Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Отклик янтарной кислоты в ВЭЖХ DAD >>>

  Ответов в этой теме: 10

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Отклик янтарной кислоты в ВЭЖХ DAD
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37

04.09.2014 // 11:11:27     
Добрый день, уважаемые коллеги, как начинающие, так и корифеи. Вступление: закалываю стандарт янтарной кислоты концентрацией 100мг на литр. Объем вводимой пробы 50мкл. Получаю пик высотой 22mAU. Детектор Agilent 1260 infiniti G1316A (DAD). Вопрос: настолько плохо поглощает янтарная кислота? Увеличивать концентрацию стандартного раствора? Страшно за колонку? Или с данным типом детектора не возможно ее определить? Заранее благодарю за любую помощь.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Osokin
Пользователь
Ранг: 54


04.09.2014 // 13:38:57     
В принципе ее определить с данным типом детектора возможно. Вопрос лишь в том, а что именно Вы хотите определить? От этого будет зависеть и метод разделения, который предполагается перед детектированием.
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37


04.09.2014 // 14:31:00     
Определить янтарную кислоту нужно в шипучей водорастворимой таблетке, в состав которой входит декстроза, сода, лимонная кислота, хлорид натрия, полиэтиленгликоль, хлорид калия. Но, к сожалению на данный момент меня смущает именно соотношение концентрация:сигнал. Это следствие того, что янтарная кислота слабо поглащает в УФ-области (макс. я наблюдала при 210 нм).
Osokin
Пользователь
Ранг: 54


04.09.2014 // 16:34:04     

Galina7520 пишет:
Но, к сожалению на данный момент меня смущает именно соотношение концентрация:сигнал.
А меня смущает, что говоря о хроматаграфическом анализе, Вы не указываете условия оного. Ну и время удерживания янтарной кислоты, упомяните тоже, пожалуйста.
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37


04.09.2014 // 19:00:21     
ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424
Serga
Пользователь
Ранг: 1806


04.09.2014 // 21:38:30     

Galina7520 пишет:
ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424
1. А КН2РО4 дает рН 2,6? Че-то сомнительно. рН метр калиброван?
2. А цитрат где выходит (время)?
3. Длина колонки? зернение?
В прямом определении чувствительность будет поганая, ежу понятно. Так что, ничего удивительного. Надо только убедиться, что это оно (4,424). Калибровку делали?
С "другим типом" детектора определить будет еще сложнее. (Если это не кондуктометр, а прибор не Dionex). Модифицировать надо, но тогда ваш анализ резко усложняется.
Страшнее всего в таких условиях- примеси, которые будут мешать определению.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Бидистиллятор из нержавеющей стали UD-2050 Бидистиллятор из нержавеющей стали UD-2050
Предназначен для получения дважды дистиллированной воды повышенного качества. Применяются в медицинских учреждениях, аптеках, лабораториях и для технических нужд. Производительность 5 л/ч.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37


04.09.2014 // 22:48:36     

Serga пишет:

Galina7520 пишет:
ПФ:0,1М водный раствор дигидрофосфата калия рН=2,6 : ацетонитрил в соотношении 95:5. Поток 1мл/мин. Длина волны 210нм. Колонка Merck, наполнитель Lichrospher RP-18. Время входа янтарной кислоты 4,424
1. А КН2РО4 дает рН 2,6? Че-то сомнительно. рН метр калиброван?
2. А цитрат где выходит (время)?
3. Длина колонки? зернение?
В прямом определении чувствительность будет поганая, ежу понятно. Так что, ничего удивительного. Надо только убедиться, что это оно (4,424). Калибровку делали?
С "другим типом" детектора определить будет еще сложнее. (Если это не кондуктометр, а прибор не Dionex). Модифицировать надо, но тогда ваш анализ резко усложняется.
Страшнее всего в таких условиях- примеси, которые будут мешать определению.

Честно говоря, я думала, что само собой разумеется, что рН доводится фосфорной кислотой ( это ГОСТ на определение органических кислот в соках). Там ПФ только этот самый буфер, без органики. Но я побоялась работать на чистом буфере. Пять процентов ацетонитрила - это уже моя самодеятельность. Таблетки не колола. Закалывала пять раз стандарт. Слишком слабый сигнал для такой концентрации. Поэтому и обратилась к специалистам. Колонка можно сказать стандартная: 250х4,6; размер зерна 5мкм. Что в стандарте может быть кроме основного вещества - не знаю. Но вообщем-то, ВЫ подтвердили мои сомнения: кислота поглощает слабо, нужно получать ее производные, которые бы сильнее поглощали в УФ-области.

Огромное Вам спасибо!
Osokin
Пользователь
Ранг: 54


05.09.2014 // 16:34:37     
Попробовал янатрную кислоту в своих условиях. На 210 нм, концентрая - указанная, объём вводимой пробы 50 мкл. Получил соотношение сигнал-шум чуть больше 20. Высота пика - где-то 40 mAU. И вместо фосфата - трифторуксусная к-та.
В общем, если у Вас соотношение сигнал-шум будет тоже на уровне 20, и даже если будет казаться высота пика маленькой, то количественное определние содержания в образце вполне возможно.
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37


08.09.2014 // 9:26:37     
Редактировано 1 раз(а)


Osokin пишет:
Попробовал янатрную кислоту в своих условиях. На 210 нм, концентрая - указанная, объём вводимой пробы 50 мкл. Получил соотношение сигнал-шум чуть больше 20. Высота пика - где-то 40 mAU. И вместо фосфата - трифторуксусная к-та.
В общем, если у Вас соотношение сигнал-шум будет тоже на уровне 20, и даже если будет казаться высота пика маленькой, то количественное определние содержания в образце вполне возможно.

Спасибо большое, за помощь. Если можно еще вопрос. Скажите, пожалуйста, а в каком количестве Вы брали трифторуксусную кислоту?
Osokin
Пользователь
Ранг: 54


08.09.2014 // 12:18:02     
0.1% раствор в воде. Но она хорошо поглощает на этих длинах волн. Лучше взять какую-нибудь другую.
Galina7520
Пользователь
Ранг: 37


10.09.2014 // 9:27:59     

Osokin пишет:
0.1% раствор в воде. Но она хорошо поглощает на этих длинах волн. Лучше взять какую-нибудь другую.
Еще раз большое спасибо за помощь.

  Ответов в этой теме: 10

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты