Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Извлечение вещества из плазмы крови (разрушение связи с белками) >>>

  Ответов в этой теме: 12
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Извлечение вещества из плазмы крови (разрушение связи с белками)
rezvan e
Пользователь
Ранг: 43

11.12.2013 // 15:14:19     
Добрый день!
Подскажите пожалуйста, реагент для разрушения связи белков плазмы крови с определяемым веществом.
Пробовали трихлоруксусную кислоту, данный вариант не подошел из-за разложения определяемого вещества в кислой среде.

Заранее благодарю!
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
chemist-sib
Пользователь
Ранг: 544


11.12.2013 // 16:12:00     
А попробуйте избыток ацетона (или ацетонитрила) как денатурирующий агент. Физиологический уровень рН плазмы остается неизменным. А уж потом можно и экстрагировать (после разбавления), или упарить водно-ацетоновый (водно-ацетонитрильный) центрифугат. Сравнивал как-то подобные подходы -ацетоновый и осаждение белков ТХУ-кислотой) - применительно к пиразинамиду в цельной крови: ацетоновый оказался гораздо "выХоднее".
Вирус
Пользователь
Ранг: 601


11.12.2013 // 22:11:47     
А вещество - секрет? Может есть литература уже готовая.
rezvan e
Пользователь
Ранг: 43


12.12.2013 // 6:10:47     
Редактировано 2 раз(а)


Вирус пишет:
А вещество - секрет? Может есть литература уже готовая.
Литературы по данному веществу нет. Мы разрабатываем новую лекарственную субстанцию.
Могу сказать, что молекула действующего вещества нейтральная и предположительно очень сильно связывается с белком плазмы крови.
Вирус
Пользователь
Ранг: 601


12.12.2013 // 16:58:26     
Редактировано 1 раз(а)

Ну если так сильно связывается с белками крови, то как оно(в-во) будет воздействовать на свою мишень? Или мишень - белки крови? Даже если 99% в-ва связывается - то 1 % - можно изолировать.

ЗЫ: напоминает полигуанидины - анализировать в биожидкостях и тканях организма практически невозможно. Ибо устанавливается "мёртвая" связь с белками. И обнаружить полигуанидины можно только вне организма - "in vitro".
нейтральную молекулу можно изолировать. Если знать в чём она растворяется. А может в органике она и не растворяется? Есть и другие методы...
rezvan e
Пользователь
Ранг: 43


13.12.2013 // 6:22:19     
Редактировано 2 раз(а)


Вирус пишет:
Ну если так сильно связывается с белками крови, то как оно(в-во) будет воздействовать на свою мишень? Или мишень - белки крови? Даже если 99% в-ва связывается - то 1 % - можно изолировать.

Вещество заявлено как противоязвенное. и определять его надо в крови уже после метаболизма.
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Лаборатория аналитического контроля ЗАО Лаборатория аналитического контроля ЗАО "РРЭЦ"
Проведение количественного химического анализа проб грунтового воздуха с территории распространения техногенных газогенерирующих грунтов газохроматографическим способом
Вирус
Пользователь
Ранг: 601


14.12.2013 // 14:54:34     
Редактировано 1 раз(а)

Есть же и ферментный гидролиз и щелочной. А не только кислотный. Почитайте 4 Кларка например, литературы много.....
ATem
Пользователь
Ранг: 655


14.12.2013 // 15:15:25     
Кстати да. Бета-глюкуронидаза. Как раз работает при рН 6-6.5 (наибольшая активность, точнее). Ферментативный гидролиз сейчас очень широко применяется...
chemist-sib
Пользователь
Ранг: 544


14.12.2013 // 15:39:27     
Редактировано 1 раз(а)

И кстати, не только глюкуронидаза как гидролизующий фермент, применяется. Тут некоторые наши коллеги использовали целый гидролизующий "коктейль" (или "ерш" - без разницы) - может, что сгодится:
Стрелова О.Ю., Чувина Н.А. Изолирование кофеина из крови с применением ферментативного гидролиза на примере модельного вещества. – Суд.-мед. эксперт.-2008.-№ 4.-С.28-31. Список лит.: С.30-31 (9 названий).
Стрелова О.Ю., Чувина Н.А. Оценка эффективности методов изолирования токсических веществ из крови. – Суд.-мед. эксперт.-2008.-№ 3.-С.22-24. Список лит.: С.24 (9 названий).
(похоже, кто-то из авторов диссер делал - можно еще покопаться по работам...)
ATem
Пользователь
Ранг: 655


14.12.2013 // 16:09:28     
Скажите пожалуйста, а расщепление белков не приведет к тому, что в конечном экстракте окажется больше побочных продуктов, полученных в ходе гидролиза? Все-таки глюкуронидаза селективна... Хотя вариант интересный, надо почитать подробнее
chemist-sib
Пользователь
Ранг: 544


14.12.2013 // 16:16:19     
А вот ХЗ... Селективность-то глюкуронидазы только к глюкуронидам и относится. А связи с альбумином и прочими пептидами чем рушить?

  Ответов в этой теме: 12
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты