Форумы ANCHEM.RU: ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов >>>

  Ответов в этой теме: 36
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: ВЭЖХ: проблема миграции пика одного из аналитов

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

30.01.2017 // 11:04:18

Редактировано 1 раз(а)

Уважаемые коллеги! Такая проблема: ВЭЖХ метод количественного определения двух аналитов в лекарственной форме. Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо. Имеет место обычная ОФ ВЭЖХ. Кто знаком с проблемой, отзовитесь. Благодарю заранее.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

sirer
Пользователь
Ранг: 46

30.01.2017 // 15:40:23

Редактировано 1 раз(а)

Вы бы поподробнее рассказали - что за вещества, что за система...
Как проявилось? Меняли ли что-то? С какой скоростью менялось время удерживания?
Без подробностей можно только гадать.

Теоретически такое может быть в случае сильно отличающихся веществ - например одно нейтральное, а второе имеет ионизирующиеся группы. Тогда смещение pH может вызвать изменение удерживания второго аналита, не затрагивая первого.

Timofey
Пользователь
Ранг: 13

30.01.2017 // 16:05:12

Avet пишет:
Уважаемые коллеги! Такая проблема: ВЭЖХ метод количественного определения двух аналитов в лекарственной форме. Время удерживания одного из аналитов стабильное, а второй, который был перед первым, движется и движется вправо, "перешагитвает" через второй аналит и уходит дальше вправо. Имеет место обычная ОФ ВЭЖХ. Кто знаком с проблемой, отзовитесь. Благодарю заранее.

Была у меня подобная приколюха с цефепимом - решилось заменой колонки на другой тип. Но и бывало, что на заведомо рабочей колонке пики менялись местами - но тут уже был косяк оператора - состав фазы не выдержали и рН не довели

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

30.01.2017 // 16:08:43

Редактировано 1 раз(а)

sirer пишет:
Вы бы поподробнее рассказали - что за вещества, что за система...
Как проявилось? Меняли ли что-то? С какой скоростью менялось время удерживания?
Без подробностей можно только гадать.

Теоретически такое может быть в случае сильно отличающихся веществ - например одно нейтральное, а второе имеет ионизирующиеся группы. Тогда смещение pH может вызвать изменение удерживания второго аналита, не затрагивая первого.

Обычная рутинная работа, обычная колонка С18, ПФ: ацетонитрил с добавкой ТЭА, подкислено укс.к-той до рН 5,9. Метод известен довольно давно.
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

30.01.2017 // 16:20:39

Редактировано 6 раз(а)

Avet пишет:
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.

Попробуйте увеличить количество ТЭА. Уменьшить объем ввода. Подольше колонку покондиционировать фазой. Колонка ведь не endcapped?
Буфер добавить попробуйте, уксусная не будет буферить при pH=5,9.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

31.01.2017 // 10:59:19

SergeyK пишет:

Avet пишет:
Вещества: сульфометоксазол и триметоприм. рН стабильно в течение работы и не меняется. Время удерживания триметоприма ползет от инжекции к инжекции по 2-3 минуты вперед. Ну вот вкратце.
Попробуйте увеличить количество ТЭА. Уменьшить объем ввода. Подольше колонку покондиционировать фазой. Колонка ведь не endcapped?
Буфер добавить попробуйте, уксусная не будет буферить при pH=5,9.

Благодарю Вас за информацию и совет, но загвоздка вот в чем: это стандартная методика, известная уже "сто лет". Именно по этой методике анализируется качество ГЛМ Бисептол на одном из ведущих фармзаводов за рубежом.Естественно, валидированная-перевалидированная. Поэтому не думаю, что проблема в методике. Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Сушильный шкаф UT-4610
Предназначены для термической обработки различных материалов в воздушной среде. Могут выполнять задачи стерилизации, сушки и хранения при различных температурных режимах с точностью 0,1°С. Применяются для проведения аналитических работ в лабораторных условиях.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Волгин
VIP Member
Ранг: 1327

31.01.2017 // 13:20:37

А в чем Вы растворяете пробу и растворяете ли каждый раз новую навеску (или свежую растертую таблетку) перед вводом? Иными словами, проходит ли у Вас КАЖДЫЙ РАЗ одинаковое время между растворением образца и вводом его в хроматограф.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

31.01.2017 // 13:40:33

Волгин пишет:
А в чем Вы растворяете пробу и растворяете ли каждый раз новую навеску (или свежую растертую таблетку) перед вводом? Иными словами, проходит ли у Вас КАЖДЫЙ РАЗ одинаковое время между растворением образца и вводом его в хроматограф.

Растворителем пробы является подвижная фаза. Методика пробоподготовки без "подводных камней": определенное число таблеток взвешивают и растирают, из порошка берется сразу несколько навесок, эквивалентных необходимой дозировке аналитов, переностяся в колбу, и далее - обычный путь. Т.е. время пробоподготовки и отрезки времени до ввода более-менее- одинаковое. Неиспользованный порошок потом выбрасывается.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

31.01.2017 // 14:37:35

Редактировано 2 раз(а)

1. Попробуйте взять новый (другой) и/или свежий ТЭА.

2. Обратите внимание на миксер, если смешивание идёт на стороне высокого давления, то попробуйте увеличить объём миксера.

kvot
Пользователь
Ранг: 165

31.01.2017 // 20:03:27

Avet пишет:
Благодарю Вас за информацию и совет, но загвоздка вот в чем: это стандартная методика, известная уже "сто лет". Именно по этой методике анализируется качество ГЛМ Бисептол на одном из ведущих фармзаводов за рубежом.Естественно, валидированная-перевалидированная. Поэтому не думаю, что проблема в методике. Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.

Не подскажите, режим элюирования градиентный или изократика? Если изократика, то как осуществляется смешивания компонентов (органической и водной фазы) насосом или оператором? Что за прибор: модель и производитель? Что за колонка: бренд и производитель? Хотелось бы более полное описание условий хроматографирования.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

01.02.2017 // 7:58:33

Avet пишет:
Пока грешу на прибор, но что это может быть - даже идей нет.

Соберите поверочные данные. Ползет оно там или нет.


Ответов в этой теме: 36 Страница: 1 2 3 4 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты