Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Не смывается пик с бланка ВЭЖХ >>>

  Ответов в этой теме: 12
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Не смывается пик с бланка ВЭЖХ
Oksana1991
Пользователь
Ранг: 3

22.08.2019 // 11:53:28     
Добрый день. Коллеги подскажите, пожалуйста, долгое время проводили анализ АФС (труднорастворимой). Легко растворима в ДМСО, Мало растворима в метаноле, практически не растворима в воде. Всегда плохо смывалась с бланка. На промывке стоял метанол. Но в последнее время пик на бланке огромный, никак не можем его убрать. Поставили на промывку ДМСО, меняли колонки (на всех одно и то же). Промывали автосемплер. ПФА=Буфер-фосфат калия, 3,5. ПФБ-ацтонитрил. Прибор - Shimadzu, автосемплер- SIl-20AC. Промыли систему ДМСО, пик уменьшился, но не исчез. Дело в том, что если писать несколько бланков подряд пик уменьшается до какого-то уровня, а затем после дня, двух простоя опять увеличивается...Меняли методику не помогает.
Думали проблема в семплере. Переставили автосемплер, все тоже самое.
Что можно сделать? чем можно попробовать смыть пик? (Заранее спасибо)))
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1801


22.08.2019 // 12:23:05     
Откуда-откуда смыть?
Бланк - это холостой анализ (Blank)?
Т.е. анализ, в котором не должно быть аналита по определению? Который, также по определению, используется для проверки чистоты реактивов и отсутствия эффекта памяти в системе?
Замените колонку, замените сэмплер, замените реактивы. Что-то из этого даст понять, в чем дело. Анализ изократический или градиентный?
Oksana1991
Пользователь
Ранг: 3


22.08.2019 // 13:12:53     

SergeyK пишет:
Откуда-откуда смыть?
Бланк - это холостой анализ (Blank)?
Т.е. анализ, в котором не должно быть аналита по определению? Который, также по определению, используется для проверки чистоты реактивов и отсутствия эффекта памяти в системе?
Замените колонку, замените сэмплер, замените реактивы. Что-то из этого даст понять, в чем дело. Анализ изократический или градиентный?


Я понимаю, что бланк-это растворитель без аналита. Колонки меняли, сэмплер тоже, подвижные фазы тоже. Анализ градиентный. Вещество остается где-то в системе(
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1801


22.08.2019 // 13:18:05     
Редактировано 6 раз(а)

Пробовали другой сэмплер, может ручной кран есть? Давно ротор меняли в сэмплере?
Эффект памяти оттуда может быть, когда изнашиваются каналы:
habrastorage.org/webt/5w/gx/i6/5wgxi6shptlhexjuaeyyvysttf0.jpeg
Но раз градиентный, то все становится сложнее, может и с колонки смываться.
Посмотрите по Ghost Peaks:
quimica.udea.edu.co/~carlopez/hplc/troubleshooting-maintenance-hplc-autosamplers-humax-2011.pdf
Есть уверенность, что это именно аналит? (подтверждающий спектр, если это диодная матрица, например)
Может такое быть, что вы день-два простаиваете, при этом подвижная фаза течет через колонку, грязь из подвижной фазы садится на колонку, а потом вымывается в первом после простоя градиенте? Т.е. чем больше фазы прокачаете через колонку до градиента, тем больше площадь пика?
Oksana1991
Пользователь
Ранг: 3


22.08.2019 // 15:57:38     

SergeyK пишет:
Пробовали другой сэмплер, может ручной кран есть? Давно ротор меняли в сэмплере?
Эффект памяти оттуда может быть, когда изнашиваются каналы:
habrastorage.org/webt/5w/gx/i6/5wgxi6shptlhexjuaeyyvysttf0.jpeg
Но раз градиентный, то все становится сложнее, может и с колонки смываться.
Посмотрите по Ghost Peaks:
quimica.udea.edu.co/~carlopez/hplc/troubleshooting-maintenance-hplc-autosamplers-humax-2011.pdf
Есть уверенность, что это именно аналит? (подтверждающий спектр, если это диодная матрица, например)
Может такое быть, что вы день-два простаиваете, при этом подвижная фаза течет через колонку, грязь из подвижной фазы садится на колонку, а потом вымывается в первом после простоя градиенте? Т.е. чем больше фазы прокачаете через колонку до градиента, тем больше площадь пика?


