Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Carry over в вэжх мсмс >>>

  Ответов в этой теме: 11
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»
[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Carry over в вэжх мсмс
Билли
Пользователь
Ранг: 9

 		05.03.2014 // 12:53:05     
Уважаемые форумчане!
Вопрос: имеется вэжх мсмс система (аджилент плюс АБсцаекс)
есть вещество по структуре производное имидазола, молекула симметрична, так же имеет амидные группы, растворимо в воде.
Занимаемся им несколько недель и всё время одно и тоже - во вколе чистого ацн видим вещество по площади пика чуть меньшее чем во вколе 1 нг/мл
в чём может быть проблема?
использовали хилик, с4, с8, с18, амид фазы везде одно и тоже
меняли седло, иглу, все трубочки
измаялись
спасибо!
ANCHEM.RU
 Администрация
Ранг: 246
virtu
VIP Member
Ранг: 2134
05.03.2014 // 14:20:30     
1. Промывочная жидкость АС. Параметры промывки. Бывает, над этим пунктом приходится очень долго ковыряться.

2. Элюент. Хром. система.

3. Мертвый объем в инжекторе.
Билли
Пользователь
Ранг: 9
05.03.2014 // 14:51:38     
virtu пишет:
1. Промывочная жидкость АС. Параметры промывки. Бывает, над этим пунктом приходится очень долго ковыряться.

2. Элюент. Хром. система.

3. Мертвый объем в инжекторе.

1 промывочная жидкость 25 метанол 25 вода 25 ацн 25 изопропанол и все подкисленно муравьиной кислотой, менали на чистый ацн, вода-ацн 50-50, 10% ацн - не заметили разницы

2 элюент 10мМ формиат аммония, ацн 0,1% муравьиная кислота, система 1290

3 мертвый объем не знаю как считать

с уважением
Билли
Пользователь
Ранг: 9
05.03.2014 // 14:54:42     
virtu пишет:
Параметры промывки.

Прмывали по разному, всегда игла снаружи 5-30 с
противоток на седло 5 с
игла внутри ацн, ацн-вода, вода
итог ничего
metrim
Пользователь
Ранг: 646
05.03.2014 // 20:50:21     
Такого же плана фигня наблюдается. А МС/МС кстати какая?
Градиент не используете?
Пик в заколе растворителя на том же месте что и в образце?
ATem
Пользователь
Ранг: 655
05.03.2014 // 21:40:51     
Может дело в реактивах? Какая квалификация реагентов? Вода, кислота, ацетонитрил? При таких концентрациях любая грязь может дать фон. Работаете в MRM, так ведь? Сколько переходов? Соблюдаются ли абсолютные отношения интенсивностей между переходами?
Каталог ANCHEM.RU
 Администрация
Ранг: 246
Эконова, ЗАО Институт хроматографии Эконова, ЗАО Институт хроматографии
Новосибирское ЗАО Институт хроматографии «ЭкоНова» производит микроколоночные жидкостные хроматограф «Милихром® А-02» и «Альфахром»— уникальные приборы экспертного класса для проведения химического анализа.
virtu
VIP Member
Ранг: 2134
06.03.2014 // 17:42:33     
Редактировано 1 раз(а)

Билли пишет:1 промывочная жидкость 25 метанол 25 вода 25 ацн 25 изопропанол и все подкисленно муравьиной кислотой, менали на чистый ацн, вода-ацн 50-50, 10% ацн - не заметили разницы
Попробуйте по отдельности в указанном порядке: MeOH, 0.1-0.2%v AcOH in MeOH, 0.1-0.05w% NH3 in MeOH. Поиграйтесь с временем промывки и т.д.

Билли пишет:3 мертвый объем не знаю как считать
В данном случае имелся ввиду непромываемый/трудновымываемый объем, т.е. какая-либо трещина, полость и т.д.
И еще, если отмоетесь, постарайтесь ограничиться 100-500нг/мл (аналит) при инжекциях. Более точно этот потолок надо экспериментально подбирать.

Вы наверно, когда начинали, кололи относительно большие концентрации, если это действительно так - постарайтесь заменить все части в инжекторе (помимо тех, которые уже заменили), с которыми контактировала инжектируемая жидкость (если не отмоетесь). Да, это хардкор, но это реально помогает, сам через такое проходил.
khrushh
Пользователь
Ранг: 70
19.03.2014 // 13:54:35     
Попробуйте имитировать вкол. Т.е. запустите градиент, но ничего не закалывайте, возможно просто вещество неспецифически сорбировалось на колонке и просто каждый раз вымывается градиентом. Если дело в инжекторе, то пика понятное дело не будет.
Билли
Пользователь
Ранг: 9
25.03.2014 // 11:28:31     
Попробуйте имитировать вкол. Т.е. запустите градиент, но ничего не закалывайте, возможно просто вещество неспецифически сорбировалось на колонке и просто каждый раз вымывается градиентом. Если дело в инжекторе, то пика понятное дело не будет.

+++
спасибо большое всем!
дело было в сорбции на колонке из за неподходящего рН
точнее при этом рН и градиенте подходило всё, кроме карри овера
подвижную фазу пощелочили аммиаком до рН=8 и карри овер исчез
Билли
Пользователь
Ранг: 9
25.03.2014 // 11:30:18     
metrim пишет:
Такого же плана фигня наблюдается. А МС/МС кстати какая?
Градиент не используете?
Пик в заколе растворителя на том же месте что и в образце?

мсмс - АБСцаекс 5500
градиент НФ
пик в заколе на том же месте
Билли
Пользователь
Ранг: 9
25.03.2014 // 11:31:45     
ATem пишет:
Может дело в реактивах? Какая квалификация реагентов? Вода, кислота, ацетонитрил? При таких концентрациях любая грязь может дать фон. Работаете в MRM, так ведь? Сколько переходов? Соблюдаются ли абсолютные отношения интенсивностей между переходами?

с реактивами строго, вода деионизированная, все остальное мс грэйд
в регистрации дочек, 2 перехода, соотношения интенсивностей сохранялись

  Ответов в этой теме: 11
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему

ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»
Размещение рекламы / Контакты