Форумы ANCHEM.RU: Электрофорез белков в полиакриламидном геле

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Электрофорез белков в полиакриламидном геле >>>

  Ответов в этой теме: 15
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Электрофорез белков в полиакриламидном геле

lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4

24.03.2016 // 17:01:38

Добрый день! При проведении электрофореза белков в полиакриламидном геле появилась такая проблема - в центре геля ближе к концу дорожек после окрашивания Кумасси появляется размытое пятно, которое не отмывается, но это точно не проба. Есть предположения, что загрязнен один из реактивов, но вот какой - непонятно!!! Может быть кто нибудь сталкивался с такой проблемой, подскажите пожалуйста в чем причина.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

optima
Пользователь
Ранг: 322

24.03.2016 // 17:47:46

Редактировано 3 раз(а)

Могли просто запачкать - грязные руки, перчатки. Первое, что приходит на ум. Особено если серебром красите. Но на Кумасси тоже такое возможно.
Если красите с нагревом - мог пригореть)) И такое было в практике.

lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4

25.03.2016 // 11:04:59

optima пишет:
Могли просто запачкать - грязные руки, перчатки. Первое, что приходит на ум. Особено если серебром красите. Но на Кумасси тоже такое возможно.
Если красите с нагревом - мог пригореть)) И такое было в практике.

Спасибо за помощь! Будем искать постепенно какой из реактивов загрязнен)

optima
Пользователь
Ранг: 322

25.03.2016 // 11:35:12

Почему вы думаете, что это реактив? Вы сами готовите пластины или готовые используете?
Реактив скорее всего дал бы примесь по всей пластине.
Сбросьте фото, так будет понятнее.

Alex75
Пользователь
Ранг: 459

25.03.2016 // 12:16:07

Какие пробы разделяете? Предъявите фореграммы, станет понятнее. Примесь все-так, скорее всего, из пробы.

lyovinakate
Пользователь
Ранг: 4

28.03.2016 // 11:57:38

Редактировано 1 раз(а)

Делим очищенные белки после хроматографии. Гель заливаем сами. Прилагаю фото электрофореграммы для примера, при чем при разных пробах появляется это пятно внизу в центре и не отмывается!
s45.radikal.ru/i108/1603/0a/dd4ee69dc72f.jpg

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ВНИИИ мясной промышленности
Основное направление работы - контроль качества и безопасности пищевой продукции, продовольственного сырья, кормов для животных и питьевой воды. Организация и управление работами по испытаниям осуществляются в соответствии с ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2006 "Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий".

optima
Пользователь
Ранг: 322

28.03.2016 // 17:25:59

У вас в пробе после хроматографии нету высокой концентрации солей, мочевины или орг. растворителей?

Garry
VIP Member
Ранг: 1076

28.03.2016 // 18:18:48

Судя по приложенной электрофореграмме, проблемы с чистотой реактивов нет. Иначе бы проблема была бы не в виде пятна, а в виде несфокусированных полос белков, плохополимеризующегося геля, горизонтальной полосы через всю пластинку, а так локализация и внешний вид пятна наталкивает на мысль о методологии проведения окрашивания геля либо о качестве мытья стеклянных пластинок ЭФ камеры.

Alex75
Пользователь
Ранг: 459

28.03.2016 // 22:07:56

Исходя из увиденного, соглашусь с Garry - либо на этапе окраски, либо что-то приходит со стенок камеры. Вряд ли что-либо приходит из буфера.

Alex75
Пользователь
Ранг: 459

28.03.2016 // 22:08:50

Как красите фореграммы?

optima
Пользователь
Ранг: 322

29.03.2016 // 10:23:50

У вас пятно все время одинаково выглядит на разных пластинках с разными пробами?
И это действительно не похоже на плохое качество реактивов, которые вы используете.


Ответов в этой теме: 15 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты