| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
HILIC >>>
|
 |
| Автор | Тема: HILIC | ||
|
Puzir Пользователь Ранг: 45 |
 02.01.2006 // 16:07:09
Редактировано 1 раз(а) Разрабатываю методику для HPLC анализа орг. катионов. Column: cyanopropyl; Mobile phase: acetonitrile-water containing HClO4. При уменьшении количества асетонитрила в ПФ c 95 do 80 проц., удерживние катионов уменьшается, что в полне логично для HILIC. При дальнейшем уменьшении ацетонитрила ot 80 проц и ниже, удеживание начинает увеличиватся, что тоже не является аномалией. Оптимальное разделение nри 60 проц. АСN, t.e. В ОБЛАСТИ, где наблюдаем увеличение удерживания с увеличением полярности ПФ. Мой вопрос: ПРавильно ли называть separation в этих условиях (60 proc.ACN) как HILIC? А может правильнее RP-HPLC? А нужно мне это для статьи, которую пишу.НЕ хочется облажатся.при |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
02.01.2006 // 21:01:05
Обычное обращенно-фазовое разделение (RP-HPLC). |
||
|
Puzir Пользователь Ранг: 45 |
02.01.2006 // 22:44:18
Спасибо за ответ. Возник второй вопрос. В режиме HILIC на поверхности полярной НФ образуется слой воды, и аналиты распределяются между менее полярной ПФ (c.a. CH3CN-H2O) и более полярным слоям воды на НФ. Мне непонятно, что и как меняется в прeдидущем пocte представленной системе, когда уменьшаем количество ACN НИЖЕ 80 проц., т.е. при переходе от NP-HPLC (HILIC) k RP-HPLC. Как в этом случае меняется поверхность НФ? Каким образом НФ становится менее полярной по отношению к ПФ? |
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
03.01.2006 // 4:12:09
Редактировано 2 раз(а) Не все так просто. Цианопропильная фаза вовсе не более полярна по отнощению к ПФ ацетонитрил-вода, скорее наоборот. Видимо, огромную роль в HILIC механизме удерживания имеют остаточные силанолы, особенно в узких порах, и кривизна поверхности в них. Все это должно способствовать разделению подвижной фазы в этих порах с удерживанием менее подвижной обогащенной водой фракции, которая и должна играть ключевую роль в разделении. Вне сомнения, концентрация соли играет намаловажную роль в этом процессе. Но как это выглядит на самом деле, никто не знает. На мой взгляд, на идеально гладкой полностью силилированной цианопропильной поверхности подобное удерживание невозможно. Как я уже сказал, цианопропильная фаза в принципе менее полярна чем водно-ацетонитрильная ПФ. Так что в этом режиме никакой аномалии нет. Гораздо удивительнее то, что на ней можно реализовать режим HILIC. Впрочем, это касается и многих С18 фаз... |
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
10.01.2006 // 9:30:37
Евгений совершенно прав! При таких концентрациях ацетонитрила нитрил - уже не нитрил, а больше напоминает неэндкепированную фазу С3 или С4 и катионам удерживаться на ней затруднительно, просто нечем. Однако, при этом катионы в некотором интервале рН могут делиться на силанольных группах по ионообменному механизму. Можно конечно и так работать, но не стоит ли попробовать обычный силикагель. И вообще, разделение идет одновременно по нескольким механизмам, с превалирующим действием каждого из них в своих условиях, о чем и говорит довольно сложная зависимость удерживания от содержания ацетонитрила. |
||
|
Puzir Пользователь Ранг: 45 |
10.01.2006 // 11:53:11
Втом то и дело, что паралельно мы делали аналогичные иследования и на силикагеле. Разделение по качеству очень похоже только удерживание проц. на 30-40 меньше. А зависимость удерживания от c(CH3CN)тоже проходит через минимум как и в случае нитрильной фазы, только этот минимум при меньшей концентраци ACN. ОДНАКО, если в случае нитрильной фaзы это можно обяснить переходом от HILIC k RP-HPLC, то в случае силикагеля - обяснение затруднительно. P.S. 1.Проблемы с разделением и анализoм нету. Проблема с интерпретацией результатов для статьи. 2. В обоих случаях в ПФ есть 10 mmol/l HClO4. 3. Обе колонки старые-чешские (Separon SGX...). |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
10.01.2006 // 12:19:05
Все правильно... Я сразу сказал о проявлении нескольких механизмов удерживания. И говорить о реализации только ОФ или только гидрофильного режима не приходится. Кроме того, перхлорат ион играет тут весьма немалую роль. Он довольно липофилен и охотно сольватируется как водой, так и ацетонитрилом. В сольватированном ацетонитрилом состоянии он может распределяться в алкилнитрильной НЖФ, обеспечивая повышенное удерживание катионов на нитрильной фазе. Вот и получается, что при больших концентрациях ацетонитрила у Вас происходит динамически индуцированный раздел фаз с участием нитрильных групп НЖФ, а при большом содержании воды их вклад в удерживание уменьшается, а начинает больше проявляться удерживание на непокрытых участках силикагеля + ион-парное удерживание на относительно неполярных алкильных группах за счет действия перхлорат-иона. Попробуйте увеличить содержание перхлорат иона в элюенте до 100-300 мМ. По идее, удерживание должно возрасти, а минимум - сместиться в область более высоких концентраций ацетонитрила и стать более ярко выраженным. Если заменить перхлорат трифторацетатом, то увидите аналогичную картину, но при других концентрациях. |
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
11.01.2006 // 9:36:03
Если есть желание и возможность, не вышлите ли на майло (есть в первом посте моего персонального форума) картинку с хроматограммой и зависимостями удерживания от состава элюента. Подобные вещи входят в область моих научных интересов. Есть кое какие наработки. Вполне возможно, что удастся и это интерпретировать близко к истине или по крайней мере - правдоподобно. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
11.01.2006 // 13:23:43
Давайте вывесим эти закономерности на сайте, чтобы все поглядели... |
||
|
Puzir Пользователь Ранг: 45 |
11.01.2006 // 14:38:11
Cпасибо. Готовлю материал. К СОЖАЛЕНИЮ возникли проблемы с выставлением рисунков на сайте.Поэтому смогу только переслать напр. г. Леониду по е-maily. |
||
|
Puzir Пользователь Ранг: 45 |
11.01.2006 // 15:18:26
Г. Леонид, выслал инфо. К сожалению, в писме не могу коментировать -проблемы с кирилицей. Основная проблема -обяснение увеличения удерживания в области 70-50 проц. ACN на силикагеле. С нитрильной фазой все боле мене ясно. P.S. если есть возможность и/или интерес , инфо можно можно выставлять на сайте. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 22
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
