| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Извлечение вещества из плазмы крови (разрушение связи с белками) >>>
|
 |
| Автор | Тема: Извлечение вещества из плазмы крови (разрушение связи с белками) | ||
|
rezvan e Пользователь Ранг: 43 |
 11.12.2013 // 15:14:19
Добрый день! Подскажите пожалуйста, реагент для разрушения связи белков плазмы крови с определяемым веществом. Пробовали трихлоруксусную кислоту, данный вариант не подошел из-за разложения определяемого вещества в кислой среде. Заранее благодарю! |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
chemist-sib Пользователь Ранг: 560 |
 11.12.2013 // 16:12:00
А попробуйте избыток ацетона (или ацетонитрила) как денатурирующий агент. Физиологический уровень рН плазмы остается неизменным. А уж потом можно и экстрагировать (после разбавления), или упарить водно-ацетоновый (водно-ацетонитрильный) центрифугат. Сравнивал как-то подобные подходы -ацетоновый и осаждение белков ТХУ-кислотой) - применительно к пиразинамиду в цельной крови: ацетоновый оказался гораздо "выХоднее". |
||
|
Вирус Пользователь Ранг: 601 |
11.12.2013 // 22:11:47
А вещество - секрет? Может есть литература уже готовая. |
||
|
rezvan e Пользователь Ранг: 43 |
12.12.2013 // 6:10:47
Редактировано 2 раз(а) Литературы по данному веществу нет. Мы разрабатываем новую лекарственную субстанцию. Могу сказать, что молекула действующего вещества нейтральная и предположительно очень сильно связывается с белком плазмы крови. |
||
|
Вирус Пользователь Ранг: 601 |
12.12.2013 // 16:58:26
Редактировано 1 раз(а) Ну если так сильно связывается с белками крови, то как оно(в-во) будет воздействовать на свою мишень? Или мишень - белки крови? Даже если 99% в-ва связывается - то 1 % - можно изолировать. ЗЫ: напоминает полигуанидины - анализировать в биожидкостях и тканях организма практически невозможно. Ибо устанавливается "мёртвая" связь с белками. И обнаружить полигуанидины можно только вне организма - "in vitro". нейтральную молекулу можно изолировать. Если знать в чём она растворяется. А может в органике она и не растворяется? Есть и другие методы... |
||
|
rezvan e Пользователь Ранг: 43 |
13.12.2013 // 6:22:19
Редактировано 2 раз(а) Вещество заявлено как противоязвенное. и определять его надо в крови уже после метаболизма. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Вирус Пользователь Ранг: 601 |
14.12.2013 // 14:54:34
Редактировано 1 раз(а) Есть же и ферментный гидролиз и щелочной. А не только кислотный. Почитайте 4 Кларка например, литературы много..... |
||
|
ATem Пользователь Ранг: 655 |
14.12.2013 // 15:15:25
Кстати да. Бета-глюкуронидаза. Как раз работает при рН 6-6.5 (наибольшая активность, точнее). Ферментативный гидролиз сейчас очень широко применяется... |
||
|
chemist-sib Пользователь Ранг: 560 |
14.12.2013 // 15:39:27
Редактировано 1 раз(а) И кстати, не только глюкуронидаза как гидролизующий фермент, применяется. Тут некоторые наши коллеги использовали целый гидролизующий "коктейль" (или "ерш" - без разницы) - может, что сгодится: Стрелова О.Ю., Чувина Н.А. Изолирование кофеина из крови с применением ферментативного гидролиза на примере модельного вещества. – Суд.-мед. эксперт.-2008.-№ 4.-С.28-31. Список лит.: С.30-31 (9 названий). Стрелова О.Ю., Чувина Н.А. Оценка эффективности методов изолирования токсических веществ из крови. – Суд.-мед. эксперт.-2008.-№ 3.-С.22-24. Список лит.: С.24 (9 названий). (похоже, кто-то из авторов диссер делал - можно еще покопаться по работам...) |
||
|
ATem Пользователь Ранг: 655 |
14.12.2013 // 16:09:28
Скажите пожалуйста, а расщепление белков не приведет к тому, что в конечном экстракте окажется больше побочных продуктов, полученных в ходе гидролиза? Все-таки глюкуронидаза селективна... Хотя вариант интересный, надо почитать подробнее 
|
||
|
chemist-sib Пользователь Ранг: 560 |
14.12.2013 // 16:16:19
А вот ХЗ... Селективность-то глюкуронидазы только к глюкуронидам и относится. А связи с альбумином и прочими пептидами чем рушить? |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
