Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » Дискуссии ...
  Дискуссии | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

определение протеолитической активности >>>

  Ответов в этой теме: 1

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: определение протеолитической активности
Margarita00242
Пользователь
Ранг: 1

18.10.2016 // 23:05:56     
при определении активности акрозина казеинолитическим методом в опытной пробе содержится 1)экстракт сперматозоидов (содержит акрозин), 2)раствор казеина на фосфатном буфере,3) ТХУ; в контрольной пробе 1) экстракт сперматозоидов, 2)фосфатный буфер, 3) ТХУ. После инкубации при 37 и центрифугирования после осаждения ТХУ нерасщепленного казеина оптическая плотность контроля выше чем опытной пробы. С чем это связано?
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Garry
VIP Member
Ранг: 1034


19.10.2016 // 11:32:30     

Margarita00242 пишет:
при определении активности акрозина казеинолитическим методом в опытной пробе содержится 1)экстракт сперматозоидов (содержит акрозин), 2)раствор казеина на фосфатном буфере,3) ТХУ; в контрольной пробе 1) экстракт сперматозоидов, 2)фосфатный буфер, 3) ТХУ. После инкубации при 37 и центрифугирования после осаждения ТХУ нерасщепленного казеина оптическая плотность контроля выше чем опытной пробы. С чем это связано?
Эксперимент был один или это систематическое превышение оптической плотности, определенное для ряда проведенных повторностей ? Если это результат одного, проведенного Вами эксперимента, то причины могут быть :
1. Грязная посуда, пипетки дозаторы.
2. Следы от пальцев на кварцевой кювете.
3. Для измерения оптической плотности взяты различные кварцевые кюветы (измерения желательно проводить используя одну и ту же кювету).
4. Контрольная проба не подвергалась центрифугированию и из-за этого имеет взвесь неосажденных мех.примесей из того же экстракта сперматозоидов.
Если же это система, то возможен пункт 4. (см.выше). Но и меня смущает состав контрольной пробы. В нем отсутствует раствор казеина. (Обычно при определении протеолитической активности в контроль добавляют практически все ингредиенты, но не выполняют инкубацию при 37С и сразу в пробирку добавляют ТХУ) При центрифугировании денатурированного казеина соосаждаются и др. механические примеси. Оптическую плотность при 280 или 260 нм опытной пробы "создают" низкомолекулярные продукты ферментативного протеолиза (триптофан, фенилаланин, тирозин, цистеин и пептиды их содержащие).

  Ответов в этой теме: 1

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты