Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

определение окситетрациклина гидрохлорида >>>

  Ответов в этой теме: 17
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: определение окситетрациклина гидрохлорида
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16

15.03.2012 // 16:36:19     
Редактировано 1 раз(а)

здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
El Comandante
Пользователь
Ранг: 88


15.03.2012 // 16:44:46     

Tanya L пишет:
здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.


Увеличить содержание органического компанента в подвижной фазе пробовали?
Посмотрите что получится и сообщите.
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


15.03.2012 // 16:52:06     

El Comandante пишет:

Tanya L пишет:
здравствуйте. работаю на хроматографе LC 5000. раньше работала на колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18, 4.6x150 mm, 5 µm. сейчас поставили Separon SGX c-18, 4x150mm, 5 µm. теперь не могу подобрать методику для Окситетрациклина. на зорбаксе использовали ПФ 13% ацетонетрила Х 87% буфера, длинна волны 350нм, температура 30. рН буфера 3,0. на новой колонке пик не выходит.
может кто-то подскажет решение проблемы.
заранее спасибо.

Увеличить содержание органического компанента в подвижной фазе пробовали?
Посмотрите что получится и сообщите.

беру навеску в 20мг и растворяю в 50 мл ПФ. это конц 0,4 мг/мл. еще увеличить?
El Comandante
Пользователь
Ранг: 88


15.03.2012 // 16:56:12     
Я имею в виду содержание ацетонитрила в подвижной фазе. Возьмите 50/50, посмотрите, выходит ли пик, потом, откорректируйте соотношение для получения необходимого времени удерживания.
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


15.03.2012 // 16:57:54     
меняла, начала от 5%, прогнала до 20 %, буду пробовать дальше
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


03.04.2012 // 10:40:16     
выходит на 50% Ацетонетрила/ 50 % Буфер на 3-4 минуте, но очень затянут хвост (аж до 6 мин),
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Пипетки Пастера Пипетки Пастера
Пластиковые пипетки Пастера предназначены для переноса, дозирования жидкостей, пипетирования, а также для хранения и транспортировки жидких биообразцов и реактивов.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
El Comandante
Пользователь
Ранг: 88


03.04.2012 // 11:08:01     

Tanya L пишет:
выходит на 50% Ацетонетрила/ 50 % Буфер на 3-4 минуте, но очень затянут хвост (аж до 6 мин),

Теперь увеличте содержание буффера до 70%. Проверьте рН элюента, возможно надо чуть подкислить чтобы не хвостило
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


03.04.2012 // 11:19:56     
Редактировано 2 раз(а)

рН буфера 3. сейчас попробую до 70% поднять
еще проблема высота и площадь пика возрастают. площадь 1 укол - 0,1234, 2-0,1488, 3-0,1623
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


03.04.2012 // 13:08:06     
поменяла на 70%. время выхода почти не изменилось, но показатели площади более стабильны, растут, но не сильно. также ув число теор тарелок
El Comandante
Пользователь
Ранг: 88


03.04.2012 // 13:19:26     

Tanya L пишет:
поменяла на 70%. время выхода почти не изменилось, но показатели площади более стабильны, растут, но не сильно. также ув число теор тарелок

Теперь поднимите до 77% буффера и доведите рН буффера до 2,5(хуже не будет, только хвостить возможно меньше будет). Время выхода должно возрасти. Ну и побольше промывайте колонку между заколами. А вообще возьмите учебник по хроматографии и почитайте - разберитесь что к чему. Хотя может оно вам и не надо.
Tanya L
Пользователь
Ранг: 16


03.04.2012 // 13:26:04     
Редактировано 1 раз(а)

учебники по хроматографии читала. со старой колонкой (зорбакс)проблем не было я ее "понимала", а с этой 2 недели уже общий язык ищу. со всех препаратов (попробовала уже 10 штук) проблема только с Окситетрациклином. вот и пришлось искать помощи у более опытных

  Ответов в этой теме: 17
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты