз(а) Пожалуйста подробнее. Случаи хорошего разделения двух форм довольно редки и тем интересны. Что за вещество, условия разделения? |
|||||
|
IGB Пользователь Ранг: 9 |
01.11.2011 // 23:43:47
Редактировано 1 раз(а) Вещество – пикосульфат натрия. Колонка C18. УФ детектор. Подвижная фаза фосфатный буфер с 2 % тетрагидрофурана и ацетонитрил. При рН в диапазоне 2,9 – 8,5 и содержании ацетонитрила менее 10 % либо раздвоенный пик, либо два хорошо разрешенных (один виходит вместе с мертвым объемом). Другой воспроизводится с RSD 0,7 %. Симметрия двух пиков более 0,9 получается при рН 2,9. При увеличении ацетонитрила до 15 % получаем один симметрический пик вместе с мертвым объемом, что не есть хорошо. С колонкой все нормально, другие анализы идут без проблем. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Дмитрий (anchem.ru) Администратор Модератор форума Ранг: 4445 |
01.11.2011 // 23:53:10
Редактировано 3 раз(а)  |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
02.11.2011 // 10:59:40
А как Вы определили, что пик, выходящий с мертвым объемом - ваше вещество? Какой у Вас k' второго пика? Минимальный, как я понимаю, около 0. А максимальный? |
|||||
|
IGB Пользователь Ранг: 9 |
02.11.2011 // 13:22:18
Редактировано 1 раз(а) k' первого пика 0,15, второго 1,15. Коэф. разделения 18. Второй пик занимает 65 % от общей площади. Вещество одно, т.к. примеси в таких количествах вряд ли могут присутствовать в фарм. субстанции. Насколько обоснованно можно использовать только один пик для количественных расчетов, если это методика анализа лекарственного препарата? Эксперты не заругают? |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
02.11.2011 // 14:49:45
1. Да, данный аналит, может при определенных условиях выходить двумя (и более) пиками, тут многое зависит от ситуации и т.д. Например, наблюдал такое поведение (ОФ ВЭЖХ) у молекул с двумя (и более) карбоксильными, сульфо- и т.д. группами (CxHyOzSg). Связано это с составом элюента и составом растворителя для сэмпла. 2. Методика, на мой взгляд, "кривая". Фармакопея? Сэмпл растворяйте в элюенте. 3. Действуйте согласно нормативной документации, т.е. если второй пик удовлетв. нормативам, то работайте с ним. 4. Первый пик, с большой вероятностью, никакого отношения к аналиту не имеет. Особенно, если Вы работаете не со стандартом. В общем, по-хорошему, нужно доказать, кто есть кто. Например, банально, сравнить УФ-ВИД спектры или спектральные отношения двух пиков. Если есть стандарт, то... |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
02.11.2011 // 14:53:55
Редактировано 2 раз(а) Примите во внимание следующие соображения. Я ни в коем случае не настаиваю на их выполнении, в конце концов это Ваша работа. 1. На k' ~ 1 стараются не работать. Оптимально при 3 - 5, тогда более или менее видны близкие примеси. 2. Первый пик может быть примесью. Не в Вашем веществе, а в воде, ацетонитриле, соли, или каком-то еще из компонентов растворителя Вашего образца. Кололи ли вы растворитель без образца? Кстати, первый пик может быть просто разницей в коэффициенте преломления из-за отличия состава растворителя образца от состава подвижной фазы. Некоторые ячейки УФ детекторов реагируют на это отличие из-за отражения луча от стенок ячейки. ЗЫ virtu как всегда опередил... Молодой, быстрый...  Но - присоединяюсь!
|
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
