| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Анализ углеводовов ВЭЖХ >>>
|
 |
|
toxic1978 Пользователь Ранг: 249 |
 25.04.2016 // 10:19:03
Редактировано 3 раз(а) что лично у меня всегда вызывает подозрение, когда задавая вопрос как определить то или иное вещество указывают модель хроматографа.....  Действия примерно таковы - поиск методики и выбор из имеющихся методик той, которая более подходи к вашим условиям - наличие колонки, растворителей, оборудования и реагентов для пробоподготовки. Либо потенциальная возможность покупки. А будет у вас хроматограф аджилент или какой любой - к делу не относится. Важно наличие детектора, а кто производитель - в общем то по фигу. Колонка Amino не для той пробы что вами описана. Ну а если не отвлекаться от темы - правильно вам посоветовали Rezex, правда есть и другие аналоги. Цена вопроса - порядка 2 тыр ойро. В зависимости от производителя колонки будут отличаться и затраты на систему элюента - в спецификации к каждой колонке они свои. В любом случае главное - правильная пробоподготовка, очистка от мешающих веществ пробы и без нее никак. Без правильной очистки пробы все остальные пляски с бубнами бесполезны. Кроме того, не очистите пробу - еще и колонке хана будет и боюсь, что сразу после первого раза. Подбор конкретной колонки Rezex смотрите на сайте производителя и по рекламным буклетам по временам выхода интересующих веществ. В любом случае мой совет - консультация с теми, кто анализирует объект подобный вашему по составу и предварительное обсуждение путей решения возникших проблем по ходу их работы. Просто вколол и забыл скорее всего в вашем случае не получится. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Nehochyha Пользователь Ранг: 64 |
25.04.2016 // 14:17:44
Спасибо за ответ! И еще сопутствующий вопрос по теме - как можно судить (предсказывать, предполагать???) о режиме разделения, имея только колонку и известный объект для анализа? Естесственно это приходит с опытом и определенным багажом знаний. Но где об этом можно почитать, чтобы написано было максимально доступно и разъяснено все как для школьников. |
|||||
|
Nehochyha Пользователь Ранг: 64 |
25.04.2016 // 14:22:25
Уважаемый Волгин, неожиданно получать от ВАС такие резкие ответы. Тем более вопрос был в другом. Конечно же, весь интернет проштудирован. В описаниях к колонкам приведены только результаты! Без причинно-следственных связей и объяснений что к чему и почему. Поэтому и спрашиваю умных людей. |
|||||
|
Nehochyha Пользователь Ранг: 64 |
25.04.2016 // 14:27:18
Спасибо Липид за понимание и защиту! )) И повторю недавно заданный вопрос - где можно почитать о режимах разделения на разных колонках, чтобы описано было максимально развернуто, вплоть до того что происходит на фазах при разделении? Заранее спасибо! |
|||||
|
Nehochyha Пользователь Ранг: 64 |
25.04.2016 // 14:41:26
Благодарю сердечно за развернутый ответ! А разве колонки Rezex и CarboPac не идентичны? В обеих используются сополимеры стирола и дивинилбензола с разными катионами. Разъясните, пожалуйста, если неправильно. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
toxic1978 Пользователь Ранг: 249 |
25.04.2016 // 15:21:11
привитая фаза у каждого производителя может иметь модификации, определяющие ее свойства |
|||||
|
cholesterol Пользователь Ранг: 109 |
26.04.2016 // 0:09:19
Углеводы имеют значения рКа около 12, т.е. при высоком рН они ионизируются, что позволяет их разделить с помощью анионообменной хроматографии (AEC). AEC разделения углеводов предпочтительно когда необходимо определять малую концентрацию сахаров (высокая чувствительность при амперометрическом детектировании (предел обнаружения <1 нмоль)). Еще одним преимуществом можно считать возможность влияния на селективность небольшими изменениями в pH подвижной фазы. В качестве сорбента используются макропористой дивинилбензол функционализированный алкильными четвертичными аминогруппами. Как разделять смотрите специализированную литературу. Удержание в HILIC упрощенно можно представить, как распределение аналита в водном адсорбированном слое, который образован на поверхности сорбента. Колонки на основе диоксида кремния с привитой аминофазой в сочетании с таким элюентом, как вода-ацетонитрил, довольно давно и часто используются для разделения углеводов. Основным недостатком таких колонок является очень плохая стабильность, а преимуществом, по сравнению с другими колонками для HILIC (диол, силикагель, амидные и др.), является более узкие и «правильные» пики сахаров. Теперь немного про ион-эксклюзионную хроматографию сахаров. В качестве сорбента используется сильный катионобменник чаще всего на основе полистирола-дивинилбензола. Разделение основано на комбинации эксклюзии (преимущественно для олигосахаридов) и лигандного обмена (преимущественно для моносахаридов). На поверхности катионобменника прикрепляют ионы металлов (ионы кальция, железа, серебра и др.) Эти ионы металла обеспечивает частично положительный заряд, который взаимодействует с очень небольшим отрицательным зарядом углевода (''лиганд''). Механизм разделения достаточно сложен, и я не буду вдаваться в детали. Можно сказать, что чем сильнее координационно связывается углевод с ионом металла, тем сильнее возрастает удерживание. Селективность, т.е. способность к формированию комплексов зависит от природы противоиона и его размера, а также от структуры и стереохимии углевода. В качестве элюента чаще всего используют воду или разбавленные растворы серной кислоты (5 - 10 мМ) и, как правило, разделение проводят при повышенных температурах (40-85◦C). |
|||||
|
toxic1978 Пользователь Ранг: 249 |
26.04.2016 // 9:33:49
и при 25 градусах неплохо делится, вопрос в том, что за пробоподготовку делают. А за химизм такого деления хоть и "сложно", но очень хотелось бы почитать....
|
|||||
|
Nehochyha Пользователь Ранг: 64 |
27.04.2016 // 14:50:23
Редактировано 1 раз(а) Сholesterol, огромнейшее спасибо за такой развернутый ответ!!!!! Про аминофазу пишут: "сорбенты с привитыми аминогруппами проявляют свойства слабых анионообменников". Значит, на моей колоночке можно поделить моносахара со слабым раствором щелочи в качестве элюента и амперометрическим детектором? А рефрактометр или УФ детектор ничего не увидят при таком разделении? Таким образом, имея в распоряжении рефрактодетектор и смесь моносахаридов, лучшим выходом для меня будет поменять колонку на какую-нибудь Rezex-овую? Правильный ход мыслей? |
|||||
|
Lipids Пользователь Ранг: 459 |
27.04.2016 // 17:05:05
Редактировано 1 раз(а) Моносахара отлично делятся на амино-фазе - тому куча примеров. Я не скажу что все люди так делают - но то, что большинство, это точно. Два детектора основные - рефрактометрический и по свето-рассеянию, я предпочитаю второй, но иногда лучше первый (когда есть летучие компоненты какия-то). Тот факт, что кто-то где-то что-то продемонстрировал и опубликовал одну (!) статью с тремя цитированиями за десять лет совсем не означает что нужно всё бросать и пытаться повторить этот результат какого-нибудь китайского аспиранта. там много примеров sugars in Applications |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 23
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
