| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
определение концентрации белка >>>
|
 |
| Автор | Тема: определение концентрации белка |
|
optima Пользователь Ранг: 322 |
 27.06.2006 // 15:27:01
Можно ли мерять концентрацию белка на 220 нм на спектрофотометре, т.е. по пептидной связи? |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
vesanna Пользователь Ранг: 70 |
28.06.2006 // 13:00:14
Если в растворе только один исследуемый белок, тоусловно принято считать, что при оптической плотности белка в растворе с концентрацией, равной 1 мг/мл, величина оптической плотности при 280 нм равна 1, при использовании кюветы с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют растворитель препарата. Концентрация испытуемого белка в растворе должна соответствовать требованиям методики определения. Определению белка данным методом (по одной оптической плотности) мешают присутствие нуклеиновых кислот и нуклеотидов (более 20%).В этом случае оптическую плотностьодного и того же раствора измеряют при двух длинах волн, чаще - 260 - 280 нм, содержание белка Х (мг/мл) рассчитывают по формуле Калькара: Х=1,45*D280-0,74*D260. Большинство белков имеет максимум поглощения при 280 нм, что обусловлено содержанием в них остатков триптофана и тирозина. Существуют и другие методы расчетов, при иных длинах волн. |
|
Tarxan Пользователь Ранг: 3 |
28.06.2006 // 13:28:34
А если измеряешь концентрацию не белка а полипептида, не содержащего ароматики (полиглицин например) можно при 22 нм мерить? |
|
ЛеонидК Пользователь Ранг: 3 |
31.08.2006 // 11:29:21
А что, Lowry and Biuret не подходят |
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
31.08.2006 // 16:09:03
210 -220 нм надежнее использовать не на спектрофотометре, а на ВЭЖХ, интегрируя хроматографический пик. В этом случае (если ваш пептид выходит не в мертвом об'еме) измерение не зависит от солей и всяким мыслимых и не мыслимых примесей, ведь в коротком UV поглощает практически все |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 4 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