Ручного крана нет.Ротор не меняли более 3 лет. Сейчас пробую анализ данной АФС на другом хроматографе. Полностью другая методика (состав подвижных фаз, градиент, колонка). Первый бланк чистый, далее после закола стандартного раствора пик аналита на бланках присутствует. Значит дело не в колонке и не в составе ПФ. Уверенность есть, тк хроматограф с диодной матрицей и спектры стандарта и пика на бланке имеют одни и те же минимумы и максимумы. Была версия что субстанция садится на нержавейку...Теперь не совсем понятно что с этим делать(((Может быть поставить на промывку иглы какой-нибудь растворитель?(метанол. дмсо уже пробовали)
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1801


22.08.2019 // 16:21:02     
Редактировано 1 раз(а)

Ок, а почему до этого все было хорошо?

Есть PEEK-lined ВЭЖХ-колонки и PEEK-капилляры, если в металле дело. Но можно и тракт пассивировать, запросите у своего производителя подобные рекомендации:
www.agilent.com/cs/library/Support/Documents/Passivation%20for%20ILC.pdf
Пассивация не затрагивает колонку, на время пассивации она изымается из схемы.

Изопропанол попробуйте в промывке, увеличьте время промывки.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Изотермический калориметр TA Instruments TAM III Изотермический калориметр TA Instruments TAM III
В настоящее время TAM III является наиболее гибким и производительным калориметром, одновременно позволяющим проводить измерения с очень высокой чувствительностью и точностью. Режимы работы прибора включают изотермический, ступенчатый изотермический и медленный сканирующий.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Avet
Пользователь
Ранг: 725


23.08.2019 // 8:58:28     

SergeyK пишет:
Ок, а почему до этого все было хорошо?

Есть PEEK-lined ВЭЖХ-колонки и PEEK-капилляры, если в металле дело. Но можно и тракт пассивировать, запросите у своего производителя подобные рекомендации:
www.agilent.com/cs/library/Support/Documents/Passivation%20for%20ILC.pdf
Пассивация не затрагивает колонку, на время пассивации она изымается из схемы.

Изопропанол попробуйте в промывке, увеличьте время промывки.

Промойте ВСЕ 10% изопропанолом!
Avet
Пользователь
Ранг: 725


23.08.2019 // 9:39:45     

SergeyK пишет:
Пробовали другой сэмплер, может ручной кран есть? Давно ротор меняли в сэмплере?
Эффект памяти оттуда может быть, когда изнашиваются каналы:
habrastorage.org/webt/5w/gx/i6/5wgxi6shptlhexjuaeyyvysttf0.jpeg
Но раз градиентный, то все становится сложнее, может и с колонки смываться.
Посмотрите по Ghost Peaks:
quimica.udea.edu.co/~carlopez/hplc/troubleshooting-maintenance-hplc-autosamplers-humax-2011.pdf
Есть уверенность, что это именно аналит? (подтверждающий спектр, если это диодная матрица, например)
Может такое быть, что вы день-два простаиваете, при этом подвижная фаза течет через колонку, грязь из подвижной фазы садится на колонку, а потом вымывается в первом после простоя градиенте? Т.е. чем больше фазы прокачаете через колонку до градиента, тем больше площадь пика?

Сергей, Rotor Seal - это часть насоса? Где они конкретно находятся?
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1801


23.08.2019 // 11:06:12     
Редактировано 2 раз(а)

Ротор в многопортовом кране, в насосе он может быть, только если там клапан промывки автоматический или что-то ещё более экзотическое.
А так он в автосэмплере или ручном клапане ввода, это ротор многопортового крана, который подключает аналитическую петлю в тракт в момент ввода пробы, а потом поворачивается обратно.
Rotor seal находится под лицевой частью клапана, лицевая часть - это где многие отверстия с резьбой под капилляры по кругу. Под Rotor seal (обычно полиамид vespel) находится керамический статор, по которому полиамид скользит. Там проточены канальцы, которые при этом и коммутируются, формирую пути хода жидкости.
Avet
Пользователь
Ранг: 725


23.08.2019 // 11:36:46     

SergeyK пишет:
Ротор в многопортовом кране, в насосе он может быть, только если там клапан промывки автоматический или что-то ещё более экзотическое.
А так он в автосэмплере или ручном клапане ввода, это ротор многопортового крана, который подключает аналитическую петлю в тракт в момент ввода пробы, а потом поворачивается обратно.
Rotor seal находится под лицевой частью клапана, лицевая часть - это где многие отверстия с резьбой под капилляры по кругу. Под Rotor seal (обычно полиамид vespel) находится керамический статор, по которому полиамид скользит. Там проточены канальцы, которые при этом и коммутируются, формирую пути хода жидкости.

Т.е., что показывает приведенная Вами картинка? Это загрязнения? Как они туда попадают и как от них избавляются?
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1801


23.08.2019 // 15:34:55     
На картинке там проточки изношены, коммутация при этом происходит неправильно, проба может попадать в промывочную линию.

  Ответов в этой теме: 12
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты