Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 4. Химический форум ...
  4. Химический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс >>>

  Ответов в этой теме: 2

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс
ecochem
Пользователь
Ранг: 4

21.03.2012 // 12:46:25     
Коллеги есть ворос. В задачах исследования стоит анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс. Большая просьба, может быть кто-то работал с этим объектом. В чем особенности по экстракции, очистке, системах растворителей по ТСХ. Методика по человеку есть, но не смотря на то что крыса - млекопитающее, могут быть специфичные компоненты которые мешают хроматографическому разделению фракций. Так в первых опытах нейтральные и фосфолипиды тянуться полоской. Может быть кто-то это делал и может подсказать? Заранее спасибо.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Garry
VIP Member
Ранг: 1075


21.03.2012 // 16:25:10     

ecochem пишет:
Коллеги есть ворос. В задачах исследования стоит анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс. Большая просьба, может быть кто-то работал с этим объектом. В чем особенности по экстракции, очистке, системах растворителей по ТСХ. Методика по человеку есть, но не смотря на то что крыса - млекопитающее, могут быть специфичные компоненты которые мешают хроматографическому разделению фракций. Так в первых опытах нейтральные и фосфолипиды тянуться полоской. Может быть кто-то это делал и может подсказать? Заранее спасибо.

Экстракция однозначно смесью Фолча, затем промывка 0,74 % хлоридом калия и упаривание , желательно в токе азота или в вакууме, чтобы предотвратить окисление липидов.
Далее по ТСХ.
Для нейтральных липидов н-гексан : диэтиловый эфир:СН3СООН
35:15:1.
Для фосфолипидов рекомендую сначала пластинку импрегнировать борной кислотой (смочить в 4 % растворе борной кислоты в этаноле, а затем высушить и активировать в сушильном шкафу как обычно). ПФ хлороформ : метанол : вода (50:40:4), можно попробовать и стандартную хлороформ : метанол : вода (65:34:1).- зависит от пластинок. Первая подходит для Сорбфилов, вторая для Мерка и Силуфола.

Проявитель: 10 % фосфорно-молибденовая кислота в этаноле
Условия проявления: прогрев при 120 С в течение 15 мин.

Я раствором не опрыскиваю, а окунаю в раствор на пару секунд, и высушиваю феном. Есть такая технология dipping, чтобы можно было получить нормальные количественные результаты. Иначе все будет "в дырочку", если пульверизатором
ecochem
Пользователь
Ранг: 4


22.03.2012 // 10:59:44     
Большое спасибо коллега!
Чувствуется что вы как говорится "в теме" и занимаетесь этим давно. Эти условия вы пробовали на крысах? Если не секрет в каком заведении работаете? Мы аспиранты Курского госмедуниверситета кафедры биологии, медицинской генетики и экологии.

  Ответов в этой теме: 2

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты