| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ТСХ: допустимое расхождение значения Rf >>>
|
 |
| Автор | Тема: ТСХ: допустимое расхождение значения Rf | |||||
|
nestorchik Пользователь Ранг: 32 |
 12.03.2012 // 20:37:35
Уважаемые спецы по ТСХ, помогите! Подскажите, пожалуйста, прописано где-нибудь или нет, насколько допустимо расхождение значения Rf одного и того же вещества для разных пластинок (одной и той же фирмы-производителя). К моему большому стыду, не очень часто тонкослойкой пользуемся, вот тонкостей-то и не знаем. А в фармакопее не все прописано. Заранее спасибо. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
12.03.2012 // 21:59:11
Значение Rf может меняться и значительно. Сам сталкивался с разными значениями Rf на хроматограммах полученных зимой и летом. А вообще-то какая разница какое значение Rf? Если у Вас фармакопейный анализ, то скорее всего идентификация идет не по значению Rf, а по положению пятна на хроматограмме испытуемого раствора по отношению пятна на хроматограмме РСО. Кроме того, есть тест "проверка пригодности хроматографической системы". И критерием валидности полученных результатов является выполнение этого теста, а не величина Rf. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
13.03.2012 // 1:18:10
Редактировано 1 раз(а) Значение Rf сильно зависит от влажности воздуха, температуры и, в меньшей степени, от атмосферного давления. При желании можете построить таблицы величины Rf от любого из этих показателей. Плюс, состав подвижной фазы нужно строго контролировать. Иногда +\- 100 мкл какого-нибудь компонента и картинка может сильно измениться. Не стоит забывать и о том, что эффективность разделения может варьировать от партии к партии пластинок. Кстати, первую пластинку в коробке лучше сразу выкидывать  В общем, пляски с бубном ) Ну и всегда следует наносить стандарты без них аналитическая ТСХ лишена смысла. Хотя, я уже наизусть выучил поведение различных фракций в разных подвижных фазах, и стандартами не пользуюсь.
|
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
13.03.2012 // 11:48:56
Для того, чтобы стандартизировать Rf нужно стандартизировать условия проведения анализа. Т.е. даже если в Фармакопее не написано черным - по - белому, Вы должны каждый раз выполнять манипуляции с пластинками одни и те же принимая во внимание температуру в комнате и влажность воздуха. Поэтому нужно либо активировать пластинки в термошкафу одно и то же время , либо выдерживать пластинки в кондиционирующем боксе, имеющим поддерживаемую на одном уровне влажность. НО!!!! Чтобы не заморачиваться всем этим, лучше нанесите рядышком РСО. Ну и потом, Вы должны помнить о краевом эффекте. Так что лучше наносить РСО и тестовый раствор рядом. |
|||||
|
АМД Пользователь Ранг: 184 |
13.03.2012 // 12:15:45
Даже если бы в Фармакопее были указаны допуски на Rf для вещества все равно исследование без нанесенного рядом стандарта не имело бы никакого значения. У нас есть очень стандартизированная американская ТСХ система TOXI LAB, так там корректировка Rf для разных серий пластин проводится изменением количества добавляемого аммиака и даже изменение его количества на 2 мкл имеет значение. И даже с учетом этой коррекции приведены допуски для Rf, например для морфина допуск 0,20-0,35, для кодеина 0,35-0,55, для каннабиноловой кислоты 0,46-0,86, но ТОЛЬКО с веществом сравнения, которое нанесено рядом. |
|||||
|
nestorchik Пользователь Ранг: 32 |
13.03.2012 // 20:22:06
Спасибо большое за совет! Работаем мы, конечно, с СО и проверку на пригодность проводим, но такую роскошь, как первую пластинку выбросить, позволить себе не можем. Дело в том, что мы участвуем в конкурсе межлабораторном, в отчете на вопрос о соответствии зоны стандарта и образца достаточно указать полученное нами значение Rf или оно обязательно должно соответствовать какому-то стандартному значению (но таковое отсутствует в монографии)? И еще: если просят указать время высушивания пластины после нанесения образцов, достаточно ли просто отписаться фразой "До полного испарения растворителя" (как прописано в Фармакопее) или указание точного времени в мин обязательно? Если у кого-то есть опыт в заполнении таких отчетов, подскажите, пожалуйста.))) |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
13.03.2012 // 22:33:45
, если выкидывать жалко, то промывайте пластинки смесью метанол:хлороформ 50:50, после чего сушите и активируйте. Хотя, опытные коллеги считают, что активирование пластинки только усугубляет положение и лучше работать с пластинкой, которая находится в равновесии с окружающей средой, т.е. после промывки пластинки её лучше просто подержать в защищённом от пыли шкафу пару суток и работать. Мой скромный опыт аналитической и препаративной тонкослойной хроматографии подсказывает мне тоже самое. |
|||||
|
АМД Пользователь Ранг: 184 |
14.03.2012 // 22:23:07
В инструкции к Сорбфилу рекомендуется промывка ацетоном. Выбрасывать конечно же не нужно, там только верх получается "порченым". Сорбфил на пластике, а также пластины на стеклянной подложке после использования можно отмывать, погружая в хромовую смесь на 0,5-3 часа, затем промывка водой и выдержка в воде, затем промывка ацетоном и активирование. Раньше сами так делали. Пластину можно было использовать 4-6 раз. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
15.03.2012 // 0:49:52
, Sorbfil — зло. Неприемлемо высокий % брака на пластинках 
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 8 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
