Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Подавление ионизации ESI LC-MS/MS >>>

  Ответов в этой теме: 5

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Подавление ионизации ESI LC-MS/MS
Ujin
Пользователь
Ранг: 5

25.03.2020 // 23:23:22     
Редактировано 1 раз(а)

Добрый день. У нас в лаборатории с новым прибором есть проблемы с чувствительностью электроспрей-масс-спектрометра при работе с заряженными соединениями. Конкретно речь идет о пестицидах дикват-паракват (которые являются катионными) и глифосат-глюфозинат аммония (которые определяются в виде анионов). Проблема состоит в том, что добавление буфера (даже минимального количества - 10mM формиата аммония) в подвижную фазу практически на 100% снижает интенсивность сигнала.

Если говорить о глифосате-глюфозинате аммония, то их определение в основном проводится с использованием смесей вода-ацетонитрил с добавлением буфера и муравьиной кислоты (pH 3-5). Однако, мы не можем определять эти соединения, так как сигнал (в отрицательных ионах) подавляется не только буфером, но так же и кислотой. Данные соединения дают относительно хороший сигнал при добвлении аммиака (pH 9), но в основной среде и без буфера не работают используемые колонки Agilent HILIC-Z, Thermo TrinityQ1. Даже раствор с концентрацией 1 мкг/мл дета пустую хроматограмму с использованием буфера. Так же сигнал очень сильно подавляет матрица, когда начинаем работать с реальными пробами (экстракты зерновых и масличных).

Определение диквата-параквата проводим в среде вода-ацетонитрил с добавкой муравьиной кислоты (pH 3). Использование буфера, который необходим для нормальной работы колонки, так же приводит к падению сигнала в 5 и более раз, поэтому приходится работать без буфера.

Описанная проблема с падением интенсивности известна как ionization suppression, но я нигде не смог найти причин столь сильного подавления ионизации, как в нашем случае - иногда на 100%. Причем такое поведение наблюдается только для заряженных молекул. На этом же приборе определяем еще около 100 пестицидов (нейтральных, не заряженных) с добавлением буфера в подвижную фазу и никаких проблем с незаряженными соединениями не возникает, прекрасно видим все соединения на уровне 1 нг/мл и ниже.

Прибор: Thermo TSQ Fortis, хроматограф Dionex Ultimate 3000. Поток растворителя 0.3 мл/мин, температура трансфер линии 300 град, температура иглы электроспрея 350 град, напряжение +3500 (-2500 V), потоки газов выставлены по умолчанию прибором для заданного потока. Родительские и дочерние ионы, энергии соударения взяты из аппликашек, оптимизированы.

Если кто то сталкивался с подобным подавлением ионизации, помогите понять причину
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
voodensky
Пользователь
Ранг: 87


26.03.2020 // 8:41:35     

Ujin пишет:

Определение диквата-параквата проводим в среде вода-ацетонитрил с добавкой муравьиной кислоты (pH 3). Использование буфера, который необходим для нормальной работы колонки, так же приводит к падению сигнала в 5 и более раз, поэтому приходится работать без буфера.

Описанная проблема с падением интенсивности известна как ionization suppression, но я нигде не смог найти причин столь сильного подавления ионизации, как в нашем случае - иногда на 100%. Причем такое поведение наблюдается только для заряженных молекул. На этом же приборе определяем еще около 100 пестицидов (нейтральных, не заряженных) с добавлением буфера в подвижную фазу и никаких проблем с незаряженными соединениями не возникает, прекрасно видим все соединения на уровне 1 нг/мл и ниже.

Если кто то сталкивался с подобным подавлением ионизации, помогите понять причину


А где они на хроматограмме выходят? Может быть они выходят вместе с чем-то, что подавляет их ионизацию.
Если они очень рано выходят, попробуйте их подальше передвинуть. Вот здесь doi:10.1002/jms.695 у них на 10-20 минутах выходят.
billyQ
Пользователь
Ранг: 9


26.03.2020 // 9:37:09     
Редактировано 2 раз(а)

Добрый день!
Возможно, ионизация не подавляется, а просто идёт смещение равновесия в сторону образования аддуктов? Вроде аддуктов с K+, Na+ или NH4+? Или в отрицательной ионизации с формиат или ацетат ионом? Проверяли без колонки, прямым вводом в МС в буферах с разными добавками и стандартом? Нет пиков аддуктов?
Может лучше разработать метод МС/МС де ново, если родителей и дочки взяли из литературы? Бумага все терпит.
Из опыта формиат аммония и муравьиная кислота обычно не подавляют ионизацию, напротив улучшают, но конечно от молекулы зависит, все бывает.
Ujin
Пользователь
Ранг: 5


26.03.2020 // 11:03:49     
Редактировано 3 раз(а)


voodensky пишет:

А где они на хроматограмме выходят? Может быть они выходят вместе с чем-то, что подавляет их ионизацию.
Если они очень рано выходят, попробуйте их подальше передвинуть. Вот здесь doi:10.1002/jms.695 у них на 10-20 минутах выходят.

Все, что описал, относится к прямому вводу со шприца через тройник - с хроматографа подвижная фаза, со шприца - раствор соединения. Подальше передвинуть в режиме хроматографирования как раз и не получается без использования буфера, он необходим для нормальной работы колонок Hilic. Так как есть сейчас, что в кислой среде, что в основной, глифосат и глюфозинат выходят на 1 минуте. Дикват и паракват выходят на 7-10 минуте и матрица врядли влияет на них, но буфер значительно снижает сигнал.

Благодарю за советы, буду искать аддукты с аммонием и формиат-анионом, не думал об их образовании. А можно ли как то, регулируя параметры электроспрея, избежать образования аддуктов?
billyQ
Пользователь
Ранг: 9


26.03.2020 // 14:48:29     
А можно ли как то, регулируя параметры электроспрея, избежать образования аддуктов?

По идее, образование аддуктов зависит от наличия добавок в буфере и свойств самой молекулы. Слышал, что народ даже специально добавлял NaCl совсем мало в ПФ, так как для конкретно того соединения чувствительность увеличивалась для аддуктов с Na+.
Так стандартно в калибровочный раствор ПЭГ для МС Shimadzu добавляется 14 мг/л ацетата аммония, потому что МС калибруется по аддуктам ПЭГ с NH4+
virtu
VIP Member
Ранг: 2120


31.03.2020 // 16:25:56     

Ujin пишет:
Если говорить о глифосате-глюфозинате аммония... Однако, мы не можем определять эти соединения, так как сигнал (в отрицательных ионах) подавляется не только буфером, но так же и кислотой.
Так и должно быть - попробуйте в +ESI посмотреть (в скане сначала). Концентрацию буфера надо оптимизировать (нужно стремиться к минимально необходимой концентрации). Соль лучше LC-MS или ULC-MS grade использовать.


Ujin пишет:
Данные соединения дают относительно хороший сигнал при добвлении аммиака (pH 9), но в основной среде и без буфера не работают используемые колонки Agilent HILIC-Z, Thermo TrinityQ1.
Тут только подбирать другой сорбент/хром. режим, можно mixed-mode сорбенты рассмотреть (SIELC, например).


Ujin пишет:
Определение диквата-параквата проводим в среде вода-ацетонитрил с добавкой муравьиной кислоты (pH 3). Использование буфера, который необходим для нормальной работы колонки, так же приводит к падению сигнала в 5 и более раз, поэтому приходится работать без буфера.
В буфере нет необходимости, если без него всё нормально (формы пиков, удерживание и т.д.).

  Ответов в этой теме: 5

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты